
- 2025-01-21 09:29:54蛋白质氧化
- 蛋白质氧化是指蛋白质分子中的氨基酸残基在氧化应激条件下被氧化修饰的过程。这种氧化可以是由自由基、活性氧等引起的,导致蛋白质结构、功能和代谢的改变。蛋白质氧化会破坏蛋白质的正常生理功能,影响其酶活性、结构稳定性和与其他分子的相互作用,从而对细胞、组织和生物体产生负面影响,与多种疾病的发生和发展密切相关。
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蛋白质氧化问答
- 2022-10-24 11:44:23面霜的氧化稳定性分析-油脂氧化分析仪
- 化妆品或个人护理产品的保质期是制造商确定产品最适合使用的时期,化妆品的保质期通常与它们的抗氧化性有关。面临的挑战是如何防止氧化,防止氧化产生的产品具有更长的保质期。化妆品质量的最重要的因素之一,吸收氧气导致的产品变化,导致老化、功能特性丧失,在某些情况下会变黄。因此,许多化妆品的质保期与氧化密切相关,氧化是由氧气、光、高温、微量金属,在某些情况下,还有酶促进的。OXITEST可以测定各种样品类型的氧化稳定性,测试整个样品,不需要预处理。油脂氧化分析仪检测原理根据最常见的应用,OXITEST加速氧化过程的原因是两个加速因素:温度和氧气压力。该仪器测量两个腔内的绝对压力变化,监测样品中反应组分的吸氧情况,并自动生成IP值。IP定义:IP代表诱导期,它是到达氧化起始点所需的时间,对应于可检测到的酸腐程度或氧化速率的突然变化。诱导期越长,抗氧化能力越强。检测仪器:OXITEST油脂氧化分析仪(意大利VELP)参考标准:国际标准方法AOCS Cd 12c-16检测样品:3种面霜含有不同含量的维生素E作为抗氧化剂,面霜的脂肪含量为10.5% Face cream formula A/Face cream formula B/Face cream formula C实验结果:每个样本都被监测了两次。在氧化测试结束时,每次运行的IP由OXISoftTM软件计算。这是得到的每一个配方的面霜氧化曲线。重复性试验使用OXISoftTM,可以为每个分析创建一个重复性测试,以获得结果的平均、标准偏差和相对标准偏差。对于重复性测试,需要在相同的温度和压力下,对相同数量的样品进行重复分析。下表总结了结果。配方比较使用OXISoftTM,还可以很容易地比较不同配方在相同条件下测试得到的IP值,并识别出最稳定的一个。结论:从OXISoftTM得到的结果和配方比较功能中,可以明显区分抗氧化面霜:面霜C的IP最短,其次是样品B和样品A。因此,作为抗氧化剂的维生素E含量较佳的面霜是配方A,氧化稳定性较高。
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- 2023-05-22 13:22:32奇亚籽粉的氧化稳定性分析-OXITEST油脂氧化分析仪
- 许多研究已经证明,饱和脂肪和反式脂肪酸的摄入量增加心血管疾病的发病率密切相关,而脂质丰富的ω3脂肪酸的消费减少的风险这一病理。奇亚籽(Chia seeds flour鼠尾草)种子是富有的自然来源α亚麻酸(C18:3)营养代表ω3的重要来源。奇异籽是一种起源于中美洲的粮食作物,在前哥伦布文明的饮食中占有重要地位,使用奇异籽作为一种新型食品配料已得到欧洲议会和欧洲理事会的批准。游离或酯化的不饱和脂肪酸对氧气的吸收是食品质量重要的改变之一。脂肪的自动氧化是一种由氧、光、高温、金属痕迹,有时还有酶促进的化学反应。OXITEST可以测定各种样品类型的氧化稳定性,不需要对脂肪进行初步分离。根据常见的应用,由于温度和氧气压力这两个加速因素,OXITEST加快了氧化过程。该仪器测量两个腔室内的压力变化,监测样品中反应组分的吸氧情况,并自动生成一个IP值。(IP表示诱导期,是到达氧化起始点所需的时间,对应于可检测的酸败程度或氧化速率的突然变化。诱导期越长,抗氧化能力越强。)样品:Chia seeds flour Fat labeled value: 30 %仪器:油脂氧化分析仪(意大利VELP)检测结果:奇亚籽面粉样品在80、90、100℃下进行了测试。在氧化测试结束时,通过软件OXISoftTM自动计算每次运行的IP值。估计保质期下图显示了IP和温度之间的关系。使用在不同温度下获得的IP结果,在结果之间的线性方程的情况下,有可能预测产品在储存温度(例如25℃)下的货架期,这很容易由专门的推断OXISoftTM程序“预估保质期"。结论:不同温度下ln(IP)结果的相关性为线性(R2)= 0, 999932)。通过OXISoftTM结果估算了奇亚籽面粉在25℃贮藏温度下的抗氧化能力。富氧可以在相当短的时间内估计奇亚籽面粉的保质期,得到同样的结果。测试是由直接在整个样本;不需要初步油脂分离;耐钛室;节省时间的分析,如果相比传统方法;专为研发开发,产品开发和质量控制实验室。通过软件OXISoft™可获得的许多信息:1、重复性试验:在同一样品或标准上进行的一系列试验,以验证其IP周期,计算数据的准确性和重复性2、新鲜度检验:检验不同批次产品的质量,例如同一种原料,并进行比较3、包装比较:用于测试哪种包装能使产品保持在Z鲜的状态4、配方比较:在相同条件下,确定成品Z稳定的配方5、老化期间的IP:得到产品在货架期间IP下降的曲线图6、预估货架期:对货架期的氧化稳定性进行预测
