采用柱后 TFA-Fix 技术或YZ器技术降低 流动相中三氟乙酸 (TFA) 对多肽质谱信号YZ作用

在反相色谱分离多肽和蛋白质的实验中，使用三氟乙酸 (TFA) 作为离子对试剂是常见的手段，流动相中的三氟乙酸通过与疏水键合相和残留的极性表面以多种模式相互作用，来改善峰形、克服峰展宽和拖尾问题。同时反相色谱与电喷雾质谱联用已成为多肽和蛋白质的分子量测定和结构分析的重要工具，但是含有三氟乙酸的流动相对质谱离子的产生具有抑zhi作用，一定程度上降低了液质联用技术的灵敏性和分析可靠性。目前常用的方法是降低流动相中 TFA 浓度，达到降低这种抑zhi作用，但是也会造成色谱分析质量的降低；而如果用甲酸代替 TFA,会造成色谱分离柱效降低，达不到理想的分离效果。本文采用双三元液相色谱系统(DGLC)，充分利用双泵的优势，将两个泵分别作为流动相的输液泵和柱后溶液的传输泵，实现与质谱的全自动连接。采用 TFA-Fix 技术或者抑zhi器技术降低流动相中TFA 对 MS 的离子产生的抑zhi作用，尤其是柱后抑zhi器技术大大提高了多肽样品在质谱上的灵敏度。测试条件一仪器：Ultimate DGP 3600 系列，包括带有在线脱气单元的双三元梯度泵 DGP-3600RS、自动进样器 WPS-3000TRS、柱温箱 TCC-3000RS、检测器 DAD-3000RS 和 MS TSQ Vantage。仪器连接装置见图1。色谱质谱条件见表1