
- 2025-01-10 10:49:53光化学柱后衍生
- 光化学柱后衍生是一种在液相色谱分析中常用的技术,它通过在色谱柱后将样品与特定的光化学反应试剂混合,并利用紫外光或可见光引发化学反应,从而改变样品的化学性质或增强其检测信号。这种技术可以实现对某些难以直接检测的化合物的灵敏分析,提高分析的准确性和选择性。光化学柱后衍生具有反应速度快、操作简便、适用范围广等优点,在环境科学、药物分析、食品安全等领域有着广泛的应用。
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光化学柱后衍生资讯
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- 新品发布 | 日立Primaide 1320柱后光化学衍生器上市
- 柱后光化学衍生法具有操作简便、快速、无需任何化学衍生试剂等优势。
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光化学柱后衍生问答
- 2024-11-13 15:14:01柱后衍生系统的原理是什么?柱后衍生的作用有哪些?
- 柱后衍生系统(Post-Column Derivative System)是一种广泛应用于液相色谱分析中的技术,旨在提高分离效果与检测灵敏度。该技术通过在色谱柱分离后,增加一个衍生反应步骤,允许分析物与试剂反应生成新的衍生物,从而增强其在检测仪器中的可检测性。本文将深入探讨柱后衍生系统的基本原理、应用场景及其对分析精度的提升作用。核心原理及工作机制柱后衍生系统的核心原理是通过化学反应对分析物进行衍生化,衍生后的化合物通常具有更强的吸光度、荧光性或更高的质谱响应,使得原本难以检测或响应较弱的化合物变得更容易检测。具体来说,色谱分析物在分离出色谱柱后,与特定的衍生试剂发生反应,这一反应通常发生在柱后设备中。此过程常常依赖于特定的反应条件,如温度、pH值和反应时间等,确保反应的选择性和高效性。柱后衍生系统的组成与工作流程柱后衍生系统的主要组成部分包括色谱柱、柱后衍生装置和检测器。在整个系统中,液相色谱柱负责分离混合物中的各组分,柱后衍生装置负责对分离出的各组分进行衍生化反应,而检测器则负责检测反应后的产物。具体工作流程如下:样品进样与分离:样品通过液相色谱系统进入色谱柱,并在柱内根据分子间的相互作用力进行分离。柱后衍生化反应:分离后的各组分流经柱后衍生装置,与预设的衍生试剂发生反应。此过程通常在特定的温控系统下进行,以保证衍生化反应的完整性和效率。产物检测与分析:衍生化产物进入检测器(如荧光检测器或质谱仪),通过对比分析信号强度与标准曲线,进行定性与定量分析。柱后衍生系统的应用柱后衍生技术具有广泛的应用价值,尤其在复杂样品的分析中,能够显著提高检测灵敏度。常见的应用领域包括:环境监测:如水质、空气中的有害物质检测,柱后衍生技术能提高某些污染物的检测限,使其更适用于低浓度分析。食品与药品检测:例如,食物中的添加剂、农药残留以及药品中的微量成分分析,柱后衍生化有助于识别和量化这些物质。临床分析:在生物样品(如血液、尿液)中,柱后衍生化技术能增强某些生物标志物的响应,有助于疾病诊断和监测。优势与挑战柱后衍生系统大的优势在于其能够有效提高难以直接检测物质的灵敏度和选择性。这一技术也并非没有挑战。衍生反应的选择性和反应条件必须得到精确控制,稍有不慎可能会影响分析结果的准确性。某些试剂可能存在毒性或不稳定性,使用时需要谨慎处理。
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- 2024-11-13 15:37:47柱后衍生系统哪些公司在做,柱后衍生化可改善色谱分离吗?