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- 2023-06-05 11:53:22油脂氧化分析仪的日常保养
- 油脂氧化分析仪OXITEST采用的技术和特殊的操作软件,操作员可同时监测和记录两个氧化室的氧化过程,计算诱导期。操作员可以打印包含操作条件和计算诱导期结果的报告,诱导期可以通过两种不同的方法计算。 维护工作是延长仪器的使用寿命和保持Z佳工作状态的基本要求,因此按照要先的描述进行维护保养工作是很重要的。日常保养包括下面的操作:1. 在每个测试开始前;2. 确认 O 型密封圈具有良好的密封性;3. 检查过滤器上面未沾染脂肪以防对下一个实验产生影响;4. 检查氧化室已经清洗干净;5. 检查样品盘、样品盘盖等已经清洗干净,为沾染不同样品;6. 进行空白和泄露测试:用空的干净的氧化室进行空白测试,选定行设置测试类型为“Blank";7. 更换 O 型密封圈(50 次分析后);8. 清洗 filters(20 次分析后)。
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- 2025-04-14 18:30:13反相液相色谱蛋白质原理是什么?
- 反相液相色谱(Reverse Phase Liquid Chromatography, RPLC)是一种基于疏水相互作用的高效分离技术,广泛应用于蛋白质及多肽的分离、纯化与分析。其核心原理在于固定相与流动相的极性差异,以及样品分子与固定相之间的疏水分配效应。以下将从分离机制、蛋白质特异性行为、固定相与流动相选择、应用场景等角度展开说明。 反相色谱的固定相通常由疏水性材料(如C18、C8或C4键合硅胶)构成,而流动相为极性溶剂(如水、甲醇或乙腈)。分离过程中,蛋白质的疏水区域与固定相发生非共价结合,极性较强的分子优先被流动相洗脱,疏水性更强的分子则因保留时间延长而实现分离。梯度洗脱是优化分离效果的关键手段,通过逐步增加有机溶剂比例削弱疏水作用,从而按疏水性差异依次洗脱目标分子。 蛋白质在反相色谱中的行为具有特殊性。由于流动相中常添加三氟乙酸(TFA)等离子对试剂,蛋白质可能发生部分去折叠,暴露出内部疏水残基,增强与固定相的相互作用。此外,低浓度TFA可诱导蛋白质形成伸展构象,导致其在死时间前洗脱;而高浓度TFA通过形成离子对使蛋白质构象紧凑(如“熔融球体”),延长保留时间。这种构象敏感性使反相色谱不仅能分离蛋白质,还可用于研究其构象稳定性与表面疏水性。 固定相的选择需综合考虑蛋白质大小与疏水性。C18和C8适用于小分子肽段,而C4因较短的烷基链更适合大分子蛋白质,避免过度保留。流动相中,乙腈因低黏度和高洗脱能力成为首选有机溶剂,TFA则通过抑制硅醇基电离减少峰拖尾。梯度优化需平衡分辨率与时间成本,例如降低最大有机溶剂浓度可改善峰分离,但可能延长分析周期。 在应用层面,反相色谱凭借高分辨率与质谱兼容性,成为蛋白质组学研究的重要工具。其典型场景包括:多肽药物的纯度分析、酶解产物的肽图绘制、翻译后修饰(如磷酸化、糖基化)的检测,以及蛋白质构象变化的动态监测。例如,与质谱联用时,反相色谱可分离复杂肽段混合物,通过质谱鉴定实现蛋白质序列的高通量解析。此外,其在治疗性抗体表征中的应用也日益增多,尤其在检测聚集体与降解产物方面表现卓越。 操作参数的设置直接影响分离效能。流速需根据色谱柱内径与填料粒径调整,通常内径4.6mm的C18柱推荐流速为1mL/min。压力上限需控制在柱耐受范围内(通常≤6000psi),以避免固定相塌陷。检测方法方面,紫外检测(280nm)依赖蛋白质中芳香族氨基酸的吸收,而质谱联用可提供分子量及结构信息,灵敏度更高。 总之,反相液相色谱通过疏水相互作用与动态梯度洗脱,实现了蛋白质的高效分离与分析。其独特的构象敏感性、灵活的固定相选择及与质谱的兼容性,使其在生物医药与基础研究中不可或缺。未来,随着新型固定相(如表面多孔颗粒)与微流控技术的发展,反相色谱在蛋白质分析中的分辨率与通量将进一步提升。
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- 2025-01-15 12:15:14蛋白质纯化系统连接方法有哪些?
