2025-01-10 10:50:26人类遗传资源管理
“人类遗传资源管理”是指对涉及人类遗传物质及其相关信息的研究、开发、应用、保存等活动进行规范、监督和管理的过程。这些遗传物质包括但不限于血液、组织、细胞系及DNA等。管理目的主要是保护人类遗传资源的安全、有效及合法利用,防止滥用和泄露,确保其在科学研究、医疗健康等领域的合理应用。同时,通过管理促进国际合作与交流,推动遗传资源研究的健康发展。该管理涉及法律、伦理、技术等多个层面,是维护人类遗传资源安全与利益的重要措施。

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2022-12-30 11:31:56绘制人类肿瘤微环境的空间图谱
介绍和目标免疫系统对癌症治 疗的反应可以反映患者在治 疗之后是否会有良好的结果。了解肿瘤微环境(TME)在肿瘤发生和治 疗反应中的变化对制定个性化的治 疗方案并改善癌症治 疗至关重要。借助稳定和全面的超多标成像技术,可使用免疫标志物探查髓系和淋巴系细胞的谱系和结构,而且结合特定肿瘤生物标志物时,还可以捕捉多种肿瘤中TME内的免疫反应。细胞类型特征模式,结合超多标组织成像的探查能力,可以针对免疫细胞群和TME内众多类型细胞的空间相互作用提供之前无法获得的全新认识。Cell DVE超多标成像分析整体解决方案可以使用循环染色和染料失活流程对一个完整组织切片上的数十个生物标志物进行检测和成像。Cell DIVE的核心是一个精确、灵活、开放的多标记成像解决方案,可以灵活选择多标记成像研究中常用的生物标志物抗体。Cell Signaling Technology(CST)拥有丰富的经IHC验证的抗体组合,可检测TME中的关键蛋白质,实现组织中的免疫细胞检测和表型判断。CST提供抗体偶联物,这些偶联物均经过验证,可用于Cell DIVE上,并提供经IHC验证抗体与荧光团和其他检测试剂的定制化偶联。CST采用严格的IHC验证方法,随后还会在Cell DIVE平台上进行验证,可确保成功检测蛋白质。在本研究中,我们展示了使用由数十种CST生物标志物抗体™组成的新型检测模式,在多种组织类型中进行的Cell DIVE超多标成像。多标记检测模式的开发所需的优化极少,可识别复杂的细胞类型,并揭示肿瘤微环境中的细胞间相互作用。结 果表征肿瘤微环境有助于理解导致患者预后不佳的新机制。肿瘤微环境比较复杂,通常在单个样本和不同患者样本中都是异质的。循环多标记染色和成像可在不同组织样本中实现TME探查,即使可用组织有限的情况下。在这项研究中,我们检查了12个完整组织或TMA切片中30多个生物标志物的表达(表1),重 点是潜在的免疫治 疗目标、预测性生物标志物和分割标志物。所有的CST生物标志物抗体均被连接并随机分配到一个回合。表1.研究设计:抗体和组织为了在TME中其他细胞的背景下定义免疫细胞,融合并分割了所有的生物标志物图像,并使用聚类分析和降维(UMAP)对表达进行分析。聚类分析提供了一个无偏见的方法来定义组织内的免疫细胞贡献。在这项研究中,我们展示了人类结肠腺癌(CAC;图1)的聚类分析。在这里,聚类分析将白细胞从所有其他上皮细胞和基质细胞类型中区分出来(图1C)。此外,聚类清楚地定义了淋巴细胞和骨 髓细胞类别。CAC中的骨 髓类亚型包括骨 髓祖细胞、M2巨噬细胞和另外两个未知亚型的骨 髓聚类。其他生物标志物可用于进一步定义亚型。对于淋巴类,定义了T细胞和NKT细胞聚类。另外,还确定了一个具有CD20阳性的T细胞聚类。使用机器学习进行单细胞表型分析,可以从聚类中进一步定义细胞类型。例如,在图像1D中,聚类15中的一个细胞是CD45+ CD3+ CD8+ CD4+ GRZB+ Ki67+ LAG3+ PD1+TIM3+(图1D-E;橙色圈)。聚类和单细胞空间分析被应用于研究中的所有其他组织(图2;数据未显示)。图1:CST检测模式的多标成像可在一张玻片上检查结肠腺癌(CAC)组织的免疫细胞成分(图1 A)。用多种生物标志物对玻片进行反复染色和成像(表1;图1 A、B、D板)。使用全套30种生物标志物进行分割后,聚类分析显示了组织内的免疫细胞(1C-H所示为CAC,正常结肠组织未显示)。聚类15(图1D-F)被突出显示,一个跨生物标志物的特定细胞用一个橙色的圆圈突出显示(图1D)。降维(UMAP;图1G)表示免疫细胞和其他聚类之间的关系。