- 2025-05-31 17:45:59组织处理机
- 组织处理机是生物学或医学领域常用的设备,用于对组织样本进行前处理。它采用自动化程序,能够自动完成组织样本的脱水、浸蜡、包埋等步骤,从而提高实验效率和准确性。组织处理机广泛应用于病理学、组织学等领域,能够处理多种类型的组织样本。相比传统的手工处理方法,组织处理机能够提供更一致、可重复的处理效果,减少人为误差,提高实验质量。
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- 制备烟草叶样品用于扫描电镜观察
- 本文主要介绍临界点干燥和冷冻制备方法的实验流程和实验结果对比。
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组织处理机问答
- 2023-03-24 14:29:50南京试剂组织女工扬州游园赏春活动
- 邗沟春水碧如油,到处春风足逗留。烟花三月,正是下扬州好时节。时值“3.8妇女节”来临之际,南京试剂组织女工80余人前往扬州瘦西湖、东关街等地游园赏春活动。 4日上午9时许,女工们揣着驿动的心乘车抵达扬州,第一站便是瘦西湖。清代钱塘诗人汪沆有诗云:“垂杨不断接残芜,雁齿虹桥俨画图。也是销金一锅子,故应唤作瘦西湖。”瘦西湖由此得名。瘦西湖清瘦狭长,长十余里,犹如一幅山水画卷。女工们跟随导游的步伐,沿湖行走,路过冶春、绿杨村、红园、西园曲水等景点,途经大虹桥、长堤春柳,再到徐园、小金山、钓鱼台、莲性寺、白塔、凫庄、五亭桥,然后向北至蜀岗平山堂、观音山。 瘦西湖公园内柳树吐绿,梅花、桃花竞相开放,呈现出桃红柳绿的春日美景,让我们体验了一场与春风作伴、赴赏花之约的视觉盛宴。旖旎多姿的园林风光,独特别致的风景建筑接踵而至,令人目不暇接,女工们既见了早春佳景,又赏园林风光,正所谓“ 两岸花柳全依水,一路楼台直到山”。 中午时分,在品尝了扬州特色美食后,踏青队伍再次出发前往扬州最具有代表性的一条历史老街——东关街。东关街位于扬州市中心,全长1100余米,由一块块石板铺成主街,走在路上,不时能看到青砖灰瓦的盐商大院。街上琳琅满目的小商铺将当地特色美食与特产小玩意集中于此,实在是让人目不暇接。街上游人熙熙攘攘、摩肩接踵,让人感受到鲜活的人气和江南烟火喧然之感。 春景赏不尽,转眼是归程。快乐的时光总是短暂,不经意间一天的行程接近尾声。大家胸中藏着瘦西湖的亭台楼阁湖光山景,身上带着扬州古街的浓浓的烟火人情,怀着愉悦的心情踏上了新的工作生活之旅。
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- 2023-02-13 10:39:43组织透明化与点击化学相结合的新技术CATCH
- 在完整组织中观察药物靶点相互作用的工具一直是理解体内药物作用的主要障碍。2022年发表在Cell上的题为“Insitu identification of cellular drug targets in mammalian tissue”的文章有突破性进展,作者通过修改和整合点击化学(CC)与组织透明化技术,开发了一种方法——透明辅助组织点击化学(Clearing-Assisted Tissue Click Chemistry,简称CATCH),允许小分子药物-靶点相互作用在亚细胞分辨率下进行标记和成像(图1A)。该技术为组织中小分子的体内相互作用可视化提供了一个有价值的平台,并能够识别药物在哺乳动物组织中的分布和参与。图1 CATCH技术的方法开发1.组织透明化极大地改善了哺乳动物组织中的化学标记作者对小鼠给药脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)缓聚剂PF7845-yne(末端含炔基),通过CuAAC点击化学反应,炔基与荧光标签的叠氮化物反应形成叠氮炔环,进而引入荧光基团。初始试图直接成像药物结合的FAAH,但由于信噪比较差,未能显示细胞靶标。因而猜测脑组织构成复杂,其致密的脂膜可能影响点击化学反应,作者测试了基于聚丙烯酰胺的水凝胶组织透明化方法CLARITY,结果发现去除脂质后显著提升了成像的信噪比(图1C、D)。作者同时也验证了其他的透明化方法也得到了类似的效果(图1E)。此外,作者还比较了不同的点击化学配体(TBTA,BTTAA,BTTP)及不同的铜离子浓度下的反应效率,发现使用BTTP,150 μM硫酸铜条件下可获得高信噪比且稳定的成像(图1B)。