- 2025-01-10 10:52:26单克隆细胞株
- “单克隆细胞株”是通过克隆技术从单一细胞衍生而来的细胞群体。它具有遗传一致性,即所有细胞均来自同一个祖先细胞,因此具有相同的遗传特征和生物学特性。单克隆细胞株在生物学研究、药物筛选、基因治疗等领域具有广泛应用。通过培养单克隆细胞株,可以获得大量具有特定功能的细胞,用于实验研究和治疗应用。这种细胞株的稳定性和一致性,使其成为生物医学研究和临床应用中的重要工具。
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单克隆细胞株文章
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- 通过构建CD244基因转染的稳定细胞株,并基于此制备特异性单克隆抗体。实验采用电穿孔仪(威尼德)完成基因转染,筛选获得高表达细胞株;通过免疫动物及杂交瘤技术获得抗体
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- 狗肾过表达MDR1稳定转染细胞株单克隆|MDR1 OverExpression monoclonal( MDCK)|CTCC/美森|T25
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单克隆细胞株问答
- 2023-05-20 12:59:12测定单克隆细菌群体中单细胞对抗生素的敏感性
- 鉴于抗菌素耐药性的出现,了解细胞群体对抗生素反应的异质性至关重要。因为药物可以施加选择压力,导致抗性表型的出现。迄今为止,无论是整体方法还是单细胞方法都无法将单细胞易感性的异质性与人群对抗生素的反应联系起来。在这里,我们提出了一个平台,通过使用锚定微流体滴和图像和数据分析管道,测量单个大肠杆菌细胞在不同环丙沙星浓度下形成小菌落的能力。微流控结果与抗生素敏感性的经典微生物学测量结果进行了基准测试,显示池微流控芯片与重复的批量测量结果之间的一致性。此外,单细胞形成菌落的实验可能性用于提供概率抗生素敏感性曲线。除了概率观点外,微流控格式还可以随着时间的推移对大量单个细胞的形态特征进行表征。该管道可用于比较不同菌株对具有不同作用机制的抗生素的反应。
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- 2023-05-25 15:24:22Vi-CELL BLU细胞计数仪在工程细胞株开发中的特点和优势
- 工程细胞株开发(Cell Line Development: CLD)的主要目的是通过高通量筛选手段获得数个高产稳定表达的细胞株,为后续的工艺开发及优化提供基础。能否构建适合于生产的高表达稳定细胞株,将直接影响后期重组蛋白或单克隆蛋白等药物的开发效率和生产成本。细胞培养是细胞株开发的基础,无论是细胞转染、高通量克隆筛选、培养基优化、还是抗体表达,都需要在细胞培养的基础上完成细胞生长状态的检测,其中包括活细胞密度(VCD)和活率(Viability)检测。通过检测结果将细胞密度和活率达不到要求的细胞排除掉。最 终,从数以千计的克隆细胞中筛选到稳定高产的单克隆细胞株。由于要筛选的克隆细胞量很大,对所培养的细胞生长状态的检测,通常需要使用高通量分析设备,有时甚至结合移液工作站来完成自动化检测。譬如,使用96孔板检测细胞密度和活率,同时根据需要可整合自动化移液工作站,从而大大提高筛选分析通量,并实现测试的标准化,减少人为操作误差,最 终使我们能在有限的平台基础上实现高产细胞株的筛选。贝克曼库尔特生命科学的Vi-CELL BLU全自动细胞计数和活率分析仪就是这样一款满足高通量上样、全自动检测,并可与自动化移液工作站整合的分析仪器。它具有以下一些优点满足细胞株开发过程中对克隆细胞的VCD和Viability准确和快速地检测。96孔板上样检测Vi-CELL BLU全自动细胞计数仪除了可以使用24位转盘做不间断检测外,同时可以采用96孔板进行高通量样品分析测试(如下图所示),使用配套的封板膜可以减少检测过程中样品的挥发,防止待测样品受到外部环境的污染,对于有生物安全的细胞样品,也可降低对操作人员的危害风险。Vi-CELL BLU 96孔板检测照片和移液工作站整合为了解决那些重复操作、通量高、易污染、需要大量人力操作的实验步骤,如梯度稀释、细胞培养、细胞换液、高通量筛选、克隆挑选等步骤,从而使得上游更通畅,并保证数据的完整性,可以使用贝克曼库尔特Biomek系列自动化移液工作站来完成这些工作。那细胞计数和活率分析操作是否也可以整合进来,让自动化工作站控制完成相关检测呢?答案是可以的。