广东显微镜厂家，荧光模块设计升级显微镜荧光功能

荧光显微镜常与免疫组织化学和切片技术相互结合应用于科研、检验等多个领域，比如某一些样品在常规光学显微镜下（明场下）无法被有效的观察，再比如某种病原标记物已做了标识，但在显微镜下仍然难以辨识。而荧光标识只在特定波长的光源激发下才会发光，而且发出的光也具有特定的波长。（广东显微镜厂家-广州市明慧科技显微镜）

而激光具有单一的波长，高准确性等特点，对激发样品有更好的选择性，也更容易滤除激发光对荧光的干扰，因此一般荧光显微镜都选用激光作为激发光源，可以得到较好的成像质量。这就有了显微镜荧光模块的出现，显微镜集成荧光模块的应用是多方面的，作为正置显微镜、倒置显微镜、体视显微镜的通用型荧光模块，标配紫外、蓝色、绿色等激发光组，通过滑块/拉杆/旋钮/旋钮轻松切换激发光进行荧光或明场观察，广泛应用于呼吸道疾病、生殖道疾病、结核杆菌、自身免疫性疾病等领域的荧光检测。（广东显微镜厂家-广州市明慧科技显微镜）

荧光模块设计升级显微镜荧光功能特点：
LED即开即用，开机无须预热；使用寿命长；
大功率LED荧光光源，使用寿命长，无需更换灯泡，人工维护成本低；
通过电源适配器实时显示通道和亮度情况；
多个高效荧光波段可供选择，可用于不同领域的荧光检测；
双光路荧光集成模块化设计产品。转盘切换4孔位荧光通道，联动LED照明激发;
卡口及滤光片均采用大口径，保证激发光更均匀，视野更光宽，成像更清晰；
满足大部分科研要求，支持特殊波段需求定制；
满足国内外大部分品牌显微镜定制，轻松为普通显微镜实现荧光观察一大功能。
荧光模块设计升级显微镜荧光功能，基于外形精简、操作安装简便的设计理念，将驱动电源、聚光光路及荧光滤光组整合为一体，有单色荧光、双色荧光及多色荧光等多种配置方案可选，支持特殊波段需求定制，实现荧光、明场切换观察，优于汞灯的激发光强度，为弱荧光样品观测实现更为清晰、明亮的荧光成像。显微镜荧光模块能够满足大部分的荧光科研实验需求，轻松结合不同品牌的显微镜，无需改变显微镜原有的光学系统，支持特殊波段需求定制，给普通的显微镜“一键”升级荧光。（广东显微镜厂家-广州市明慧科技显微镜）

明美LED荧光光源助力显微镜荧光升级

荧光显微镜具有特异性强、检出率高等优势，因此在各种科研和医学检查应用中使用广泛，传统荧光显微镜因为汞灯光源限制，有比较多使用难点，明美针对这些问题，投入大量人力和资金，研发出了一系列LED荧光光源，助力显微镜荧光升级和传统荧光显微镜升级LED荧光显微镜，取得市场广泛认可。

荧光显微镜的常用光源通常都是白光光源，而荧光光源有高压汞灯，氙灯，金属卤素灯和LED白光光源以及LED单波长光源，光源间各有优劣势，近期，北京用户需要替换汞灯光源，因为汞灯寿命短，需预热，操作繁琐，明美北京区域工程师提供了四通道的LED荧光光源MG-120，寿命长，即开即关，操作简单，解决的老师的使用烦恼

荧光光源MG-120采用四通道独立控制，可选BGUR等不同通道配置，寿命长，衰减慢，通常不需要更换灯泡及校准，可以即开即用；控制方便，外部配备有控制器，能进行特定波长开关和亮度记忆，减少荧光串色及荧光淬灭。

此次，用户是搭配奥林巴斯倒置显微镜IX73，该荧光光源已做测试，可适配各荧光显微镜

如果您对荧光光源感兴趣或存在疑问，欢迎与我们联系，我们将竭诚为您服务！

来源：https://www.mshot.com/article/1738.html

一、荧光基础知识

在显微成像中，荧光指的是一种光致发光现象，某些分子能吸收特定波长的光线，然后再发射出其他波长的光线的物理现象，这种分子一般称为荧光团。通常情况下，由于斯托克斯位移，荧光团的激发峰值和发射光谱之间存在差值，发射光线能量低于吸收光线，波长比激发光更长。

荧光现象有两种：自发荧光与继发荧光。自发荧光也称固有荧光，是指经照射后就能发出荧光；继发荧光也称二次荧光，物质经照射后不能或只能部分发生微弱荧光，需先用荧光染料标记处理，再经照射才能发生荧光。目前在荧光显微技术中，主要利用的是继发荧光现象。

