羊抗体开发 - 产品信息 - 相关知识

2025-01-10 10:53:54羊抗体开发: “羊抗体开发”是指利用羊作为生物反应器，通过免疫、采集血液、分离血清或纯化等技术手段，制备具有特定抗原结合能力的羊源性抗体。这些抗体在生物医学研究、疾病诊断、治疗及药物开发等领域有广泛应用。羊抗体因其高特异性、高亲和力及易于制备等优点而受到重视。开发过程中需关注免疫策略、抗体纯化效率及质量控制等因素，以确保抗体的性能满足应用需求。

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羊多克隆抗体的优势与挑战：羊抗体开发在生物医学研究中的应用

羊多克隆抗体（也称为羊多抗）在生物医学研究中扮演着重要角色，尤其在诊断、疫苗开发、抗体药物发现以及免疫等领域中具有独特的应用价值。

卡梅德生物科技（天津）有限公司 84
2024-12-23
羊抗体开发羊多克隆抗体羊多抗制备

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2023-12-25 17:14:18重组抗体的类型有哪些？: 重组抗体，也被称为重组免疫球蛋白，是通过基因工程技术将抗体的基因在合适的宿主细胞中表达并生产出来的一类抗体。与传统的多克隆抗体和单克隆抗体相比，重组抗体具有更高的特异性和亲和力，并且可以针对特定的抗原表位进行设计和优化。重组抗体的类型包括嵌合抗体、双特异性抗体、抗体片段和Fc融合蛋白等。下面一起来看一下他们各种的应用：https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview①嵌合抗体1975年，杂交瘤技术的发现彻底改变了抗体研究和临床开发。然而，鼠源性抗体的疗-效受到人抗鼠抗体（HAMA）效应的限制，鼠源性单抗对人体具有异种蛋白的免疫原性 ,在人体内半衰期较短。1984年，研究人员通过基因工程构建了第一个嵌合抗体，也是公认的第一种重组抗体，以降低鼠源抗体在人体内的免疫原性。其中，约30%-35%的分子来源于小鼠的抗体序列，约65%-70%来源于人的抗体序列。所得嵌合抗体保留了亲代小鼠抗体的抗原结合能力。抗体嵌合是开发治-疗性人源化抗体的第一步。义翘神州采用CDR移植技术和计算机辅助分子建模，提供高质量的单克隆抗体人源化服务，成功率高，人源化程度>90%。②抗体片段每一个完整的免疫球蛋白（IgG）分子包含通过二硫键连接的两条重链和两条轻链。抗体片段（如Fab、scFv和VHH）体积小，比其全长抗体具有更好的组织或肿瘤穿透力。因此，它们在免疫治-疗方面具有巨大的前景，尤其是在实体瘤方面。此外，它们的半衰期也较短，可用作放射性显像剂。然而，由于缺乏Fc区，它们不能引起Fc介导的抗体效应功能，如抗体依赖性细胞毒性（ADCC）和补体依赖性细胞毒性（CDC）。起初采用酶解法对IgG抗体进行片段化。胃蛋白酶作用于铰链区二硫键所连接的两条重链的近C端，水解产生被称为F(ab’)2的二价Fab片段。然后，通过木瓜蛋白酶将该片段裂解为两个相同的Fab片段。然而，酶解法限制了可制备的抗体片段类型，而且不适合工业化大规模生产和纯化。