图2:CST检测模式在多种癌症和正常组织类型中的多标成像。玻片被反复染色和成像(表1;图2组织类型)。所有生物标志物显示在一张图像中。使用全套30种生物标志物进行分割后,聚类分析显示了组织内的免疫细胞(数据未显示)。组织特定的免疫细胞聚类是由特定的生物标志物表达模式统计出来的。在聚类之后,单细胞表型能够对聚类中的细胞群进行空间分析。方法和材料CST抗体经过了严格的验证,以确保抗体在FFPE组织上的表现。本研究中的所有抗体都是直接偶联或商业偶联物成品(表1)。偶联是使用非位点特异性化学方法进行的。抗体与四种不同的染料过量偶联,去除未结合的染料,并通过分光光度分析测量标记的程度。经过初步验证,具有最 佳标记程度和浓度的偶联抗体溶液随后用于对各种人类癌症组织和正常组织的染色。组织从商业来源获得(Pantomics;表1)。在Cell DIVE上使用四通道+DAPI对组织进行成像,并自动进行自发荧光去除、校正和拼接。使用徕卡显微系统开发的专 利软件全拼接图像进行导入、融合和分析。结 论使用Cell DIVE超多标组织成像分析整体解决方案,用30多种CST生物标志物抗体对12个完整的组织和TMA切片进行循环染色和成像。 这个CST检测模式能够识别含有不同免疫类别、细胞类型和亚型的细胞的集群。Cell DIVE超多标组织成像分析整体解决方案可保存组织,未来进一步定义免疫细胞亚型的工作可以继续使用同一组织切片上的其他CST抗体,并与研究中所有先前的生物标志物叠加。相关产品超多标组织成像分析整体解决方案Cell DIVE
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2023-02-23 09:07:02科学家揭示人类特有高清视觉的基因秘密
       荣登封面的这项研究成果来自哈佛***神经科学家Joshua Sanes教授领衔的科学家团队。研究人员采用高通量单细胞基因测序的方法,创建了灵长类动物的视网膜细胞型态分类图谱,揭示为我们带来敏锐视觉的细胞有哪些特殊的基因特征。这项研究同时为理解人类视觉在疾病情况下如何被破坏提供了重要的基础。      凹:让我们看得清清楚楚明明白白真真切切人类的视觉在哺乳动物中出类拔萃,比如我们能够阅读,分辨人脸。这些功能可不简单,需要视觉能够分辨极细微的差异,并能迅速对焦。高清视觉全得归功于视网膜中间一个极小的特殊区域——***凹,也就是眼底黄斑的中心。凹的直径不到1.5毫米,面积只占视网膜的不到1%,但大脑获得的视觉信息却有50%来自这里。     凹的特殊,还不仅是因为视线的“焦点”落在此处提供清晰影像,要知道哺乳动物中只有部分灵长类生物进化出了这个结构,比如人类。▲“那(fovea)是个稀罕物,岂是什么生物都能有的?”      凹为人类提供了视力的同时,却让科学家在解决人类视觉疾病时面临一个难题。就拿实验“劳模”小鼠来说,虽然它们为人类的科学研究提供了无数疾病模型,但它们“鼠目寸光”,视网膜没有***凹!这种 “先天缺陷”让它们在视觉相关疾病的模型上帮不上什么忙。再加上***凹结构太微小了,过去科学家在灵长类动物上的研究也止于形态解剖学的描述。     终,他们在凹和外周视网膜中均鉴定出了近70种不同类型的细胞,并且还知道了每一个类型的细胞表达哪些基因。      详尽的细胞分类图谱给科学家们提供了许多过去不知道的信息。用Sanes教授的话说,“我们现在弄清楚了凹特别在哪里。”▲凹的细胞和外周视网膜类型相似,但组成却不同        尽管细胞类型九成相同,但***凹和外周视网膜的细胞类型组成不同。更关键的是,在同类型的细胞中,***凹处的细胞检测到表达与外周不一样的基因。非常有意思的是,这些基因的表达和***凹独特的视觉信息处理极为相关,科学家们相信,可能这才是***凹功能特殊的原因。       核酸提取产品对细胞筛选的方法已日渐成熟,原理是将包被一抗的磁珠与细胞表面对应的分子特异性结合,或者将包被二抗的磁珠与已经与细胞表面分子特异性结合的一抗结合。核酸提取磁珠携带与之结合的细胞吸附与分离柱或试管上,实现阳性细胞或阴性细胞的分离。洛阳吉恩特生物自主研发生产了各类核酸提取磁珠,可以实现稳定的实验结果。
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2022-07-06 08:51:59光遗传刺激参数的频率、脉宽如何选择?
