告别峰拖尾与吸附！GLP-1 受体激动剂 LC/Q-TOF 表征方案

前言

GLP-1 受体激动剂作为近年来极具临床价值的合成多肽类药物，凭借模拟天然 GLP-1 激素调控血糖的作用机制，成为代谢疾病治疗领域的核心方向。这类药物通常由约 30 个氨基酸组成，并搭载化学修饰的脂肪酸侧链，结构极其精细，微小差异即可直接影响药物的安全性与疗效，对分析检测提出了极高要求。

在实际检测中，GLP-1 类多肽极易与金属管路、色谱硬件发生非特异性吸附，直接导致峰形拖尾、回收率偏低、数据重复性差等问题，严重影响分析结果的可靠性。因此，选择生物兼容、高惰性的液相色谱系统与色谱柱，成为实现精准分析的关键。

本方案依托 Agilent Altura 超高惰性 Peptide Plus 色谱柱，搭配 1290 Infinity II 生物液相色谱系统，构建专用于合成多肽的高效分析平台。通过对替尔泊肽（tirzepatide）与瑞他鲁肽（retatrutide）开展高分辨分析，全面展现 Altura Peptide plus 色谱柱在 GLP-1 受体激动剂检测中低吸附、高惰性、峰形优异的卓越性能，为多肽药物研发与质量控制提供可靠支撑。

实验部分

表 1. 仪器和样品条件

结果和讨论

Altura Peptide Plus 色谱柱在甲酸的流动相条件下可以实现高效分离，同时获得了尖锐、对称的色谱峰。峰面积和拖尾因子的相对标准偏差分别为 0.69%–1.22% 和 0.9%–0.83% (n = 5)。参见图 1。

图 1. 替尔泊肽和瑞他鲁肽的 LC-UV 色谱图

而在经热处理的替尔泊肽和瑞他鲁肽样品的色谱图中，Altura Peptide Plus 色谱柱表现出卓越的分离效率和分离度，多个杂质峰与 API 主成分峰充分分离，且峰形优异。 在热处理条件下，两种多肽均出现明显降解，表现为一系列分离良好、强度较低的降解产物峰，充分证明了该色谱柱在检测 细微成分变化方面的高灵敏度与高分离能力。参见图 2。

图 2. 经热处理的替尔泊肽和瑞他鲁肽与对照组的 LC-UV 色谱图比较

通过高分辨质谱鉴定其组成时，TIC 图显示出清晰的主峰，以及分离良好的微量杂质产物特征信号。进一步证明了其具有优异的柱效、分离度和检测灵敏度。低强度峰经鉴定为杂质及多肽异构体。

图 3. 替尔泊肽和瑞他鲁肽的 TIC 与解卷积质量

结论

Altura Peptide Plus 色谱柱是一款表面带有正电荷修饰的 C18 色谱柱，即使在甲酸流动相条件下仍然有尖锐对称的峰形和优异的杂质分离度。采用超高惰性的柱硬件，是帮助药物分析工作者们进行合成多肽药物药学质量研究的利器。

参考文献

1. Müller, T. D.; et al. Glucagon-Like Peptide 1 (GLP-1). Mol. Metab. 2019, (30), 72–130

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