荧光标记原位杂交技术 - 产品信息 - 相关知识

2025-01-10 10:50:43荧光标记原位杂交技术: 荧光标记原位杂交技术（FISH）是一种分子生物学技术，通过荧光染料标记的核酸探针与染色体或核仁中的DNA或RNA分子杂交，直接在细胞或组织原位检测特定核酸序列。该技术具有高度的特异性和敏感性，能准确识别染色体结构变异、基因扩增或缺失等，广泛应用于遗传学、肿瘤学、产前诊断等领域。FISH技术不仅可用于研究基因表达与调控，还为疾病的早期诊断和治疗提供了重要依据。

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荧光标记原位杂交技术问答

2022-07-22 15:27:25荧光定量PCR实验，荧光标记怎么选？: 荧光定量PCR技术是将常规的PCR和荧光检测技术相结合，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，以此实现对初始模板的定量分析。荧光定量PCR技术作为当今生物学研究的重要手段之一，在基础科学、生物技术、医学研究、法医学、诊断学等多方面具有广泛的应用前景。说到荧光定量PCR技术，我们经常会问类似于“你的实验是染料法还是探针法”，“你用的探针是什么类型”等之类的问题，这其实是对荧光标记的选择。根据荧光标记的不同，可以将荧光定量PCR实验分为探针法和染料法两大类。染料法染料法利用能与DNA双链结合的染料来实现，如SYBR Green I。该染料在游离状态下呈现微弱的荧光，一旦与双链DNA的双螺旋小沟结合，其绿色荧光增强约1000倍。因此其总的荧光强度与双链DNA含量成正比，利用这一关系可以反映生成的PCR产物的量（图 1）。SYBR Green I的吸收约在497 nm，发射波长约在520 nm，与FAM荧光分子的光谱性质类似，因此在所有的荧光定量PCR设备中都是通道检测，即“FAM/SYBR Green I”通道。▲ 图1 染料法原理图理论上，所有能与双链DNA结合的染料都可以用于qPCR检测，如溴化乙锭EtBr，碘化丙啶PI，吖啶橙、Cy3等。而选择用于qPCR反应的染料通常会从信号强度、生物安全性、检测简便性和经济适用性这几个因素考虑。例如EtBr可能存在潜在的致癌性。综合考虑下来，SYBR Green I成了比较理想的选择。目前，使用Evagreen的实验者也越来越多，Evagreen作为一种新型的染料，其光谱性质与SYBR Green I类似，其优势在于：▶ 对PCR反应的抑制程度小。高浓度SYBR Green I会强烈抑制PCR反应，因此要控制其使用浓度，一定程度上降低了DNA检测的灵敏度。▶ 与DNA结合密度高。单位长度的DNA双链上Evagreen的密度更高，为饱和型染料，消除了SYBR Green I存在的“染料重分布”的缺陷，提高检测灵敏度的同时也可用于高分辨率溶解曲线HRM。▶ 化学性质更稳定，适合长期保存。TaqMan 探针TaqMan 探针基本可以满足60%以上的qPCR实验，如常规的基因表达和拷贝数变异CNV实验。TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针，荧光基团连接在探针的5'末端，而淬灭剂则在3'末端（图2）。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收; PCR扩增时, Tag酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。常用的荧光基团是FAM，TET，VIC，HEX。▲ 图2 Taqman探针MGB探针对于要分辨单碱基差异的SNP实验，采用对碱基错配容忍度更低的MGB探针，在淬灭基团后加入了DPI3基团（图3），从而提高了与靶标结合的亲和力；而且可以对靶点碱基进行化学修饰，如PeptideNucleic Acid和Locked Nucleic Acid。▲ 图3 MGB探针双杂交探针Taqman探针对探针的长度有比较严格的要求，双杂交探针则消除了这一“缺陷”。双杂交探针是由两条寡核苷酸单链组成，一条的3’端带有供体荧光分子，另一条的5’端带有受体荧光分子（图4）。游离状态下荧光供体会发出荧光，但当两条单链都匹配到模板链上时，就会发生荧光共振能量转移FRET，受体荧光分子就可以发出荧光，其荧光强度与生成的产物的量成正比。双杂交探针的优势有两点：摆脱了探针长度的限制，较长的探针可以提高与模板匹配的成功率；只有上下游两条探针都正确匹配后才能检测到受体荧光分子发出的荧光，特异性有所提高。▲ 图4 双杂交探针分子信标探针游离状态下，分子信标探针是一种茎环结构，其环状部分的15-30个碱基可以与靶标区域相结合匹配，下端的配对区域（左右一般各5-6个碱基）则由重复的GC组成，从而将5’的荧光分子和3’的淬灭基团紧紧聚在一起，荧光发生淬灭；当退火时，分子信标探针解开环并与模板靶标杂交，这样荧光分子和淬灭基团的物理距离就变大了，荧光淬灭的前提就打破了（图5）。除了MGB探针，分子信标探针也非常适合用于SNP检测。▲ 图5 分子信标探针除了上述几种类型的探针之外，还有尝试将引物和探针功能相结合的技术，如Amplifluor、LUX等，在设计难度上有所提高，但使用时更简便。各有其应用的侧重点和设计上的利弊，在此不多赘述。那么在荧光定量PCR实验中，我们应该如何进行选择呢？在这里，给大家总结了一些两种方法的区别，供大家参考。表1 染料法和探针法的区别

