2025-01-21 09:30:33固相萃取装置图
固相萃取装置图展示了固相萃取系统的构成与布局。该装置通常包括萃取柱、样品瓶、溶剂瓶、泵系统及控制系统等关键部件。萃取柱内填装有固相萃取材料,用于选择性吸附样品中的目标化合物。泵系统推动溶剂流经样品及萃取柱,实现样品的预处理与净化。通过装置图,可直观了解各部件连接方式与操作流程,有助于优化实验条件,提高萃取效率与纯度。固相萃取广泛应用于环境、食品、药物分析等领域。

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2023-02-01 09:19:52阿斯曼尔QuickTrace M96固相萃取装置
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2023-02-01 09:18:16阿斯曼尔QuickTrace M8固相萃取装置
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2023-02-01 09:17:03阿斯曼尔QuickTrace M48固相萃取装置
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2025-04-14 18:30:13快速蛋白液相色谱图怎么看?
快速蛋白液相色谱图怎么看 液相色谱(HPLC)技术广泛应用于蛋白质分析,尤其是在生物制药、临床检测以及科研领域中,其高效、的特性使得它成为蛋白质分离和定量分析的方法之一。尤其是在蛋白液相色谱图的解析过程中,如何快速、准确地理解图谱信息是实验成功的关键。本文将详细介绍如何解读快速蛋白液相色谱图,帮助科研人员和工程师更好地应用这一技术。 液相色谱图中关键的组成部分就是色谱峰,它代表了待分析样品中各个组分在色谱柱中分离的结果。每个峰值对应着样品中某一成分的出现,峰的高低反映了该成分的浓度,峰的宽度则与分离度以及实验条件的优化程度相关。因此,快速蛋白液相色谱图的解读不仅仅依赖于峰的数量,还需要从峰的形态、保留时间等多个维度进行综合分析。 在快速蛋白液相色谱中,通常会遇到多种不同类型的蛋白质,它们在色谱柱上的保留时间各不相同,因此图谱中的每一个峰都代表一个或多个蛋白质的特定特征。在分析时,首要任务是通过与标准样品的对比,确定每个峰的对应成分。通常,蛋白质的保留时间与其大小、电荷以及亲水性等物理化学性质有关。通过对比这些特性,可以推测每个峰代表的蛋白质成分。 对于快速蛋白液相色谱图的进一步解析,需要注意以下几个方面。样品的前处理非常关键。若前处理不当,可能会影响色谱分离的效果,进而导致色谱图中峰形的变异。常见的问题包括峰拖尾、峰展宽等,这些问题通常是由于样品中杂质、溶剂的选择或温度控制不当等原因造成的。优化样品的纯度和实验条件有助于获得更加的色谱图。 峰形的分析非常重要。在理想的液相色谱图中,每个峰应该是对称的,而任何偏移、拖尾或变宽都可能提示实验中的问题。例如,若某个蛋白峰出现拖尾,可能是由于与色谱柱的相互作用过强,或者是溶剂条件不适当所致。通过调整流动相的组成或提高柱温等方法,通常可以改善这些问题。 再者,快速蛋白液相色谱图中,峰的分辨率也是一个不可忽视的因素。较低的分辨率可能会导致蛋白质之间的峰重叠,进而影响定量分析的准确性。为了提高分辨率,可以尝试改变流动相的pH值或离子强度,或者使用不同类型的色谱柱进行分离。合适的分辨率不仅能够清晰分离各组分,还能提高分析的灵敏度和准确性。 结合外部数据,如蛋白质的标准图谱或数据库匹配,可以进一步验证液相色谱图的结果。这一步骤对于确认样品中的蛋白质种类尤为重要,尤其在复杂样品分析时,数据库匹配可以显著提高分析的可靠性。 快速蛋白液相色谱图的解读不仅依赖于图谱中峰的数量和形态,还需要从多方面考虑,包括样品前处理、峰形分析、分辨率等因素。只有通过全面细致的分析,才能掌握样品中蛋白质的组成与特性,从而为进一步的科研和应用提供有力的支持。
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2022-11-08 10:46:28机器人走进实验室系列(三)固相萃取篇:Extraction+互联设备实现全自动固相萃取工作流