随着抗体工程技术的进步，这些问题可以通过重组生产抗体片段来解决。抗体基因克隆测序成功后，可通过瞬时转染在原核表达系统（如大肠杆菌）和哺乳动物系统（HEK293细胞）中表达抗体片段。凭借丰富的重组生产经验，义翘神州建立了高通量VHH表达平台，交付了多个VHH抗体生产项目，总体成功率超过90%。除了常见的VHH形式，我们还可以表达双特异和多特异VHH。此外，义翘神州还可以表达其他各种高特异性和亲和力的抗体片段，如scFv和Fab。③双特异性抗体与常规单克隆抗体不同，双特异性抗体（bsAb）具有两个结合位点，可识别同一抗原上两个不同抗原或表位。由于这一特性，双特异性抗体备受研究者和制药业的关注。截止目前，美国食品药品监督管理局（FDA）已批准了4种双抗药物，而且160多种双抗正在进行临床试验，用于治-疗癌症、糖尿病、阿尔茨海默病和其他疾病。起初，双特异性抗体通过四源杂交瘤技术制备，但这对下游抗体生产和纯化构成了巨大的挑战。随着过去20年重组DNA技术的发展，出现了几种双特异性抗体形式，以适应所需的靶标-产品特征。为了解决重链错配问题，Genentech首先提出了“knob-into-hole”（KiH）技术，该技术通过对CH3结构域进行改造，在每条重链中创建一个“knob”或一个“hole”，以诱导异源二聚化。同样地，研究人员也采用了common light chain 和CrossMab等其他技术来解决轻链错配问题。表达双特异性抗体主要在哺乳动物细胞中进行。由于单克隆抗体和双特异性抗体之间的各种结构相似性，许多已建立的常规单抗纯化工艺也可适用于双特异性抗体。（参见另一篇文章：“双特异性抗体：抗体治-疗中的新星”）④Fc融合蛋白Fc融合蛋白（又称Fc嵌合融合蛋白、Fc-Ig和Fc标签蛋白）是一种同源二聚体，由免疫球蛋白的Fc段与具有生物学活性的蛋白分子组成。虽然单克隆抗体是治-疗性生物制剂开发的重-点，但Fc融合蛋白也是一类成功的生物制药产品，至少有13种药物获得了欧洲药品管理局（EMA）和美国FDA的批准。除治-疗应用外，Fc融合蛋白还是基础研究中的检测试剂，包括流式细胞术、免疫组织化学和蛋白结合试验。事实上，与Fc区的连接可以提高一些结合蛋白的溶解度和稳定性。鉴于其大小和对糖基化的需求（大多数是糖蛋白），Fc融合蛋白主要在哺乳动物表达系统中产生。目前，抗体工程技术取得了一定的进步，这极大地促进了各种形式重组抗体的开发，用于疾病治-疗。FDA已批准了100多种抗体药物，目前有多种抗体处于临床后期开发阶段。此外，重组抗体还可用于许多研究应用：蛋白免疫印迹（WB）、免疫组织化学（IHC）、免疫荧光（IF）、流式细胞术（FC）和表面等离子体共振（SPR）。总之，重组抗体是基因工程技术的重要应用之一，其类型多样，具有广泛的应用前景。随着基因工程技术的发展，重组抗体的生产成本和安全性问题也将得到进一步优化，为临床治-疗和科学研究提供更多有效的工具。同时，我们也应该认识到重组抗体的潜在风险和挑战，加强对其安全性和有效性的评估和监管，以确保其能够更好地服务于人类的健康事业。更多重组抗体详情关注：https://cn.sinobiological.com/news/recombinant-antibodies-formats