2.CATCH实现了药物-靶点接触的全脑、亚细胞原位成像为了验证CATCH应用的广泛性,作者对三种小分子药物FAAH缓聚剂PF7845-yne、BIA10-2474-yne和单胺氧化酶(MAO)缓聚剂Pargyline-yne进行CATCH成像,结果清晰展示了药物-靶点在小鼠不同脑区的分布(图2A-E)。另外,还可以展示这些分子主要靶向的细胞类型,FAAH缓聚剂主要靶向新皮质和海马中的神经元样结构;而Pargyline-yne主要结合全脑的血管样结构,少量下丘脑和脑桥内稀疏但特异标记的神经元样结构(图2F)。图2 全脑药物结合的可视化2.CATCH可与荧光标记复合以识别靶细胞类型作者在给药处理后进行NeuN免疫染色,发现PF7845-yne和BIA10-2474-yne主要与新皮质、海马和杏仁核中的NeuN+神经元共定位。而在脑桥中发现了一小群神经元样结构,它们是NeuN阴性但被 pargyline-yne 靶向的(图3A-D)。随后作者洗脱NeuN并重新孵育TH抗体验证该推测,确定了NeuN-,Pargyline-yne阳性的细胞的确是LC-NA神经元(图3E)。由此证明,CATCH可以和荧光标记结合揭示了药物结合的细胞类型,并且可以区分神经元不同部分的药物靶标参与位点,可以支持多轮的药物靶向细胞类型鉴定。图3 药物靶点的细胞型鉴定锘海团队自主研发的组织透明化试剂盒可以高效地进行脱色脱脂,采用亲水性温和环境的设计,在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出比较优异的性能,适用范围广、操作简便、速度快、效率高。
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- 2022-10-18 17:17:45手持式组织研磨器的使用步骤及注意事项
- 手持式组织研磨器按照其功能特性大致可分为:组织研磨器、组织捣碎匀浆机,可调高速分散器(匀浆机),固体样品粉碎机。其中手持式组织研磨器是生物、遗传、病毒、医学、环保、水产、实验室、分析室、教育科研的研磨工具,但不适宜用于粘度高的液体和质料硬的物体(骨、石等)。今天上海净信来为大家介绍手持式组织研磨器的使用说明,具体包括使用步骤、使用注意事项和使用范围等。 一、手持式组织研磨器使用步骤 1、正确安装捣碎浆棒,放置捣碎浆杯。 2、将样品放入捣碎匀浆杯。 3、检查电源电压是否符合设备需求电压 4、接通电源,指示灯亮。 5、设定定时,可将定时旋钮调至“定时”或“常开”位置。 6、设定转速,缓慢调节调速旋钮,升至所需转速。 7、工作完毕,将调速旋钮置于较为小位置,定时器置“零”。 8、关闭开关和电源。 9、擦洗清洁匀浆杯和匀浆棒,然后进行烘干,其上不允许有水滴物、积垢和其它异物残留。 二、手持式组织研磨器使用注意事项 1、设备必须具有接地安全装置。 2、设备使用的电源插座必须是符合要求的三线插座。 3、开机之前,必须注意电源与电机上电压是否相符。 4、设备工作时应将放置平整紧固的台面上,以防止振移是用手按住杯盖。 5、先将刀轴和机轴配合好,后将联接器弹簧性元件向下移至尺槽内,机器才好运转。 6、不宜空转,使用时须加入少量液体或油脂。 7、放入物料时须缓缓加入,先由慢速逐步调至高速 8、更换溶液时,应切断电源后重复上述操作 9、连轴节上下滑动较困难时,应注入一至二滴机油,使之润滑。 10、匀浆机禁止捣碎骨类,矿砂等较坚硬的物质。 三、手持式组织研磨器具体使用范围 1、科学研究:生化、植物、营养等研究的捣碎、均质用。 2、医学治疗:实验室于药品捣碎,特别适合于组织治疗法药品捣碎。 3、化工制药:制造胶质乳浊体、液体物质之搅拌混合,如制造油质有霉素剂的调和,制造容缩牛肝捣碎均质等。 4、生物制造品:适用于生物制造品过程中,其液体药品的搅拌混合及微生物培养基的捣碎均 5、食品行业:可供制造肉酱、奶酪等使用。
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- 2022-12-23 13:35:42多样品组织研磨仪对肺组织研磨操作实验方法|上海净信