- 液相柱后衍生系统在高效液相色谱(HPLC)分析中扮演着关键角色,通过在色谱分离之后进行衍生反应,显著提高了目标化合物的检测灵敏度和准确性。以下是一些生产柱后衍生系统的公司:通微公司:该公司提供PCD-3000柱后衍生系统,采用模块化设计的衍生泵和反应器,配置灵活,可提供一级柱后衍生系统和二级柱后衍生系统供您选择,满足不同柱后衍生实验操作的需求。大连依利特分析仪器有限公司:该公司也提供多种柱后衍生系统,如P1200型柱后衍生仪等,适用于多种应用领域。Waters Corporation:作为领先的分析仪器制造商,Waters也提供了先进的柱后衍生解决方案,以满足不同领域用户的需求。Agilent Technologies:另一家知名的分析仪器制造商,同样提供高质量的柱后衍生系统,广泛应用于制药、环保、食品等领域。Thermo Fisher Scientific:该公司在分析仪器领域拥有深厚的技术积累,其柱后衍生系统以高性能、高稳定性著称,受到广大用户的青睐。Shimadzu Corporation:日本岛津公司也是一家知名的分析仪器制造商,其柱后衍生系统在技术上不断创新,为科学研究和工业生产提供了有力支持。柱后衍生化对色谱分离的影响柱后衍生化对色谱分离本身没有直接影响,但它可以间接改善色谱分离的效果。具体来说,柱后衍生化通过以下方式影响色谱分离:提高检测灵敏度:柱后衍生化可以将原本难以直接检测的化合物转化为易于检测的物质,从而提高检测灵敏度。这有助于更准确地识别和定量色谱峰,尤其是在复杂样品基质中。减少干扰物质的影响:通过柱后衍生化,可以选择性地改变被测物的物理或化学性质,使其与干扰物质区分开来,从而减少干扰物质对检测结果的影响。增强分离效果:在某些情况下,柱后衍生化可以使原本难以分离的化合物产生不同的衍生物,这些衍生物在色谱柱上的保留行为可能有所不同,从而实现更好的分离效果。但需要注意的是,这种分离效果的改善通常是针对特定化合物而言的,并非对所有化合物都适用。
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- 2022-04-28 07:08:08CEL-LAB200E7平行光化学反应仪
- CEL-LAB200E7平行光化学反应仪,是一款真正意义上的平行反应仪,是将LED光源置于10位反应器中心,LED光源旋转,实现对任一反应器同等光功率密度下的照射。反应器具备控温、进气、出气、实时取样、磁力搅拌等功能,可以同时10个样品平行实验。 平行光化学反应仪可应用到光催化剂的筛选,提高光催化的效率,实现了平行样品的分析。主要用于研究气相或液相介质,固定或流动体系,紫外光、单色光、可见光或模拟太阳光光照,恒温,同一光强等条件下的光化学反应。具有提供分析反应产物,测定反应动力学,测定量子产率等功能,广泛应用光化学催化、化学合成、环境保护以及生命科学等研究领域。 CEL-LAB200E7 平行光化学反应仪优势特点反应器标配石英反应管具备控温、进气、出气、实时取样、磁力搅拌等功能;LED光源可以围绕轴心自旋转,实现均匀平行照射;LED光源可以在线热插拔更换不同波长的光源;实现了从365nm-940nm可选的14个单色波长和可见光白光;LED光源功率30W—200W连续可调,实现宽范围功率变化;LED光源系统光功率、旋转、磁力搅拌分别独立控制。 技术参数:CEL-CLED200R旋转LED灯总成365nm,395nm,405nm,420nm,455nm,470nm,500nm,520nm,590nm,620nm,660nm,850nm,940nm,白光,模拟日光HX105恒温循环水机(0-95℃,可调)
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- 2023-06-28 09:33:13小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作概要
- 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作概要 仅供体外研究使用,不用于临床诊断! 本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)含量。 检测范围 0.781-50ng/mL 检测限 0.35ng/mL 实验原理 将小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。 试剂盒内容 试剂名称数量试剂名称数量 96孔板(预包被)196孔板覆膜2 标准品0.5ml×1标准品稀释液1.5ml×1瓶 显色剂A液6ml×1瓶样品稀释液6ml×1瓶 显色剂B液6ml×1瓶终止液6ml×1瓶 酶标试剂6ml×1瓶密封袋1 浓洗涤液(30×)1×20mL使用说明书1 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒需自备的设备及试剂 1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热) 2. 单道或多道微量加液器及吸头 3. 稀释样品的EP管 4. 蒸馏水或去离子水 5. 吸水纸 6. 盛放洗液的容器 试剂盒的储存及有效期 1. 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。 2. 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。 注意: 试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在实验后 1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒标本的采集与保存 1. 血清: 将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。 2. 血浆: 用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8oC 1000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC或-80oC 保存,但应避免反复冻融。 3. 组织匀浆: 1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆); 2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融 进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2次)。 3) 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟,留取上清即可检测。 4. 细胞裂解液: 1)贴壁细胞需要先用胰酶消化,离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集); 2)将收集到的细胞用冷PBS 洗3 次; 3)物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞,再反复冻融): i 超声破碎:取适量PBS 重悬细胞,用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂。 ii 反复冻融:将待破碎的细胞在-20 oC 以下冰冻,室温融解,反复3 次,使细胞溶胀破碎。 4)将标本于2-8 oC 1500×g 离心10 分钟,收集上清备用。 5. 细胞培养上清或其它生物标本: 请 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。 注意: 1. 以上标本均需密封保存,4oC保存应小于1周,-20oC不应超过1个月,-80oC不应超过2个月。 2. 标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。 3. 实验前红细胞裂解液必须用标准品稀释液稀释。 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒试剂准备 1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。 2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为50ng/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。 标本处理 1. 本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。 