2024-01-16 16:35:20免疫组化抗体（IHC）的实践应用与常见问题详解: 免疫组化法（IHC）是使用抗体检测组织切片（例如肝脏、胰-腺或心脏）中细胞蛋白质（抗原）的过程。当组织样本被送到实验室进行疾病检查时，有几个细节不易确定。几种疾病或疾病亚型在显微镜下可能看起来相似或看起来具有相似大小的细胞，但具有不同的行为和必要的治-疗，区分它们的最佳方法是检测这些细胞上作为标记的特定分子。免疫组化法（IHC）是一种使用抗体（匹配分子）的技术，用于寻找、识别附着在细胞上的标记物。在显微镜下可以看到抗体本身，这有助于技术人员进行精确识别。免疫组化法（IHC）已广泛应用于医学中，特别是癌症诊断。淋巴瘤是依赖于IHC进行正确诊断和治-疗决策的癌症之一。免疫组化常见问题：问题一：我应该使用PIER还是HIER进行抗原修复？固定过程可能会掩盖抗原，导致抗体结合无法进行。这种掩盖可以通过一种称为抗原修复/抗原去掩蔽的技术来逆转，该技术可以通过加热（HIER；热诱导抗原修复）或蛋白酶（PIER；蛋白水解诱导抗原修复）介导。后者使用蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶等酶。PIER方法通过降解掩盖表位的肽而起作用。然而，PIER也可能导致样品形态或抗原本身的改变。因此，PIER的使用频率低于HIER，后者通过恢复表位的二级和三级结构而起作用。为了确定是否应该进行抗原修复以及采用哪种方法，应遵循以下指南：进行文献检索，以确定其他研究人员如何可视化您感兴趣的抗原。检查抗体供应商是否推荐了特定的抗原修复-方案。如果没有特定的协议可用，我们建议使用HIER而不是PIER协议。对于HIER，总是使用中性抗原修复缓冲液，并与未进行抗原修复的样品进行比较。如果中性染色溶液没有产生良好的染色效果，则应测试碱性或酸性抗原修复缓冲液。除了pH值外，其他需要优化的参数是温度和持续时间。理想情况下，尝试各种pH值、温度和时间组合。为了排除由HIER过程引起的伪影，始终包括一个控制样品，该样品在没有HIER步骤的情况下进行染色。问题二：如何选择IHC实验的抗体，单克隆抗体还是多克隆抗体？单克隆抗体和多克隆抗体的抗体特性决定了其优缺点。单克隆抗体是针对单个表位的同种免疫球蛋白。抗体是由一个动物的单个B细胞克隆产生的，因此在免疫化学上相似。多克隆抗体是针对同一抗原的各种表位的异质抗体混合物。抗体是由动物的不同B细胞克隆产生的，因此在免疫化学上不同。多克隆混合物中的抗体可能具有略微不同的特异性和亲和力。如果蛋白质靶标具有相同的氨基酸序列，单克隆抗体更合适。一旦抗原因各种原因发生构象变化，如蛋白质相互作用、翻译后修饰、温度、pH值、固定、盐浓度等，单克隆抗体和抗原的联合作用将受到严重影响。由于多克隆抗体具有多个表位，不受蛋白质构象变化的影响，一般来说，在一定范围内的pH和盐浓度内，多克隆抗体之间的抗原结合比单克隆抗体更稳定。问题三：一抗的孵育时间多久？一抗的孵育时间与温度,抗体浓度有关。一般情况下,在37℃的条件下,孵育1-2小时左右。在室温的条件下,孵育3小时左右。在4℃的条件下,孵育18-24小时左右。义翘神州提供石蜡切片免疫组化（IHC）检测服务，更多免疫组化的问题可以上义翘神州网咨询！https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service