- 此次**中医药大学需要研磨的实验样品是肺组织,根据贵校要求的研磨效果,我司建议使用高通量组织研磨仪对肺组织进行研磨操作,详细如下:**中医药大学基础医学院,是全校*大的教学单位,学院现有中医基础理论、中医诊断学、中医临床基础、医史文献、医古文、解剖学、组织学与胚胎学、生理学、药理学、生物化学与分子生物学、病原微生物与免疫学、法医学、医学实验技术、预防医学、食品卫生与营养学共15个教研室,有中医学、机能学、形态学3个实验室,有司法鉴定中心1所。有贵州省中医药方证药理研究特色重点实验室、中药民族药微生物发酵与生物转化工程中心、法医中药毒理学特色重点实验室、中医证候实质研究重点实验室等4个省厅级重点实验室。生物化学与分子生物学教研室是以中西医结合基础学科为学术内涵而建立的,教研室积极开展中医药干预高脂血症和动脉粥样硬化、肺纤维化、类风湿、糖尿病及衰老等分子机理的科学研究。主持和参与成立功能性食品研究中心、分子诊断研究中心等,开展产学研创新研发工作,为后续相关科研工作奠定更多研究基础。实验方法:1、准备研磨设备高通量组织研磨仪一台,肺组织样本适量2、将解冻的肺组织样品,剪成黄豆粒大小的碎块3、放入样品和钢珠,加入适量裂解液后装入研磨罐中4、根据样品特性及实验要求设置研磨参数及时间5、启动设备至研磨结束后即得到研磨后的样本实验效果:研磨前后效果图对比客户之前研钵的研磨方式,此次使用高通量组织研磨仪对肺组织的研磨实验效果让客户更满意,研磨仪在同一时间内可高效处理多个组织样品,大大节约了时间,提高客户对样本的前处理效率。
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- 2022-11-25 11:20:303D组织成像:快速预览到高分辨率成像的一键切换
- 全场景显微成像分析平台MICA集3D采集和AI定量于一体。3D组织成像广泛应用于生命科学领域。研究人员利用它来揭示组织组成和完整性的详细信息,或从实验操作中得出结论,或比较健康与不健康的样本。本文介绍了MICA如何帮助研究人员进行3D组织成像。3D组织成像模式生物或患者的组织切片可用于分析从组织到细胞的各种形态,进而发现健康和非健康样本以及对照样品和实验样品之间的差异。例如,是否存在特定细胞或它们的形态(即形状、体积、长度、面积)都是有意义的参数。荧光显微镜有助于识别特定标记的细胞或细胞组分。因此,要么用转荧光标记基因生物,要么用免疫荧光染色。此外,某些基因和转录也可以通过荧光原位杂交 (Fluorescence in Situ Hybridization, FISH) 进行可视化。3D组织成像的一个示例是,对脑部神经元进行成像,以确定它们的长度、体积或与其它细胞的连接。例如,可以对患有局部脑缺血的模式生物制作脑部切片,以了解形态差异和细胞数量。挑 战首要的挑战之一是使用显微镜初步观察样本。需要将样本置于载物台上并不断调整三维位置以确保对样本进行正确成像。你从目镜或屏幕上看到的只是样本极小的一部分。因此,要将样本保持在正确的焦距内并找到正确位置,以便找到感兴趣的区域,是一个非常麻烦的过程。MICA的样本查找功能通过将样本聚焦并生成每个相关区域的低倍率预览图来自动化这个过程,这个功能可以用于整个成像过程的定位。下一个挑战是设置成像参数,因此可以在看到感兴趣的信号下,避免样本遭受不必要的光漂白。这一步骤通常要同时选择激发和接受检测的技术参数,因为每一项参数都会对样本和获得的结果产生不同的影响。使用MICA,您只需轻轻点击一下“Live”,便可自动完成可视化荧光所需的所有参数设置。可随时通过点击“OneTouch”执行这一自动化设置来优化当前视图的参数。更改显微镜的特定技术参数前,实验人员通常需要了解更改参数将产生的影响,但在MICA中,设置是输出驱动型的,也就是说,可定义所需的输出,然后自动完成对应的调整。一般而言,第 一步是确定要成像的正确位置。实验人员需要使用目镜了解样本的整体概况,并记住不同的位置。数字显微镜可以生成样本的概览,这可以提供一些帮助,但实验人员仍然需要指出图像中要进一步成像的位置。MICA的Navigator工具可简化这一过程。用户可以生成低倍或高倍的预览,轻松定位感兴趣的区域,并可以使用工具直接在图像上标记出感兴趣的样本区域。这样后续高分辨率图片就可以保存下来。高放大倍数物镜通常需要使用浸没式介质,最 常见的是水和油。水为水溶液中的成像样品匹配了最 佳的光学指数,而油为包埋的成像样品匹配了最 佳的光学指数。水浸物镜也可用于固定式样本,但会稍微影响成像质量。MICA可同时满足两种需求。水镜还具有全自动化操作的额外优势,水的浸入可以自动建立并维持。为进一步提高光学质量,一些物镜会通过校正环来补偿样本板的厚度。校正环可手动、也可自动操作。MICA配置了自动校正环功能,可实现自动优化。相对厚度是组织切片成像的另一大挑战。厚切片会形成较多的散射光,干扰所需信号。THUNDER可减少背景模糊,为组织成像提供了一种宝贵的计算成像方法。 MICA集THUNDER于一体,可在合理的时间范围内确定感兴趣的区域。除了类似于THUNDER的计算清除方法,共聚焦激光扫描显微术(CLSM)等光学部分也是3D组织玻片成像的一种方法。这种方法中,可获得性和可用性方面也是挑战。