荧光成像在血管神经外科手术中的优势

荧光素和ICG荧光血管造影改变了血管神经外科医生的手术方式，它提供具有丰富信息的术中视图。2021神经可视化峰会是一个汇集quan球神经外科医生的特别活动，在此期间，A教授在一次家du网络研讨会上分享了他在荧光引导下的神经外科手术经验，介绍了几个临床案例。

学习要点

• 了解荧光素钠和ICG的历史以及它们在血管神经外科的首次应用

• 探讨荧光技术在神经外科的优势，及其如何为神经外科医生提供有价值的信息

• 观看荧光引导下的神经外科手术视频，包括动静脉畸形（AVM）、搭桥和动脉瘤手术的临床案例

荧光成像在神经外科的应用：

荧光素钠和ICG的历史及其首次应用

荧光素钠自20世纪60年代末以来一直用于神经外科，最初由医生对其进行了描述，医生在开颅时进行了硬膜外血管造影术。吲哚菁绿（ICG）在很久以后才被应用于评估脑血流。它是由医生在21世纪初引入的，并决定将这种广泛应用于眼科的技术转移到神经外科。

ICGzui早用于神经外科评估动脉瘤，并逐步应用于几种神经外科病症：评估旁路通透性、AVM手术、评估海绵状血管瘤手术和神经肿瘤学中静脉引流异常。目前，脑荧光血管造影使用ICG的情况更为普遍。

荧光造影引导下的神经外科：

荧光素钠与ICG的优缺点

荧光素钠视频血管造影有一些优势，包括成本较低，精细细节的可视化，以及可以直接在显微镜下通过荧光过滤器进行观察。ICG需要单独的红外摄像机，可以将信息显示在不同的屏幕上。荧光素荧光也为无牵开器手术提供了有用的价值，这与手术创伤的降低密切相关。

荧光素钠的另一个优点是作为一种相对惰性的染料，急性毒性研究显示尽管会诱发一些严重的过敏反应，但它对人类没有特殊危害。此外，成本也非常低。荧光素钠的缺点：它在血液中至少停留一小时，需要长时间等待后才能重复使用。

ICG的半衰期为3至4分钟，因此可以在短时间内进行第二次或第三次注射。但在某些病人群体中，如对碘过敏的病人或甲状腺功能亢进的病人，它是禁用的。而且它价格昂贵。

荧光造影在动静脉畸形（AVM）手术中的应用

在一名患有左额叶动静脉畸形的患者中，选择了对侧入路，以避免优势半球，并更好地控制进料器。使用FL560术中荧光素荧光模块，可通过显微镜在手术野内精确地显示时间、给药器、静脉和AVM周围的短血管，并具有清晰的对比度。

但在使用ICG时，用户必须查看另一个屏幕，而且无法看到AVM的周围环境。必须通过从显示器转移到手术野来进行解释。荧光素荧光更容易在手术野中直接识别供血血管，并将实质图像更好地可视化。

图1：用FL560荧光素荧光模块观察AVM与用ICG观察AVM。图片由A教授提供。

荧光造影在搭桥手术中的应用

在一例烟雾病患者中，施行了颞浅动脉-大脑中动脉搭桥术(STA-MCA)。荧光素钠荧光对探索和检查STA以及在手术野直接看到动脉的功能非常有用。这是了解搭桥手术工作方式的一种非常有效的技术。它提供了良好的血管和组织灌注的可视化，尽管厚壁血管不太明显。

图2：在搭桥手术中使用FL560荧光素荧光模块。图片由A教授提供。

荧光造影在动脉瘤手术中的应用

在一名患有中动脉小动脉瘤的患者中，使用荧光素荧光支持夹闭。造影剂有助于暴露动脉瘤，并在手术野中直接观察到穿支及其灌注情况。使用ICG可能会忽略这一点，因为它需要查看另一个屏幕，且呈现的是黑白图像。在荧光素荧光下，闭塞的动脉瘤清晰可见。但由于动脉瘤手术往往很快，而且厚壁血管也不太明显，所以无法进行重复使用。荧光素钠可与ICG结合使用，两者并不相互排斥。

图注：利用FL560荧光素荧光模块进行动脉瘤夹闭。图片由A教授提供。

综上所述，荧光素视频血管造影具有手术野三维可视化的优势，可以实时进行手术操作，尤其是对狭窄视野内的小血管。此外，它的成本更低。荧光素血管造影的缺点是无法观察到厚壁血管中的血流，而且染料在血液中停留的时间较长。ICG血管造影技术和荧光素血管造影技术为神经外科医生提供了重要优势。