念珠藻叶绿体的自发荧光，明美MF52-N拍摄

荧光产生包含激发和发射两个过程，在荧光显微技术中具体体现为以下几个关键部件：

（1）激发光源：主要包含以下两个指标

Ø 光源光谱覆盖发射光谱：荧光团在特定波段范围才能被大部分激发，因此激发光源的光谱范围要能匹配所观察样本中的荧光团激发特征。

Ø 发射光谱波段的强度：荧光信号一般较弱，需要使用较高亮度的激发光以产生较强信号的发射荧光信号。

（明美-四通道LED光源MG120，宽光谱 + 高光功）

（2）激发块：用于形成特异性激发/发射的一组滤光片，一般包含以下三个

Ø 激发滤光片EX：滤过光源中特定波段的光，用以激发样本中特定染料

Ø 发射滤光片EM：允许荧光团发射的特定波段的光通过

Ø 二向分色镜DM：反射激发波段的光，透过发射波段的光。透射荧光显微镜没有这个滤光片，但目前主流都是落射荧光显微镜，会有二向分光镜。

（明美可定制适配四家品牌，不同波段需求的激发块）

二、荧光显微成像的应用

荧光显微镜利用自发荧光或继发荧光现象，广泛用于生物（医学）、矿物、材料科学等领域的显微荧光观测。①在生物学领域，主要借助荧光染料标记，可准确和详细地识别细胞和亚微观细胞成分。②在矿物学领域，通常用于研究有自发荧光特性的物质，如石油、煤炭、氧化石墨烯等矿物。③在材料科学，可用于纺织工业或造纸业来分析基于纤维的材料，包括纺织品和纸张，在半导体领域，也可用来观测具有荧光特性的材料如磁珠等。

明美MF31-LED荧光显微镜观察SBS改性沥青

（MF43-N拍摄的磁珠荧光图片）

荧光显微技术在生物学领域中应用是广泛也是复杂的，主要是对细菌、细胞、组织或小型生物（如斑马鱼等模式生物）进行标记成像，它的微观层面都是通过荧光染料对分子层面进行标记。从荧光染料的选择看，通常需要考虑几个因素，一是荧光染料标记的位置，二是该染料对应的激发特征，包括吸收光谱特征和发射光谱特征。借助荧光染料，荧光显微技术不只局限于蛋白质，它还可以对核酸、聚糖进行染色，甚至钙离子等非生物物质也可以检测。以下根据染料结合的位置列举了一些常见的荧光染料及应用范围：

FITC荧光染色，MF52-N拍摄

（1）免疫荧光（IF）：主要标记的是蛋白质。免疫荧光技术利用抗体可以和相应抗原特异性结合的特性，主要有两种方式：一是利用内源荧光信号，即通过克隆技术用遗传学方法将荧光蛋白与目的蛋白相连，如GFP等；二是利用荧光标记的抗体与目的蛋白特异性结合。

Ø FITC（异硫氰酸荧光素）：是一种有机荧光染料，495/517 nm为该染料激发/发射峰值，可以和蛋白质上的基团结合，主要用于免疫荧光和流式细胞术中。

Ø TRITC（四甲基罗丹明-5(6)-异硫氰酸）：属于罗丹明家族的衍生物，550/573 nm为该染料激发/发射峰值，可与蛋白质结合。

Ø 花箐染料（cy3、cy3.5、cy5、cy5.5、cy7等系列）：非特异性吸附少，消光系数高，荧光量子产率高，从而让标记显影时背景弱，信号强。除细胞显影外，它们也常用于生物筛选、蛋白免疫印迹、生物医学显影、小动物体内成像等。

Ø Alexa Fluor系列：属于带负电荷且亲水的荧光染料系列，是不同基础荧光物质的磺化形式。这些产品标识涵盖了对应的激发波长，相比于FITC等染料，具有更好的稳定性和荧光亮度。

DAPI荧光染色，MF52-N拍摄

（2）DNA染色：主要标记核酸。同蛋白质一样，对核酸进行标记与研究同样有重要意义，如对细胞核（主要成分为核酸）进行染色标记可以判断细胞的数量和位置。

Ø DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）：当DAPI与双股DNA结合时，在358nm处有一个吸收峰值，在461nm处有一个发射峰值，其发射光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。DAPI也可与RNA结合，但产生的荧光强度不及与DNA结合的结果。DAPI可以透过完整的细胞膜，因此被广泛用于活细胞和固定细胞的染色。

