400UV 脂肪酶生物印迹与交联的研究

这篇由云南师范大学化学化工学院的研究学者完成，讨论脂肪酶生物印迹与交联的研究的论文，发表在重要期刊《工业催化》上。

该文以脂肪酶为印迹对象，首先对脂肪酶进行了生物印迹，然后对印迹的脂肪酶进行了乙 酰化和交联，用三硝基苯磺酸（ TNBS）法检测酰化和交联的程度。结果表明，酰化和交联后游离氨 基数减少，说明有部分氨基参与了乙酰化，使印迹酶的交联成为可能，同时交联酶结构稳定、不易失活、活性明显高于乙酰化酶。

图1/2↑

图2/2↑

结论

通过本实验发现交联印迹能降低酶的柔韧性，提高酶的刚性，增加酶对温度的耐受能力，同时交联―印迹酶活性明显高于乙酰化酶，推测可能是交联印迹后酶的构象被固定，结构稳定、不易失活，从而使交联―印迹酶的酶促反应速率大大加快。

15 mg 脂肪酶溶于0.5 mL 己烷溶液中，振荡得悬液，在悬液中依次加入 0.25 mL 交联剂 EDMA 和 4 mg 引发剂偶氮二异 丁 腈（AIBN），在4℃，366 nm 紫外光照5 h，使其发生共聚作用。用 0.5 mL 己烷洗涤共聚物 3 次，ZH将交联印迹酶真空干燥 2 小时，即得交联印迹酶（CLIE）。