2021-01-06 09:46:43多色荧光原位杂交技术(M-FISH)的基本原理及应用: 荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization，FISH)是根据核酸碱基互补配对原理，用半抗原标记DNA或者RNA探针与经过变性的单链核酸序列互补配对，通过带有荧光基团的抗体去识别半抗原进行检测，或者用荧光基团对探针进行直接标记并与目标序列结合，利用荧光显微镜直接观察目标序列在细胞核、染色体或切片组织中的分布情况。M-FISH则是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术，它不仅具有FISH的优点，而且克服了FISH的许多局限，其特点是可将多次繁琐的FISH实验和多种不同的基因定位在一次FISH实验中完成。M-FISH能同时检测多个基因，分辨复杂的染色体易位和微小缺失，区分间期细胞多倍体和超二倍体等。M-FISH用激发光谱和吸收光谱不同的荧光索按一定调色方法标记不同的探针，从而对不同靶DNA同时进行定位和分析，并能对不同探针在染色体上的位置进行排序。探针荧光素颜色调配的方法有非调色法，混合调色法和比例调色法。这3种调色法中，比例调色法只需要几种荧光素就可标记多种探针，因而更有发展潜力。染色体描绘、比较基因组杂交、光谱染色体自动核型分析、交叉核素色带分析及多彩色原位启动标记等技术都是在M-FISH的基础上发展起来的。与其他原位杂交技术相比，多色荧光原位杂交具有很多优点，主要体现在：①宜于多靶杂交，可对同一个细胞学制片进行多个探针杂交；②通过在同一个核中显示不同的颜色可一次性显示全部的染色体数量或结构的变化；③能检测到传统显带方法不易发现的亚纤维染色体畸变不仅能够鉴定隐藏的易位和复杂的重拍，而且可以分析与肿瘤发生相关的重要标记染色体及其基因。目前该项技术目前已广泛应用于动植物基因组结构研究，染色体精细结构变异分析，病毒感染分析，微生态分析，肿瘤遗传学和基因组进化研究等许多领域。明美MFISH荧光原位杂交分析系统就是一款专为荧光显微图像的捕捉和处理而开发的实用图像软件。它搭配不同波段光谱滤光片的荧光显微镜以及高灵敏度的相机可对多种探针信号进行检测成像，还有区域自动曝光，自动着色，信号点增强，一键合成多色荧光通道图像，自定义各种颜色的探针，多焦面信号景深叠加，多层图像位置偏移较正等功能。深圳禾正医院的老师采用了明美的MFISH荧光原位杂交分析系统，检测中用her2/cep17的比值来测定是否有此原癌基因扩增，当HER2／CEP17比值≥2.0时，为HER2阳性；此外老师还定制了双通道荧光模块，可以同时在目镜下观察到红绿两种颜色的信号点，大大提高科室的工作效率。（来源：http://www.mshot.com/article/903.html 广州市明美光电技术有限公司）