- 蛋白质纯化是生物科学研究和药物开发中的关键步骤,而蛋白质纯化系统的连接方法对于保证纯化过程的效率与稳定性至关重要。本文将详细探讨蛋白质纯化系统的连接方法,包括不同设备的选择、连接方式以及优化方案,帮助研究人员在实验过程中提高工作效率,确保实验结果的可靠性和 reproducibility。通过深入了解每种连接方法的特点与适用场景,您将能够根据具体的实验需求,选择合适的方案,大限度地提高蛋白质纯化的质量和产量。 1. 蛋白质纯化系统的构成与连接需求 蛋白质纯化过程通常需要多个系统和设备的配合,包括但不限于色谱柱、流动相系统、样品注射系统和检测仪器。为了确保每一环节的高效运行,各个系统的连接方式必须得到精确设计。合理的连接方法不仅能提高系统的稳定性,还能降低操作中的误差,提高纯化效率。 通常,蛋白质纯化系统的连接方法涉及流体通路的设计,包括管道、泵、阀门和分配器的连接。每个系统之间的连接方式应确保流体流动的顺畅性和稳定性,并能够应对不同压力和流量要求。需要特别注意的是,连接点的密封性、管道的内径与材质、以及操作过程中的温度控制,这些都会直接影响纯化过程的质量。 2. 常见的蛋白质纯化系统连接方式 (1) 软管与接头连接 软管与接头的连接是常见的一种连接方式,尤其适用于低压力系统。软管的柔性设计使得它能够在有限的空间内灵活布置,并能适应不同规格的连接接头。对于流动相较为复杂或者需要快速更换系统的实验,这种连接方式具有很大的便利性。 使用软管时,接头的密封性和材质的选择至关重要。通常,建议选用不含金属杂质的高质量材料,避免在蛋白质纯化过程中引入不必要的污染物。根据实际需求,可以选择硅胶、聚氨酯或氟塑料等不同材质的软管。 (2) 硬管与快速连接系统 对于高压、需要精确控制流量的实验,硬管与快速连接系统的组合则显得更加重要。这种连接方式通常应用于需要较高流量和压力控制的色谱系统。硬管材质通常为不锈钢或高耐压塑料,能够在高压条件下保持稳定性。 快速连接系统则通过快捷的卡扣设计,可以快速拆卸、组装,减少设备更换时间。在自动化实验和大规模蛋白质纯化系统中,这种连接方式的高效性尤为突出。 (3) 联锁阀门与自动化系统的结合 自动化蛋白质纯化系统中,联锁阀门和智能控制系统的结合使用可以实现更的实验操作。这些系统通过电子传感器监控流体的状态,并根据反馈自动调节流量、压力等参数。阀门之间的联锁设计则避免了人为操作错误,确保了实验过程的稳定性。 3. 连接方法的优化建议 在选择合适的连接方式时,研究人员应根据实验的具体要求,综合考虑以下几个因素: 流量与压力要求:系统是否需要大流量和高压处理,这将直接影响管道和连接件的选择。 清洁与消毒要求:高纯度蛋白质的提纯过程要求系统设备必须能够高效清洗,连接点应易于拆卸清洗,防止交叉污染。 操作与维护的便利性:在多次使用的实验环境中,连接系统的拆卸与维护便利性至关重要,过于复杂的连接会增加操作难度。 自动化程度与智能控制:根据实验规模,选用适合的自动化系统,能够提高实验效率,减少人为操作带来的误差。 4. 结语 蛋白质纯化系统的连接方法是影响纯化效果和实验效率的关键因素。合理的连接方案不仅能优化流体通路,提升纯化效果,还能确保系统的长期稳定运行。通过合理选择软管与接头、硬管与快速连接系统,或是联锁阀门与自动化系统的组合,能够使整个实验过程更加高效与精确。专业的连接方案在蛋白质纯化的各个环节中发挥着至关重要的作用,保障研究工作的成功开展。
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