样品制备 — 从基质中分离出目标分析物,并尽可能去除干扰,是生物分析工作流程的关键组成部分。为了获得准确、精密、可重现的实验结果,往往需要熟练且有经验的分析人员,因为任何错误或不一致都可能导致定量不准确或重做。这些错误或不一致包括在生成校准曲线和QC样品时的移液错误、遗漏或错误标记的样品、不正确的试剂添加等情况。将自动化引入生物分析实验室不仅有助于最小化或消除这些挑战,还可以解放分析人员的双手,使其能够从事其他更高价值的工作。下面小编就向大家介绍如何使用Andrew+移液机器人制备校准曲线,对QC样品(血浆中的多种小分子药物)进行稀释。目标分析物包括乙酰唑胺、扑热息痛、泼尼松、2-甲基苯甲酰胺、可的松、美托洛尔和阿米替林。然后,使用Andrew+搭配Extraction+模块,对样品进行全自动SPE。制备好的样品使用LC-MS进行定量分析,获得校准曲线结果以及重现性和回收率指标。图1. Andrew+搭配Extraction+ SPE新模块,执行自动化SPE样品制备和LC-MS分析工作流,分别使用Oasis HLB SPE小柱和SPE萃取板。 优势使用Andrew+ Robot搭配Extraction+固相萃取新模块,可实现标准曲线制备、QC样品稀释和无人值守的全自动SPE工作流;OneLab软件拥有简洁直观的用户界面,便于用户轻松设计和执行各种自动化样品制备方案,轻松实现方法创建和方法转移;1cc、3cc和6cc固相萃取小柱或96孔萃取板均可在Extraction+互联设备上实现固相萃取;受OneLab软件控制的可编程的真空泵压力曲线可提高SPE方法的重现性。实验方案一制备校准曲线,样品稀释,使用Oasis HLB 1cc SPE小柱执行固相萃取 样品进行反相固相萃取工作流:*注意:沃特世于1996年推出Oasis HLB, 是所有Oasis吸附剂的主要成分。可耐受pH 0-14,采用独特的水可浸润性聚合物吸附剂,省去了活化和平衡步骤,是SPE的新标杆。以Andrew+移液机器人进行全自动SPE为例,介绍OneLab软件中的自动化方法,Andrew+将上图所示的SPE步骤自动化。图2. 左侧为OneLab的方法创建界面,右侧为SPE工作流使用的移液枪、枪头、Dominos和Device物料清单。Andrew+移液机器人搭载Extraction+ SPE新模块的仪器配置如下图,包括:Andrew+ Robot主机;微孔板抓手(自动移动96孔板);Extraction+配套的真空泵(压力曲线受软件控制);废液瓶(上样和清洗产生的废液,经真空泵抽取,进入废液瓶);Extraction+配套的萃取套件(上部放置SPE小柱或萃取板,下部放置收集容器);放置SPE小柱或萃取板的位置(左侧升降Lifter可将承载SPE小柱的架子移到左侧,以便用微孔板抓手将收集容器放入下部)。实验结果使用 沃特世ACQUITY UPLC I-Class液相系统搭载快速柱进行色谱分离,再用 Xevo TQ-XS串联四极杆质谱仪对从血浆中萃取出的小分子药物进行检测。分析3个浓度的血浆样品(Low QC-10 ng/mL, Mid QC-50 ng/mL, High QC-150 ng/mL),回收率范围是95.8% - 108.4%,精密度结果是几乎所有RSD%值≤5%。这些结果满足FDA对小分子生物分析方法验证的推荐限值。表1. 回收率和重现性结果 — Andrew+执行血浆样品制备,Extraction+搭载Oasis HLB 1cc SPE小柱执行全自动SPE。实验方案二制备校准曲线,样品稀释,使用Oasis HLB 30mg 萃取板执行固相萃取 与实验方案一执行同样的反相固相萃取工作流,萃取耗材是Oasis HLB 30 mg plates。 实验结果使用沃特世ACQUITY UPLC I-Class超高效液相色谱系统搭载快速柱进行色谱分离,再用Xevo TQ-XS串联四极杆质谱仪对从血浆中萃取出的小分子药物进行检测。分析3个浓度的血浆样品(Low QC-20 ng/mL, Mid QC-50 ng/mL, High QC-400 ng/mL),回收率范围是88.6% - 110.8%,精密度结果是大多数RSD%值≤5%。这些结果满足FDA对小分子生物分析方法验证的推荐限值。表2. 准确度和精密度结果 — Andrew+执行血浆样品制备,Extraction+搭载Oasis HLB 30 mg plates执行全自动SPE。
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