Ø Hoechst（33258、33342、34580）：这三种染料都可在350nm左右的紫外光激发，在461nm处发出蓝靛色荧光。与DAPI类似，Hoechst可透过完整细胞膜，被广泛用于活细胞和固定细胞染色。

Ø PI（碘化丙啶）：是一种不能透过细胞膜的DNA染色剂。与核酸结合后，激发波长为538 nm，发射波长为617 nm。由于该染色剂无法进入完整的细胞中，因此该染色剂常用于区分细胞群中的活细胞和死细胞。

Fura2钙离子探针做的研究图片， 引自公开文献
Front. Neural Circuits 11:11. doi: 10.3389/fncir.2017.00011

（3）离子成像：研究细胞中各种离子的流动与分布对细胞活动的深入理解有重要作用。通过各种离子指示剂，如钙离子、钠离子、镁离子、锌离子等指示剂与离子结合形成荧光团，利用光谱特征检测对应离子的分布状态。

三、荧光显微成像的挑战

应用荧光显微技术进行成像的过程中，不仅要考虑成像的质量，包括分辨率、对比度、荧光信号强弱、背景光、多通道成像等，还要考虑荧光染料、光照等对样本的影响，比如荧光染料毒性、光毒性、光漂白等。以下列出了荧光显微技术应用中的常见挑战与应对方法：

汞灯需搭配带计时器的复杂控制箱来使用

（1）激发光源选择和使用。传统荧光成像使用的是高压汞灯，具有特异性的光谱特征和较高的光强，但使用有很多麻烦，首先需要预热，然后光强靠ND滤镜调节，寿命较短可能就200小时，在寿命用完前还会有光强衰减问题，需要调整ND滤镜，替换灯泡后需要重新校中。目前很多应用都用LED荧光光源取代汞灯作为荧光光源，如宽光谱大功率LED荧光光源MG-100，寿命长单个可以顶50个汞灯，光强更稳定可控，并且可以即开即用，省事省心。

明美可定制适配四家品牌的滤光片组

（2）滤光片质量和匹配度。激发块中的滤光片质量会影响激发光和发射光的透过率，影响荧光效率并带来杂散光和背景噪声问题。同时，滤光片的参数能否匹配染料的激发峰和发射峰，也会对荧光效果产生重大影响。对于简易荧光需求，明美建议使用数显荧光模块，整合光源和BGU等常用激发块，可以为四家品牌显微镜升级荧光观察，简单易用效果好。对于专业荧光需求，明美提供匹配四家品牌主流荧光显微镜的激发盒和滤光片组，可按需定制不同滤光片组合，如钙离子Fura2探针需要用U激发G发射，一般的U激发B发射滤光片组并不适合。

（MF43-N+MC50-S拍摄的小鼠脑片荧光图像）

（3）光毒性与荧光染料毒性：在生物学领域的荧光成像中，需考虑光毒性与荧光染料毒性对样本的影响，如细胞内的有机分子在与氧反应时吸收光发生分解并产生自由基，部分荧光染料本身也能产生自由基，这是引起细胞等生物样本损伤的主要来源。通常的应对思路是：①使用具有较低能量（波长较长）激发光谱的荧光染料；②尽可能低的光强和尽可能短的激发时间，需要在成像质量与样本健康之间保持平衡；③降低帧速率，尤其在长时间的荧光成像中，这种情况需要提高相机的灵敏度，保证捕获微弱的荧光信号。

（单通道荧光拍摄，经软件合成多色荧光图像）

（4）多色荧光成像：在生物学领域应用较多，尤其是在对活细胞标记成像时，需同时对多种物质进行标记，并在一个图像中显示，而大多数荧光染料具有宽发射光谱，在使用多种染料标记时会出现荧光光谱重叠现象。对于多色荧光成像，有两种应对思路，一是针对每种染料使用对应的单通道窄带滤光片，后通过软件进行合成，这种方式对成像速度及软件图像处理提出较高要求；二是使用宽光谱光源同时激发，选用双通滤光片或多通滤光片，这种滤光片的的特点是允许两种或以上波段荧光信号通过，可实现一组滤光片同时观察两种或以上荧光染料，这种方式要求相邻的发射光谱范围没有重叠，所得到的荧光信号之间能较好的被区分。

（双通滤光片荧光拍摄，镜下可同时观察到B\G两种荧光信号）

来源：https://www.mshot.com/article/1527.html

明美倒置LED荧光模块助力升级荧光显微镜

显微镜LED荧光模块助力升级荧光显微镜（无需重置荧光显微镜），作为荧光显微镜的重要附件，通过大功率的照明装置发出较短波长的激发光，诱发荧光物质发出荧光，经过物镜作用在样品上，再通过显微镜观察荧光物体的形状及其所在位置，从而对这类物质进行定性和定量的研究。