脂肪组织在机体能量稳态调控和体温调节中发挥着重要的作用。脂肪组织由不同类型的脂肪细胞以及脂肪细胞前体、免疫细胞、成纤维细胞、血管和神经投射物组成。目前分析脂肪组织的免疫组织化学和免疫荧光方法主要是基于对具有相对高倍率成像的薄切片。然而，这种方法存在着明显的局限性。首先，复杂的丝状结构，如交感神经和脉管系统，已知在脂肪功能中起着重要的作用，薄切片仅捕获一小部分组织，这可能导致结论因分析的组织部分不同而产生差异，很难通过薄切片进行评估。其次，由于脂肪组织独特的无定形形态特征，很难仅根据切片染色来评估脂肪组织的三维结构。鉴于这些因素，非常需要一种可提供整个脂肪组织的三维可视化并且保持高分辨率的方法。

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我们使用TH对脂肪组织的神经进行标记，如下图1、2所示，为小鼠附睾脂肪神经成像3D重构结果。该脂肪组织大小为6.0x8.5x2.5 mm，成像分辨率为横向4 μm，纵向10 μm，成像时长仅4分钟。

图1 小鼠附睾脂肪组织神经成像

图2 小鼠附睾脂肪组织神经成像（局部图）

我们使用SM22对脂肪组织的大血管进行标记，如下图3、4所示，为小鼠附睾脂肪组织大血管成像3D重构结果。该脂肪组织大小为6.0x8.5x4.0 mm，成像分辨率为横向2 μm，纵向10 μm，成像时长仅10分钟。

图3 小鼠附睾脂肪组织大血管成像

图4 小鼠附睾脂肪组织大血管成像（局部图）

参考文献：

[1] Chi J, Crane A, Wu Z, Cohen P. Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue. J Vis Exp. 2018 Jul 28;(137):58271. doi: 10.3791/58271. PMID: 30102289; PMCID: PMC6126572.

[2] Wang P, Loh KH, Wu M, Morgan DA, Schneeberger M, Yu X, Chi J, Kosse C, Kim D, Rahmouni K, Cohen P, Friedman J. A leptin-BDNF pathway regulating sympathetic innervation of adipose tissue. Nature. 2020 Jul;583(7818):839-844. doi: 10.1038/s41586-020-2527-y. Epub 2020 Jul 22. PMID: 32699414.

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什么是核酸检测？

核酸检测是指通过特殊的技术手段检测临床样本中是否存在特定的病原体核酸，从而诊断患者的感染原因。新型肺炎核酸检测主要是看它的核酸，通过实时聚合酶链反应，即RT-PCR方法来检测。检测的样本鼻拭子或咽拭子从鼻腔或者口腔用棉签沾取样本再出来做一个检测，这是目前简单、快捷的一个方法。

核酸检测中病毒灭活样本保存液的优势是什么呢？

1.降低RNA降解造成假阴性

核酸样本保存条件苛刻，RNA极易裂解，4℃仅可存放24h，运输过程过长RNA就会出现提前被降解的现象，从而导致检测假阴性增多。病毒样本保存液是采样管内一种病毒样本保护性运输介质，防止病毒采样后不能及时检测在送检过程中病毒降解，避免因病毒在检测途中提前降解造成假阴性。

2.减小核酸提取过程的感染

所有人都知道新冠肺炎的传染性高，检测过程中稍有不慎会被感染。核酸检测需要有专门的仪器和标准的分子检测实验室，需要PCR认证人员操作，步骤繁琐，全程需要5~8个小时，过程中感染风险大。

病毒灭活样本保存液采用裂解盐可以快速对呼吸道病原体进行灭活、保存，使样品失去感染性。由于是灭活病毒而不用培养病毒，首先需要的就是对病毒进行裂解失活、破坏其膜蛋白释放核酸，大大降低了核酸提取过程中被感染的危险度。

德晟研发生产的病毒样本保存液分为病毒灭活样本保存液和非灭活型，非灭活型病毒样本保存液可以完整保护好病毒的蛋白，可用于细胞培养。针对不同的需求所适用的病毒样本保存液也会有所不同，有需求的可直接来电咨询。