2025-05-08 14:30:21荧光显微镜怎么调荧光: 荧光显微镜怎么调荧光：专业指南荧光显微镜作为现代生物学、医学研究和材料科学中不可或缺的工具，广泛应用于观察细胞结构、分子定位以及各类荧光标记物的追踪。如何调节荧光显微镜中的荧光信号，以获得清晰且高对比度的图像，常常是初学者和有经验的使用者都会遇到的挑战。本文将详细介绍荧光显微镜的荧光调节方法，包括如何选择合适的滤光片、设置激发光源、优化荧光强度等方面，帮助用户提升实验效果和图像质量。荧光显微镜的基本构成在调节荧光显微镜的荧光效果之前，了解其基本构成至关重要。荧光显微镜主要由光源、滤光片系统、样品载物台、反射镜和相机等部分组成。光源提供激发光，而滤光片系统则用来过滤特定波长的光线，使得激发光照射到样品上，进而激发样品发出荧光。为了优化荧光图像的质量，正确调节每一个组成部分都是必要的。选择合适的激发光源激发光源是荧光显微镜的核心之一，合适的激发波长能够大化样品的荧光信号。常见的激发光源包括氙灯、汞灯和LED灯等。选择激发源时，首先要根据荧光染料的激发波长范围来选定。不同的荧光染料对不同波长的激发光有佳响应，因此确保激发源的波长与样品的激发要求相匹配，是调节荧光显微镜的步。设置合适的滤光片系统滤光片系统在荧光显微镜中起着至关重要的作用。滤光片通常分为激发滤光片、放射滤光片和透射滤光片，分别用于选择性地控制激发光的通过、分离样品发出的荧光以及去除杂散光。在选择滤光片时，应根据染料的吸收和发射波长来确定合适的激发和发射滤光片。例如，对于绿色荧光蛋白(GFP)，选择与其激发波长(488 nm)和发射波长(510 nm)相匹配的滤光片是十分必要的。优化荧光强度在调整荧光显微镜时，荧光强度是影响图像质量的另一个关键因素。过低的荧光强度会导致图像对比度不清晰，而过高的强度则可能导致信号饱和。通过调整激发光源的强度、曝光时间以及光学增益，可以获得合适的荧光强度。样品的浓度、染料的质量以及荧光标记物的稳定性也会对荧光强度产生影响，因此在实验过程中应时刻注意这些变量。调整焦距和图像对比度调整焦距是确保荧光图像清晰的必要步骤。使用荧光显微镜时，焦距的精确调整能帮助获得清晰的图像。适当的图像对比度调整有助于突出荧光信号，减少背景噪音。通过微调曝光时间和亮度，也可以增强对比度，使得样品的荧光信号更加鲜明。总结调节荧光显微镜的荧光效果是一个精细且复杂的过程，涉及到多个因素的协调。选择合适的激发光源、滤光片系统的优化、荧光强度的调整以及图像的焦距与对比度设置，都是确保高质量荧光图像的重要步骤。通过深入理解并熟练掌握这些调节技巧，可以显著提升实验的效果和图像的清晰度。希望本文能为使用荧光显微镜的科研人员提供有价值的指导，帮助大家在荧光成像中获得佳的实验结果。