明美倒置荧光模块为三色四通道结构设计，标配三个大视野荧光通道与一个明场通道。波段切换稳定顺畅。用户可根据需求，自由选择荧光波段、数量。采用LED冷光源，基于外形精简、操作简便的设计理念，将驱动电源、LED激发光源及荧光滤光组一体化（可适配不同品牌倒置显微镜，如图中搭配奥林巴斯倒置显微镜CKX41）

 有了显微镜LED荧光模块的出现，逐渐替代高压汞灯、金属卤素灯、氙灯等光源，显微镜LED荧光模块采用大功率LED作为照明光源，具有光效率高，发热小，寿命长等优点，稳定性高，为较长时间的连续实验提供荧光照明，参数可视化、操作简单、视野升级，兼容性更好，推动荧光显微镜在科研领域中使用的普及率。

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来源：https://www.mshot.com/article/1576.html

       随着生物技术的不断发展，对蛋白质、核酸及细胞标记的要求越来越高，传统的同位素标记方法已不能适应当今的发展。而发展起来的荧光探针技术已经在蛋白质、核酸、细胞检测及免疫分析等方面显现出巨大的潜能。荧光探针技术具备高度灵敏性和极宽的动态响应时间，可以使研究人员高灵敏和高选择性地检测复杂生物分子，包括活细胞中的特定成分。尤其近年来发展起来的荧光化学传感器和分子信号系统更是使荧光探针技术的应用有了很大程度的提高和扩充。如今，它的应用已深入到药物学、生理学、环境科学、信息科学等诸多领域。随着生命科学的飞速发展，对活性高、特异选择性好和灵敏度高的新型荧光探针的需求就显得越来越迫切了。目前，用于标记或衍生的荧光探针主要有荧光素类、罗丹明类、邻苯二甲醛类等化合物。其中荧光素及其衍生物在生物研究领域中占有极其重要的位置。

       近期，有客户联系明美公司，已有一台徕卡DMIL显微镜，之前所配套的成像系统发霉不能使用，需要重新搭配一套CCD显微镜相机，明美公司在当地有办事处，带有一套500W像素CCD显微镜相机上门给老师测试，拍摄荧光和明场都合适，效果很满意。

如果您也有这方面的需求或感兴趣，欢迎与我们联系，期待与您相约！

（来源：http://www.mshot.com/kehuanli/20200302.html广州市明美光电技术有限公司）

1.安装荧光模块后观察，视野不完整，部分区域没有光照

解决办法：检查模块上激发块及挡光板拉杆有没有推到位;模块上下燕尾槽与机身、目镜观察筒是否卡位准确;工作物镜是否转到位。

2.安装荧光模块后观察，视野内图像背景过亮，目标样品被遮盖导致无法观测？

解决办法：荧光观察应该在相对较暗的环境，避免杂散光进入光路（从目镜、未接相机或未做挡光处理的三目头相机接口处有杂散光进入）;

若为三目观察，三目头相机接口是否有接相机，没接相机时是否有用黑色挡光盖子遮住（双目观察此问题不存在）

检查显微镜是否有将机身明场光源关闭（荧光观察是，应关闭明场透射照明）;

调整明场透射光源聚光镜上下位置（一般向下调节），并调整聚光镜孔径光阑（聚光镜上光阑）的大小（一般是调小）。如果有可能的话，用黑色不反光的纸直接挡住透射光照明系统视场光阑（显微镜底座上，聚光镜正下方）

3.安装荧光模块后观察，视野内成像模糊，有重影，或无法对焦成像？

解决办法：将显微镜切换到明场观察，若明场能清晰成像的话，则该模块滤色片有质量问题，需寄回维修（这种情况一般发生在产品使用一定年限后，至少是一年，若处床不久就出现，作为个例处理）

4.安装荧光模块后观察没有光照射到样品上

解决办法：检查模块亮度调节是否打得过低，各拉杆有没有推到位，特别是荧光挡板处，模块卡口有没有对准，物镜转盘有没有打到位；diyi项确定无误后，就是模块的光源坏了，将模块和适配器仪器寄回维修（当前）。