除了技术设置比较复杂,共聚焦显微镜所需的培训时间一般也更长。MICA集共聚焦和宽场成像于一体,最 大程度减少了成像参数设置,缩短了所需的培训时间,同时也降低了操作显微镜的技能要求。另外,共聚焦和宽场成像模式的图像设置有相同的外观和使用感受,因此,用户无需学习两种系统的操作方法。而且,用户可随意在宽场和共聚焦两种模式间切换而无需在两种成像系统间转移样本。科学实验的一个关键方面是,改变尽可能少的变量,以确定对样本和结果的任何影响。除了保证样本处理相同外,另一个方面是针对激发和接收检测成像参数相同。MICA默认在不同项目中保持成像参数不变,用户仅基于自己的需求进行调整。可根据参考图像轻松恢复成像参数。方法三个厚度为250µm的小鼠脑部切片包含下述荧光标记物:细胞核(DAPI,品红色)神经元(细胞质GFP,青色)星形胶质细胞(GFAP-DsRed,红色)将切片固定于载玻片支架中(图1)并置于载物台上进行成像。图1:用于玻片成像的MICA玻片夹,例如组织切片。在样本定义中输入盖玻片类型和染料等基本信息。利用这一信息,Sample Finder可以识别盖玻片并自动生成低倍的预览。对整个盖玻片的预览可以用来识别三个组织切片,然后用Navigator工具进行标记。随后无需手动调整成像参数,便可以在20倍宽场模式下对标记区域生成扫描拼接图像。在这个放大倍数和分辨率下,就能在组织切片上识别出感兴趣的区域,然后用共聚焦显微镜成像。此时,MICA会在相关区域切换为共聚焦模式,记录高清晰图像,包括三维立体图像。定义三维立体图像时,可以手动或单击鼠标自动设置限制。z Range Finder工具自动确定3D图像扫描开始和结束部分。成像后,可借助MICA Learn & Results工具测量树突棘。为此,使用pixel classifier在叠层投影下识别棘突。pixel classifier简单易用且功能强大,用户只需使用类似于绘画工具的绘图工具标记对象的示例,在这种情况下为棘突。通过训练模型,更好地再现输入,然后提供图像中其他对象的预览。经过训练后,就可使用模型分析图像。 结果找到载玻片预览上单个脑部切片,然后使用Magic Wand工具进行标记以进行扫描拼接。Magic Wand自动识别组织切片的边界并相应地定义所需的拼接。图2:MICA在实验开始时进行完整的玻片预览(宽场),便于更轻松地定位。借助该信息的信息,可找到大图扫描拼接的感兴趣区域。可使用Magic Wand工具自动化检测感兴趣区域。MICA可同时采集最 多四个荧光团,因此相比基于滤光块的序列成像的显微系统,可有效节约用户的时间。在单次扫描拼接中,可找到感兴趣区域,并在共聚焦模式下以更高的放大倍数观察更多的细节。二维图像需要借助三维数据以获得更详细的信息。为此,z界面中定义了三维立体模式。在CLSM下进行立体采集后(120µm厚),可在三维观察器中可视化数据,获得脑部样本的更多空间信息。图3:三维重构CLSM。通过三维采集进一步研究组织切片。利用获得的三维信息,用户可以更好地了解样本的空间状况,例如了解细胞间的连接。对于定量来说,可根据三维采集信息生成最 大投影来测量样本树突棘的平均面积。pixel classifier识别棘突,分析工具则确定面积。得到的数值可绘制成图,以可视化数据和相关性。图4显示了树突棘面积的直方图。这些结果也可通过箱线图的形式显示,来比较不同的树突棘群落(图4)。图4:分析。MICA不仅采集图像,还可对它们进行分析。为此,可使用基于人工智能技术的pixel classifier来识别相关的图像细节。随后,识别出的对象可以被量化并显示在图形中。在本示例中,树突棘的平均面积在最 大投影上测量。结论MICA是用于三维组织成像的有效工具:使用pixel classifier功能,用户可以快速了解样本的整体质量,确定进一步的操作。随后,Navigator视图可对组织切片进行更深入的观察。Magic Wand等工具用于快速定义感兴趣的区域,加上4个通道的同时成像,可加快大图扫描拼接的速度。使用新的z界面使三维采集更加简化,pixel classifier能辅助后续分析。简而言之,MICA集宽场成像和共聚焦成像于一个系统中。它可以帮助用户在一个系统中完成从图像预览到三维细节成像再到分析的整个工作流程。参考资料:Efficient Long-term Time-lapse Microscopy, Science Lab (2022) Leica Microsystems.
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