液液萃取法的常规

常规的液液萃取方法使用分液漏斗，需要10-1000ml的液相（每一种）。对于一步萃取，为了获得较大的回收率（在某一相中达99%以上），分配系数KD必须大于10，因为相比（Vo/Vaq）必须保持在0.1-10之间。在大部分的分液漏斗的液-液萃取方法中，定量回收需要两次或更多次的萃取。如下式：

E=1-[1/(1+KDV)]n

式中，n是萃取次数。如果某一种物质的分配系数KD=5，两相的体积相等时（V=1），必须进行3次萃取（n=3）才能获得大于889的回收率。每一次萃取都使用新鲜的溶剂。一般来说，多次萃取与一次萃取相比具有较高的萃取效率。

色谱分析中使用较多的是从水相中用与水不相溶的有机溶剂萃取有机物。通常使用的萃取器皿是分液漏斗。操作时应当选择容积较液体样品体积大1倍以上的分液漏斗，将分液漏斗的活塞擦干，薄薄地涂上一层润滑脂，塞好后再将活塞旋转数圈，使润滑脂均匀分布，然后放在萃取架上。关好活塞，将含有有机物的水样品溶液和萃取溶剂依次自上口倒入分液漏斗中，塞好塞子。一般情况下，溶剂体积约为样品溶液的30%-35%。为了增加两相之间的接触和提高萃取效率，应取下分液漏斗进行振荡。开始时摇晃要慢，每摇晃几次之后就要将漏斗下口向上倾斜（朝向无人处），打开活塞，使过量的蒸气逸出（也叫放气）。然后将活塞关闭再进行振荡。如此重复直至放气时只有很小的压力，再剧烈地摇晃3-5min后，将分液漏斗放回漏斗架上静置。待漏斗中两层液相完全分开后，打开上面的瓶塞，再将活塞慢慢地旋开，将下层液体自活塞放出。分液时一定要尽可能分离干净，有时在两相间可能出现的一些絮状物也立应时放出。然后将上层液体从分液漏斗的上口倒出，切不可也从活塞放出，以免被残留在漏斗颈上的种液体所玷污。将水倒回分液漏斗中，再用新鲜的溶剂萃取。萃取次数取决于在两相中的分配系数，一般为3-5次。将所有的萃取液合并，加入合适的干燥剂干燥后即可用于色谱测定。如果浓缩倍数不够，可将萃取液进行蒸发浓缩。

液-液萃取是指两个完全不互溶或部分互溶的液相接触后，一个液相中的溶质经过物理或化学作用另一个液相，或在两相中重新分配的过程。
 
在大抄部分情况下，一种液相是水溶剂，另一种液相是有机溶剂。溶质，在不同的溶zhidao剂中溶解度相差很大，通过液相混合，溶质从一种液相转移到另一种液相。原始溶液中溶质含量很少。

萃取过程的条件

1 ．两个接触的液相完全不互溶或部分互溶；

2．溶质组分和稀释剂在两相中分配比不同；

3．两相接触混合和分相；

4．溶剂A和B   对溶质S的溶解能力不一样，溶剂具有选择性。 

实验室液液萃取振荡器又叫分液漏斗振荡器，垂直净化振荡器，该产品具有振荡频率和振荡角度可调、定时时间长、频率和定时数字显示、多种样品架等功能，能大大提高萃取净化的效率，减轻工作强度。产品操作安装简便，可满足各种类型实验室萃取净化的需要。

液液萃取振荡器的主要特点：
1、分液漏斗振荡器可选择倾斜振荡和垂直振荡两种振荡方式，可以得到更大的混合力。

2、使用直流马达，可长时间保持稳定的振荡频率。

3、振荡频率为无级变速，倾斜时振荡频率可达20~250次/min，垂直时振荡频率可达20~300次/min。

4、分液漏斗夹具使用方便，安装或取下分液漏斗十分方便。

5、分液漏斗振荡器振荡时，运行声音在55分贝以下，无噪音，非常安静。

6、振荡频率数字显示，开机后可显示上次关机前的振荡次数。可以切换定时振荡和连续振荡。

7、启动缓冲和停机缓冲技能，启动及停止缓慢进行，减少对分液漏斗的冲击。

分液漏斗振荡器使用注意事项：
1、本振荡器采用三眼安全插座，使用时一定要接妥地线。
2、工作时，应将本机放置在平整坚固的台面上，以防振动。
3、夹具弹簧只作中小容量瓶固定之用，特大容器应相应拆去几根弹簧或采取其它方式加固。
4、本机使用完毕后应关闭电源，置于干燥通风处，并保持其清洁。

分液漏斗振荡器的维护保养：
1、正确地使用仪器的，使其处于良好的工作状态，可延长仪器使用寿命。
2、仪器在连续工作期间，每三个月应做一次定期检查：检查是否有水滴、污物等落入电机和控制元件上；检查保险丝、控制元件及紧固螺钉。
3、分液漏斗振荡器传动部分的轴承在出厂前已填充了适量的润滑脂1号钙-钠基，仪器在连续工作期间，每六个月应加注一次润滑脂，填充量约占轴承空间的1/3。
4、分液漏斗振荡器经长期使用，自然磨损属正常现象。仪器在使用一年之后，若发现电机有不正常的噪声，加热系统出现异常、传动部分轴承磨损，皮带松动或出现裂纹，加热恒温出现异常，电控元件失效等故障，本企业将继续提供服务，予以协助处理。

　　此次实验主要是为膝关节滑液组织制备单细胞，让我们一起来看看净信单细胞制备仪是如何制备膝关节滑液组织单细胞悬液，对其样品前处理效果和悬液效果如何？

　　实验地点：上海**大学医学院东区单细胞中心

　　实验仪器：单细胞悬液制备仪（温控型）JX-CKSM-6WK

　　样品前处理制备实验步骤：

　　1、打开仪器电源开关，将仪器界面中的加热点开预热一段时间持恒温。

　　2、将组织稍微剪切成小块，放入净信2ml研磨管中。

　　3、加入净信消化酶旋上盖子，上下微微晃动将其组织和消化酶均匀混合。

　　4、将混合好的研磨管放入加热模块中，再将研磨管放入热板中，盖上盖子。

　　5、启动设备，待设备停止运行后打开仪器盖子，取出样品管

　　6、将样品管中的液体和剩下的组织一起倒入过滤管中，再加入终止液后得到浑浊的液体，即单细胞悬液。

　　样品处理前后效果图：

　　显微镜下的细胞呈现：

　　实验样品组织制备注意事项：

　　1、消化酶和终止液均需要在冷冻环境下保存

　　2、消化酶解冻时需在常温条件下解冻，不可以放入水浴或者其他加热仪器中解冻，温度升高对酶的活性会有很大的影响。