5.双激发模块荧光亮度明显偏暗

解决办法：检测光源与激发快是否一致，双激发的光源与激发快需要一一对应，检测光源选择绿光源时，激发块拉杆、后部灯箱拉杆都是拉出来的；选择蓝光时，激发块、后部灯箱拉杆都是推进的；检查后部灯箱卡位是否准确，后部灯箱拉出、推进是有一个卡位，灯珠的位置是以卡位为准，而不是完全拉出或者推进。可以放一张白纸在载物台上观察光板是否Z亮；检查亮度旋钮是否在较低位置；如果检查都没有问题，可能是灯珠变暗，需要寄回检修。

       广州明美创建于2003年，公司通过ISO9001质量管理体系认证，为“国家高新技术企业”，“重合同守信用单位”，商务部“信用评级AAA企业”，拥有自主品牌：“MSHOT”明美商标；自主研发的数码成像产品获得CE、FCC认证。明美专注于显微成像产品研发与销售，致力于研究级显微成像产品及重要部件的国产化。主营产品包括：研究级倒置、正置、体视荧光显微镜，高级显微数字相机及高级荧光模块等系列。 

十多年来，明美一直坚持创新，先后开发出130万像素到2000万像素的显微镜专用数码相机，满足明场、荧光、偏光、金相不同显微观测的需要；在研究级显微镜研发方面，明美在“研究级体视荧光显微镜开发”、“智能倒置荧光显微镜研发”方面的研究获得科技部与广东省的创新基金支持，取得了重要开发成果。 

（来源：广州市明美光电技术有限公司 ）

国外某生物YL单位已有显微镜，希望看FITC  PI荧光染色切片

流式细胞术检测细胞凋亡(FITC-PI)

实验方法：

1．用6孔板培养细胞，待细胞生长达到60%-70%，吸出旧培养基，根据实验需求处理，继续培养。

2．根据实验处理时间，把细胞培养液吸出至一合适离心管内，PBS洗涤贴壁细胞一次，加入适量胰酶细胞消化液消化细胞。室温孵育至轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶细胞消化液。需避免胰酶的过度消化。（注意：悬浮细胞不需要胰酶消化，直接收集到离心管即可）

3．加入步骤(2)中收集的细胞培养液，稍混匀，转移到离心管内，1000g离心5min，弃上清，收集细胞，用PBS轻轻重悬细胞并计数。（注意：加入步骤2）中的细胞培养液一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞，另一方面细胞培养液中的血清可以有效YZ或中和残留的胰酶；残留的胰酶会消化并降解后续加入的Annexin V-FITC导致染色失败。

解决方案：

明美外贸同事和客户沟通后推荐了明美荧光模块MF-B-LED,当时觉得长通的模块还是能看到PI,和技术等沟通评估后换成窄带，成功解决了这个问题；明美荧光模块可配蓝色、绿色、宝蓝、紫外等激发光组；可应用于呼吸道疾病、生殖道疾病、结核杆菌、自身免疫性疾病等领域荧光的检测。通过推拉滑块即可在明场或荧光的观察方式之间进行切换；不仅可以匹配明美显微镜使用，也可以匹配其他厂家显微镜，例如：奥林巴斯显微镜，尼康显微镜（以上显微镜，均采用无限远光学系统 ）；方便显微镜升级改造。良好的表现，贴切的价格，会让你惊叹！

（来源：http://www.mshot.com/kehuanli/20191203.html广州市明美光电技术有限公司）

 显微镜是我们初中时开始学的一种仪器。它用来观察和研究小物体。但显微镜结构复杂，操作部件多。刚接触显微镜的学生很难掌握，很容易忘记下一步的操作方法。这时，他们会抱着随意拧螺丝的心态，在拧螺丝的过程中可能会损坏标本甚至镜头。在这里我会教你我多年的经验和技能，希望能对你有所帮助。
我们知道，要在显微镜下观察成像，需要满足三个条件：被观察物体应有光，物镜应对准被观察物体，并掌握适当的物体距离。

  1、听
  当你转动低倍物镜时，你会听到一声咔嚓声，这证明物镜已经与光孔对准了，否则不对准就不能往下走。
  2、看
  转动反射器时，要看到一个明亮的地方，放置胶卷时，要看胶卷是否在光孔，以确保物体被照亮。
  3、慢
  在寻找图像时，我们需要先使用粗焦点螺钉。调整时一定要慢。慢慢调整网上的枪管看图像。经过仔细调整，我们可以清楚地看到图像。要做到这一点，需要满足以下三个条件，所以使用显微镜并不困难。
  显微镜是一种精密仪器。用显微镜观察物体对我们来说是一项非常精细的工作，所以在操作中不能急于求成，特别是对于初学者，我们必须按照老师的要求一步一步地进行。