2022-12-07 12:03:22加速色谱分析方法开发与验证: 近年来USP和ICH都针对分析方法开发与验证进行了修订。USP新收录通则分析方法生命周期已于2022年5月1日生效，分别从分析方法开发、分析方法性能确认及分析方法使用三个阶段分别阐述如何在分析方法整个生命周期内对方法进行管理。而ICH Q14分析方法开发和Q2(R2) 分析方法验证的修订也进入到了第三阶段，按照计划其将在2023年5月前完成阶段的定稿。这些信息都表明了分析方法开发和验证的管理将会变得更严谨、更科学。因为色谱仪器包括色谱-质谱联用技术在药物开发过程中的广泛使用，色谱分析方法的开发与验证也成为了方法开发与验证，乃至分析方法生命周期管理中的重要内容。针对色谱方法开发与验证的整体流程，可以将其大致分为：方法筛选、方法优化、耐用性测试和完整的方法验证这四个阶段。而这四个阶段都离不开仪器准备、队列运行、数据查看与处理以及报告这几个环节。赛默飞的旗舰版色谱数据系统Chromeleon 软件功能丰富而注重实践，能够帮助实验室的色谱分析实现精简、高效的工作流，以实现更快的样品到结果的转换。自定义变量的灵活应用在Chromeleon CDS 中创建队列时可以通过手工填写的传统方式，也可基于事先建好的队列模板。值得一提的是Chromeleon 强大的样品列表功能。除了运行样品的基本信息（样品名称、仪器方法、运行的其他必须参数）之外，还可以通过自定义变量的形式，添加额外的注释信息，例如色谱柱类型、缓冲液名称等用于清晰识别每一针进样的信息。使用者还可以进一步创建一些自定义变量并将其与仪器方法中的参数进行链接，更加简单地实现实验设计（DoE）的环节。一旦基本方法固定，便可通过改变色谱柱选择阀或溶剂选择阀等参数实现不同要素的组合以寻找具备可行性的色谱条件，也体现了ICH和USP所倡导的“多变量分析方法开发”这一方针。相比传统的样品队列创建方式，减少了所需创建的仪器方法的数量，并以清晰直观的模式展示了所使用的变量以及变量值，结合缩略图功能提供了更直观的信息。在数据处理阶段，可以再次利用Chromeleon 样品列表中的自定义结果变量功能，可以方便地实现运行样品的同时进行结果计算，例如系统适用性参数的计算，峰面积、含量以及测试是否通过等信息的显示，帮助使用者快速查看所需信息以便灵活调整实验的方向。完全可定制的Chromeleon报告模板也支持自定义变量、公式和计算，使用者可以使用内置的模板，也可以根据需要进行调整，得到包括多个工作表、结果表和图形的报告，无需导出到其他软件，也无需手动计算，从而消除转录错误。所有报告和计算都可以在合规的环境中完成，并在源数据发生变化时自动更新。可以选择在运行结束时自动打印、导出也可以发送电子邮件通知给相关人员。更便捷的eWorkflowChromeleon 也提供一个创建序列、运行并得到结果的简单而直接的方法，这就是eWorkflow。它最大限度地减少了操作步骤并涵盖了色谱或 MS 工作流程的所有方面，定义了可以在哪些仪器上运行分析以及应该使用哪些方法和文件，包括仪器方法、处理方法、报告和外部文件，例如 SOP。与前面提到的自定义变量等有效结合，只需单击几下即可创建复杂的序列并立即运行，并在运行后得到所需的报告。这些都可以减少错误、更快地产生可靠的结果，并且显著减少了培训的需求，有效加速了方法开发的流程。分析方法验证工具包ICH指南定义了方法验证应该执行包括专属性、准确度、精密度、检测和定量限度、线性、范围和耐用性的测试。除了样品运行的环节之外，计算、整理和报告验证结果也可能需要很长的时间，而且大多数测试都涉及将结果与指标进行比较，相对比较繁琐。在eWorkflow的基础上，Chromeleon 又提供了一个方法验证的高效工具，ICH方法验证扩展包。扩展包内有一系列的模板，每个模板都包含处理方法、报告模板和自定义变量以覆盖所需的变量和参数。所有这些都在 eWorkflow 程序中捆绑在一起，以确保正确执行ICH所要求的相关测试，减少人为错误并加速流程：eWorkflow 可以引导创建队列，自动执行所有计算，并通过报告直接显示通过或失败的结论。以上介绍的几个工具仅为Chromeleon 强大功能的冰山一角。结合Chromeleon 实用的多厂商仪器控制能力，出色的系统适用性和智能运行控制功能，便捷的数据积分、处理功能，直观的图形化显示，全面的合规能力，Chromeleon不但可以提升方法开发、验证的效率，也一定能够帮助色谱工作者执行分析方法生命周期的管理。

2023-03-28 13:42:29线上直播 | 锂离子电池开发挑战及应对策略: 阿美特克集团携手旗下8大品牌，7位锂电行业专家，在阳春3月为大家带来锂离子电池专场线上直播，针对锂电行业痛点，提出解决方案。主题：《锂离子电池开发挑战及应对策略》第一场：3月22日 - 锂离子电池关键材料成份、物理及电化学性能测试(14:00-16:00)第二场：3月29日- 锂离子电池电芯包装阻隔性检测/电池包连接件/电池装配的质量控制(14:00-15:30)　直播福利：随机抽取 20 名幸运观众，送《锂电池基础科学》或者《钠离子电池科学与技术》识别二维码，免费报名