Vi-CELL BLU细胞计数仪可通过OPC UA Server和自动化移液工作站实现有效地整合,进一步实现细胞计数和活率分析检测的自动化目的,避免无谓的重复实验操作。Biomek自动化移液工作站整合Vi-CELL BLU细胞计数仪的彩页全自动和标准化分析使用96孔板的高通量细胞计数和活率分析时,可以在Cell Type检测参数表中设置染色前的吹打混悬次数(Aspiration cycles)和染色混合次数(Mixing cycles),以此让仪器自动对沉降的细胞吹打均匀。然后,在保证细胞样品均一性的前提下,吸取等体积台盼蓝吹打完成细胞的均匀染色。最 后,再通过Cell Type中的细胞识别参数,对拍摄得到的细胞进行有效地识别分析。检测结束后仪器自动对管路清洗,接着仪器自动对下一个样品进行标准化分析。Cell Type参数表单个样品的百图分析每个细胞样品按默认Cell Type方法检测可以得到100张细胞照片,相比于其他细胞计数仪的拍摄1张、3张或6张照片,同一样品拍摄100张照片得到的细胞数更多,因而该细胞计数方法的系统偏差更小,测试结果的代表性更好。CHO细胞第59张照片(共100张)同一焦平面下的细胞直径检测细胞培养过程中平均直径的监测通常会被忽略,同时这也是一个不太容易被细胞计数仪检测准确的参数,但这个直径参数有时影响会很大。在细胞转染病毒或质粒后,一般细胞平均直径会发生变化。有客户发现在Fed-Batch培养过程中细胞平均直径有时会过大,从而可能因为不耐受培养过程中的剪切力,最 终导致Peak-VCD相对其他细胞更低。Vi-CELL BLU全自动细胞计数仪通过使用聚焦质控品完成自动对焦(如下图所示),之后细胞样品检测都在同一焦平面下完成。然后通过检测L10粒径质控标样的平均粒径结果是否在标称值±10%范围内,以此判断自动对焦好坏。同时,可把L10粒径质控品作为质量控制标样,定期监测仪器对焦状态是否正常,以此保证所有的细胞样品都是在同一焦平面下检测,提高细胞平均直径检测的准确性。聚焦质控品和仪器自动对焦示意图同一个CHO细胞三次测试结果(考察细胞密度、活率和直径的重复性)若您希望更多地了解Vi-CELL BLU全自动细胞计数和活率分析仪,请拨打400-821-8935和我们联系。*本产品仅供工业和科研使用,不用于临床诊断
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- 2023-01-14 16:41:53如何提高细胞计数测试的准确性,及细胞计数仪在高产稳定CHO细胞株开发中的应用回顾
- 01如何提高细胞计数和活率分析的准确性?姚金龙贝克曼库尔特高级应用专员讲座简介:在各种细胞计数和活率分析方法中,台盼蓝染色细胞计数无疑是细胞活率分析的金标准。目前,通过台盼蓝染色分析细胞活率的方法包括:传统的光学显微镜+血球计数板法,也有市场上很普遍的插片式半自动细胞计数仪,以及无需手动混匀和染色的全自动细胞计数和活率分析仪。其中,后两个分析仪器的出现,不仅很大程度地解放了人力,同时相比于显微镜+血球计数板法会更省时,更合规,所以被各大制药企业所使用。而全自动细胞计数和活率分析仪更是在工艺开发和生产质控方面表现出特有的优势,即减少了人为的样品吹打混匀和台盼蓝染色操作误差,而且每种细胞标准化的测试条件,提高了仪器间数据的一致性而广受欢迎。但是大家在使用这些仪器一段时间后,可能会遇到这样一些问题,譬如:自动细胞计数仪的测试结果为何有时和血球计数板的结果对不上,我该相信哪一个?细胞计数仪测试标样没有问题,但一检测细胞怎么就不行了呢?为何同样都是CHO细胞,同事测试结果是符合预期的,我的为何就不行呢?以上问题其实归结一下都是我们测试结果的准确性的问题,如何减小测试方法的人为误差?如何提高我们使用的细胞计数和活率分析仪的测试结果的准确性?这些问题都将在此次讲座中和大家一起来探讨交流。02高产稳定CHO细胞株构建策略刘玉梅上海复宏汉霖生物医药有限公司高级研究员讲座简介:探讨影响稳定细胞株构建要素,包括载体,宿主细胞等。基于平台优化筛选方式,在stable pool基础上结合高通量技术进行稳定细胞株筛选,分享快速开发案例,实现快速、高效、稳定细胞株筛选。
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- 2018-12-02 18:20:27贴壁培养细胞株怎么才能将细胞从培养瓶上取干净
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- 2018-03-04 11:19:22tcr基因重排检测到单克隆重排
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