2025-10-15 17:30:20水下叶绿素荧光仪是什么: 水下叶绿素荧光仪是一种专门用于海洋和淡水生态系统研究的高精度检测设备，主要用于测定水体中的叶绿素a浓度。随着海洋环境保护和水质监测的不断升级，水下叶绿素荧光仪逐渐成为科研、环保部门、渔业以及水产养殖行业不可或缺的工具。这篇文章将全面解析水下叶绿素荧光仪的工作原理、应用领域、技术优势以及未来发展趋势，帮助读者理解其在水质分析与生态监测中的核心作用。水下叶绿素荧光仪的基本工作原理主要基于叶绿素a的荧光特性。叶绿素a作为植物光合作用的关键色素，在可见光激发下会发出特定波长的荧光。仪器通过发射特定波长的激发光，激发水中浮游植物的叶绿素a，然后检测其荧光信号强度。荧光强度与水中叶绿素a浓度直接相关，能够反映浮游植物的丰度。这种非破坏性、快速且高效的检测方式，极大提升了海洋生态环境的监测效率。应用领域方面，水下叶绿素荧光仪在海洋生物学、环境保护、渔业资源管理及水产养殖中扮演着重要角色。在海洋生态监测中，通过连续监测叶绿素的变化，科学家可以及时发现赤潮等水华现象的发生，提前采取应对措施，减少生态系统的破坏。在海洋环境保护方面，仪器广泛用于检测海水中的污染物影响，评估水质的健康状况。在渔业和养殖行业，水下叶绿素荧光仪帮助养殖者监控浮游植物的丰度，合理调配养殖环境，提升养殖成活率和产量。技术上的优势令人印象深刻。水下叶绿素荧光仪具有快速采样、实时监测的能力，远优于传统的水样采集和实验室分析方法。这一设备的便携性也使得现场监测变得更加便捷和高效。高灵敏度的检测技术确保在不同环境条件下依然能获得准确的叶绿素浓度读数。现代仪器还结合了多参数监测功能，可以同时测定悬浮颗粒、叶绿素荧光及水温、盐度等指标，为水体生态状况提供全方位的数据信息。在未来发展方面，水下叶绿素荧光仪正朝着智能化、微型化和多功能化方向发展。集成物联网技术后，实现远程监控和数据实时传输，极大增强了监测的连续性和实时性。与此利用人工智能与大数据分析，可以对海洋环境的变化趋势做出更准确的预判。微型化的发展使得仪器能够应用于更多难以进入的浅水区域或偏远海域，提高监测覆盖面。总结来看，水下叶绿素荧光仪是一项结合先进光学技术和生态监测需求的创新设备。它的出现不仅提升了水环境监测的效率与度，也为海洋生态保护和可持续利用提供了有力保障。随着技术不断创新和应用领域的拓展，未来水下叶绿素荧光仪将在全球海洋与淡水资源管理中扮演更加重要的角色，推动生态环境保护迈向智能化、科学化的新时代。

2022-12-12 13:42:23明美原位杂交FISH荧光显微镜系统应用于临床诊断: 明美原位杂交FISH荧光显微镜系统应用于临床诊断FISH（即荧光原位杂交）技术作为分子诊断的重要工具，在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。明美原位杂交FISH荧光显微镜系统利用荧光基团标记DNA探针，再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交，之后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数，以此作为临床诊断的依据。此次，上海客户实验室准备引进FISH项目，希望测试明美产品的性能，工程师推荐了荧光原位杂交FISH荧光显微镜系统（荧光显微镜MF43-N+显微镜相机MSX11+FISH软件），客户测试效果满意。明美荧光原位杂交FISH荧光显微镜系统特点：1、操作简便，检测快速，24小时内出结果，且结果标准化、易观察2、重复性好，空间定位准确3、标本来源丰富：间期细胞、分裂中期细胞、分化或者未分化细胞以及死亡或者存活的细胞都可以被检测FISH的操作相对传统DNA标记技术更简便快捷，结果直观准确，因此FISH成了许多疾病诊断的重要工具，您若对荧光原位杂交FISH荧光显微镜系统感兴趣或存在疑问，欢迎与我们联系，我们将竭诚为您服务！免责声明本站无法鉴别所上传图片、字体或文字内容的版权，如无意中侵犯了哪个权利人的知识产权，请来信或来电告之，本站将立即予以删除，谢谢。来源：https://www.mshot.com/article/1621.html

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