2022-04-14 09:24:24mRNA疫苗开发的工艺流程: 在疫情仍未停歇的当下，做好个人防护对每个人来说既是简单的，又是必要的。而群体防护的顺利实施，则要归功于抵抗新冠的各类疫苗了。这其中，就有免疫效果不错的mRNA疫苗。mRNA疫苗具有广泛的应用领域和显著的治疗优势，因而成为诸多药企竞相追逐的热点。本期，小编就带大家了解一下mRNA疫苗开发的工艺流程。 01 DNA原液供应质粒 DNA (pDNA) 是mRNA疫苗生产不可或缺的原材料，可用作 mRNA 的模板。在制备时，第一步是要提取病毒刺突蛋白的DNA序列，然后构建带有该序列的DNA质粒，接着经过扩增、纯化、质检等诸多过程形成我们最终所需的DNA原液。在mRNA疫苗开发应用方面，质粒生产也面临着诸多的压力，尤其是 GMP的压力。 02 mRNA原液制备体外转录（IVT）是mRNA原液制备的主要手段。pDNA 可作为IVT的模板，合成所需的 mRNA 分子。 IVT的工艺比较复杂，除使用pDNA外，还需要添加合成mRNA的必要成分，如核苷酸和mRNA聚合酶。为提高mRNA稳定性，降低其免疫原性，还需在 mRNA的5'末端添加加帽试剂。除此之外，合理设计5'或3'非翻译区(UTR)也可以调整mRNA的稳定性及蛋白质的翻译效率。 mRNA的纯度影响着翻译后蛋白的效力，因此，mRNA原液制备后的纯化过程也是必不可少的，可采用TFF（切向流过滤）或SEC（尺寸排阻色谱）等方法来去除少量残留杂质。 03 mRNA包封为防止疫苗有效成分mRNA进入细胞前被降解，可采用脂质纳米颗粒(LNP)对其进行包裹。具体过程为：将各种脂质成分按一定的比例进行混合，溶解在乙醇或其他有机溶剂中；将mRNA溶解于水中，并用酸性缓冲液稀释至合适浓度。配置好的两相溶液在微流控设备上进行均匀混合，快速制备包裹mRNA的核酸脂质纳米颗粒。与微流控设备匹配的核心耗材为微流控芯片，图1即为芯片内部通道示意图。图1.微流控芯片通道示意图 04 后处理 mRNA包封后需要进一步的纯化。可通过超滤去除有机相以及未包封的游离成分。超滤过程中可以进行溶剂缓冲体系的置换，以及PH值的调节，最终复合物的浓度根据需求进行灵活控制。图2.超滤管至于细菌、微生物的清除，一般采用0.22μm的除菌级过滤器即可。纯化后的mRNA-LNP溶液还可以添加必要的辅料成分，以提升产品长期保存的稳定性。 05 储存运输 mRNA疫苗布局开发过快也带来了些不可避免的问题，即需要低温来保持疫苗稳定，这大大的提升了对储存和运输的要求。在储存运输过程中需进行持续的温度监测，以确保产品始终处于规定的温度范围，否则很难保证最终患者给药时产品的安全性和有效性。总结：mRNA疫苗有着广阔的应用前景，其开发过程也必然充满挑战。了解开发的各个工艺流程，方能锁定难点，各个击破，向疫苗的成功开发更进一步。纳米药物制备系统应用范围： ● 核酸药物发展的前沿方向● mRNA疫苗的开发与挑战● 核酸脂质纳米粒科普——浅谈仪器参数对结果的影响● 核酸脂质纳米粒科普——超滤管规格● 核酸脂质纳米粒科普——后处理电话：021-37827858邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

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