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2021-09-05 12:36:53胞外记录技术与光遗传
阻抗与胞外场电位 (EFP)记录阻抗和胞外场电位记录是非侵入性的“非标记”方法,非常适用于分析可兴奋的,完整的培养细胞的细胞收缩和动作电位,例如,心肌细胞和神经元。胞外场电位是细胞产生的电位,例如神经或肌肉细胞的细胞外。 电生理学研究使用细胞外微电极研究这些电位。 在这些实验中,细胞外场电位被检测为电势。对于个体细胞,细胞外电位的时间过程理论上与跨膜电流成反比。电阻抗是在施加电压时对电流的电阻的测量,具有幅度和相位。换句话说,它是在特定频率ω下单个复指数的电压 - 电流比。可以以欧姆直接测量或显示阻抗。实际上:接种到电阻抗芯片或板上的细胞覆盖电极,从而产生更高的可检测电阻。阻抗测定可以在一个频率或一定频率范围内进行。取决于施加的频率ω,电子穿过或穿过细胞,因此可以检测细胞形态和覆盖率的不同参数。电阻抗测量适合于在长期研究中应用毒理学物质或影响细胞-细胞或者细胞-基质接触的物质时检测心肌细胞的收缩运动,细胞生长和运动以及细胞形态的变化。光遗传学:光刺激触发细胞中动作电位光遗传学是一种可用于控制可兴奋细胞的新技术:可在表达特定光敏离子通道的细胞上用具有毫秒级时间精度的光脉冲对细胞进行去极化,从而准确地触发动作的电势。光遗传学在心脏安全性研究方面提供了巨大潜力:影响心肌细胞收缩的化合物可能以依赖于使用的方式影响离子通道和受体,从而对不同的搏动率产生不同的影响。利用这种技术,可以简单地利用光脉冲在不同跳动范围内使心肌细胞起搏,以发现毒素的使用依赖效应。在iPSC分化的心肌细胞中,光遗传学致动器 通道视紫红质已被证明非常适合并被接受为模型。用于通道视紫红质的瞬时转染试剂盒可从iPSC细胞提供者获得,例如NCardia,用于在心脏安全性研究中使用光遗传学。Nanion光遗传设备   CardioExcyte 96 是一种用于研究iPSC分化的心肌细胞的阻抗和胞外场电位的装置。 专门开发的光遗传盖“SOL”能够实现细胞的光遗传学起搏。
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2021-11-24 15:09:23光遗传耗材选配小贴士,一文教会你如何选配!