2. 实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 3. 若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。 4. 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致 ELISA实验结果偏差。 5. 若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素 较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。 6. 某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。 7. 建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作步骤 1. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 3. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用 4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 5. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 6. 温育:操作同3。 7. 洗涤:操作同5。 8. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 9. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 10. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 注意: 1. 试剂准备:准备一次实验所需要的酶标条,其它的可从微孔板上拆下,密封,按照说明书要求保存,以备下次使用。 2. 加样:实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。加样时注意不要有气泡,将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。加样或加试剂时,个孔与一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预温育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。因此,一次加样时间(包括标准品及所有样品)控制在10分钟内。推荐设置复孔进行实验。 3. 温育:为防止样品蒸发,实验时请将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内,以避免液体蒸发,洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态,同时应严格遵守给定的温育时间和温度。 4. 洗涤:充分的洗涤非常重要,在每次洗涤过程中,都要将洗涤液甩干。洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响的酶标仪读数。如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实 验过程中。 5. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟观察一次),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 6. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。 7. 如果实验室内湿度低于60%,推荐使用加湿器提高湿度水平。 实验流程 1. 实验前标准品、试剂及样本的准备; 2. 加样(标准品及样本)50μL,37℃孵育30分钟; 3. 洗板5次,加酶标试剂50ul,37℃孵育半小时; 4. 洗板5次;加入显色液A,B各50ul,37℃孵育显色15分钟 5. 加终止液50μL,立即450nm读数。 6. 计算 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒计算 各标准品及样本O.D.值扣除空白孔O.D.值后作图(七点图),如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为纵坐标(或对数坐标),O.D.值为横坐标(或对数坐标),绘出标准曲线(方程式应依回归方程计算的R2值来定,以R2值越趋近于1为好)。推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.30,根据样品O.D.值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与O.D.值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的O.D.值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 特异性 本试剂盒用于检测小鼠色素上皮衍生因子(PEDF),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。 由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。 精密度 精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100 批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。 批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。 批内差: CV
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- 2022-12-04 20:10:14光 气“在线产生原位消耗”——连续光化学反应
- 欢迎您扫描二维码获取资料研究背景在连续流工艺中,原料化合物在极小的空间内进行快速混合和换热,并在精确控制反应温度、压力的情况下,在极短的时间内完成反应。因此,对于常规下需要小心处理的反应体系,如产生剧烈放热、爆炸风险高的反应(自由基反应,光化学反应等)或使用剧毒化学品的反应,连续流反应系统适用性更高。光 气的连续在线制备光 气(COCl2)是一种非常重要的有机中间体,具有很高的反应活性,但同时毒性极高。本文作者研究了一种新的流动光化学方法,以CHCl3和氧气(O2)在光照下在线制备COCl2,获得96%的收率。这个连续流动反应系统可以合成有价值的氯甲酸酯,碳酸酯和聚碳酸酯。图1. 反应流程及装置图如上图所示,反应器由12个石英玻璃管和一个40 W的低压水银灯作组成,总持液体积12.1ml。氯仿(CHCl3) 通过注射泵注入,氧气(O2)通过质量流量控制器(MFC)输送,两股物料混合时并伴有90℃加热至气态,混合气体进入光化学反应器中(反应器温度50℃),在一定波长下,在线生成光 气,然后进一步与醇类底物进行反应得到目标产物。研究过程一.工艺参数筛选作者以正丁醇为底物筛选出光 气的最 优反应条件,从反应器出口得到的光 气进一步与丁醇反应,得到产物1a和2a,并通过核磁来计算反应收率。筛选条件时,通过控制氯仿和氧气的物料流速来调整反应时间(exposure time)以及反应配比,得到的结果如下图所示。表1.工艺参数筛选实验结果二. 半连续方式进行底物拓展在筛选出最 优的制备光 气条件后,作者尝试不同醇类作为底物,以半连续的方式(光 气采取连续流反应制备,碳酸酯采取釜式搅拌制备)进行碳酸酯的合成,均获得了不错的收率,其中部分底物收率最 高可达98%,结果如下。图2. 半连续反应流程图三. 全连续方式制备碳酸酯作者进一步将整个系统构建为全连续化,在有/无溶剂,有/无有机碱以及不同有机碱的体系下拓展了反应底物,结果如下。表2.全连续制备碳酸脂结果可以看出,将整个系统整合成全连续过程,可以达到较好的收率。全连续化的实现也能大大增加化学反应的可靠性,稳定性和安全性。总结通过连续流光化学反应器在线制备光 气是可行的;结合半连续和全连续反应系统,能成功地完成各类碳酸酯和氯甲酸酯的合成。参考文献:Org. Process Res. Dev,November 11, 2022
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