在光遗传实验中,需要用到跳线、转环、光纤、陶瓷插针等众多耗材,并且这些耗材又存在光纤芯径、NA值、长度、陶瓷头直径等众多参数,因此许多科研人在做光遗传实验并进行耗材选配的过程中难免会出现一些疑惑,面对如此多的参数,不知道哪些才是自己所需求的,接下来本文就将带大家了解在不同实验场景中光遗传耗材的推荐使用参数。▲光遗传实验耗材搭配在此之前,我们首先要了解一下在光遗传实验中使用到的各个耗材及其规格。我们将以瑞沃德IOS-465nm/IOS-589nm光遗传及其耗材举例:一、参数介绍耗材光纤由纤芯、包层、镀层、材料层、外层护套组成。芯径:在光纤中大部分的光功率由纤芯通过。数值孔径(NA):决定了光纤能够接受入射光的入射角范围,NA值越大,范围越大,同样也对应着其发射光的角度范围。陶瓷头直径:光纤一端为FC/PC接头,另一端为陶瓷头,陶瓷头外径为1.25mm和2.5mm两种规格。陶瓷插针:芯径:100、200、300、400μm,根据目标脑区或动物的大小,选择不同的芯径规格;NA值:0.22、0.39、0.50,根据目标脑区或动物的大小,选择不同的NA值;陶瓷头外径:Ø1.25mm(6.4mm长)、Ø2.5mm(10.5mm长),一般情况下,小鼠推荐使用Ø1.25mm,大鼠推荐使用Ø2.5mm的规格;光纤长度:2-20mm,步径为0.5mm(可定制);透光率≥90%,光纤弯曲率≥90%。(注:黑色陶瓷插针与白色陶瓷插针的区别在于,白色陶瓷插针由于陶瓷头为白色,易透光,在激光输出过程中可能产生漏光现象,黑色陶瓷插针则不易漏光)跳线:做清醒动物实验时,用于连接光源与转环芯径:100、200、300、400μm;NA值:0.22、0.39、0.50;两端皆为FC/PC陶瓷头,默认长度为1m,可定制光纤:芯径:100、200、300、400μm;NA值:0.22、0.39、0.50;FC/PC陶瓷头至直径1.25或2.5mm陶瓷头,默认长度为1m,可定制光纤旋转器(转环):适用于清醒自由活动动物,避免动物的活动过程中,光纤等线路的缠绕,适用于长时间的刺激和观测实验。1x1 FC-FC光纤旋转器陶瓷套管:适用于光纤与陶瓷插针的临时连接。具有Ø1.25mm、Ø2.5mm两种规格可选,长度分别为7mm和11.5mm。一分多光纤:用于实验同时刺激多个脑区或多只动物。一分二光纤一分三光纤一分四光纤融合光纤:用于对实验目标脑区进行双光源刺激。其他耗材:激光功率计:测量光纤末端功率值;防尘帽:用于保护PC/UPC端面的陶瓷插针,以及ST/SC/FC跳线;光纤剥离刀:剥离光纤涂覆层。二、耗材参数推荐现在我们已经了解了光遗传学实验中各个耗材的参数,接下来介绍不同实验中各个耗材的参数推荐:常规单通道刺激(清醒动物):小鼠:光源、跳线、转环、光纤、陶瓷插针:100、200 μm芯径;0.22、0.39NA值;Ø1.25mm陶瓷头大鼠:光源、跳线、转环、光纤、陶瓷插针:300、400 μm芯径;0.39、0.50NA值;Ø2.5mm陶瓷头双(多)通道刺激(清醒动物):小鼠:光源、跳线、转环、一分二光纤、陶瓷插针:100、200 μm芯径;0.22、0.39NA值;Ø1.25mm陶瓷头大鼠:光源、跳线、转环、一分二光纤、陶瓷插针:300、400 μm芯径;0.39、0.50NA值;Ø2.5mm陶瓷头(注:若大鼠上同时刺激多个脑区,防止空间不够的问题,此时可选取Ø1.25mm陶瓷头。)双光源刺激:小鼠:IOS-465/IOS-589光源、融合光纤、陶瓷插针:100、200 μm芯径;0.22、0.39NA值;Ø1.25mm陶瓷头大鼠:IOS-465/IOS-589光源、融合光纤、陶瓷插针:300、400 μm芯径;0.39、0.50NA值;Ø2.5mm陶瓷头(注:上述三种情况中,光纤、跳线的芯径规格与NA值,以及陶瓷头直径,应与陶瓷插针的参数一致。)答疑小贴士内容拓展小贴士光遗传是什么?光遗传学技术是光学原理与基因工程相结合,利用遗传学方法将光敏感通道蛋白表达在特定细胞群中,这些光敏感通道蛋白会在特定波长的光照下开放,将质子泵出胞外,或者将阴离子(如Cl-)、阳离子(如Na+和K+)泵入胞内,使细胞超极化(hyperpolarization)或去极化(depolarization),从而可以瞬时抑 制或兴奋细胞。光遗传实验步骤:选择合适光敏蛋白并构建质粒;将光敏蛋白包装到病毒载体中;在目标脑区注射病毒;埋植光纤插针;按既定激光参数进行光刺激;结合行为学、电生理、光纤记录等进行检测。
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