德国伯克勒标签 - 产品信息 - 相关知识

2025-01-10 10:49:44德国伯克勒标签: “德国伯克勒标签”（Bruker Label）通常指的是德国布鲁克（Bruker）公司旗下产品或技术的标识。布鲁克公司是一家在科学仪器领域具有全球影响力的企业，专注于提供高性能的分析、测试和测量解决方案。其产品线广泛，涵盖核磁共振（NMR）、质谱（MS）、X射线衍射（XRD）、光学光谱仪等多个领域。德国伯克勒标签代表了高品质、高精度和前沿技术的结合，是科研和工业领域用户信赖的选择。该公司不断创新，致力于推动科学技术的进步与发展。

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德国伯克勒标签问答

2024-01-19 16:09:13Trx标签蛋白：深度解析与常见问题解答: 硫氧还蛋白（Thioredoxins）是一系列广泛存在于生物体内的氧化还原酶，它能通过置换硫代二硫化物来减少二硫键的结合。常用作融合表达标签的硫氧还蛋白A(TrxA), 分量为11.6kDa，来源于大肠杆菌。 TrxA标签最独特的优点是它的热稳定性。TrxA本身不作为亲和标签来进行重组蛋白优化，而是通过在高温条件下将杂蛋白变性去除而重组蛋白得以保存。TrxA也具有极好的促溶效率，用作促溶标签时可将重组蛋白的可溶性表达从12%提高至95%。下面是针对trx标签常见问答解析： ①trx标签蛋白序列 MSDKIIHLTD DSFDTDVLKA DGAILVDFWA EWCGPCKMIA PILDEIADEY QGKLTVAKLN IDQNPGTAPK YGIRGIPTLL LFKNGEVAAT KVGALSKGQL KEFLDANLAG SGSGHMHHHH HHSSGLVPRG ②带有trx标签会不会影响蛋白的抗原性有可能的，trx标签是比较大的融合标签，有20多KDa，非常有可能改变蛋白的抗原决定簇。一般为了不影响蛋白的功能，会在trx标签和目标蛋白之间加一个酶切位点，比如肠激酶的位点DDDDK，把trx标签去除掉。 ③TRX标签蛋白怎么纯化一般这个载体中都会有His 标签，直接用镍柱纯化即可 ④常见的蛋白标签有哪些？有什么特点？常见的蛋白标签有His-Tag、FLAG-Tag、HA-Tag、Myc-Tag、SUMO-Tag…… His-Tag主要应用：蛋白纯化优选，也可用于检测。特点：• 分子量小，不影响目的蛋白的可溶性、结构和功能。• 可在非离子型表面活性剂存在/变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时表现突出。• 可应用于多种表达系统，纯化的条件温和。• 可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。• 免疫原性相对较低。 FLAG-Tag主要应用：广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域，在真核表达系统中表达效率更高。特点：• 分子量小，不影响融合蛋白功能，比同类标签更具亲水性。• 目的蛋白可直接通过FLAG标签进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白且纯化效率高。• 可以被抗FLAG抗体所识别，便于通过WB、ELISA等方法对含有FLAG标签的融合蛋白进行检测、鉴定。• 融合在目的蛋白N端的FLAG标签，其可以被肠激酶切除（DDDK），从而得到特异的目的蛋白。更多关于蛋白标签详情可以参看：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag 义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索“义翘神州”与我们取得联系。

2024-01-11 16:24:37深入了解GST标签：作用机理、优势与劣势以及常见问题解析: 胱甘肽S-转移酶（GST）是由多基因编码、具有多种功能的超家族酶，GST广泛存在于细菌、真菌、动物和植物体内的一种解-毒系统中，其专一性催化还原型的谷胱甘肽巯基与其他化合物的亲电基团，生成谷胱甘肽衍生物，具有降低化学反应活性的效应。在各种生物体内，GSTs是由多个基因编码的、具有多种功能的一组同工酶，分子量为23∽29kDa，由200∽240个氨基酸组成。有膜结合和胞液两种形式，以胞液GSTs为主。根据蛋白酶的一级序列、免疫原性、酶动力学和三、四级结构的性质，GST又可以分为多个亚类。 GST标签作用机理 1）应用于原核表达，作为一种高度可溶的蛋白，能增加外源蛋白的可溶性，在大肠杆菌中大量表达，起到提高表达量的作用； 2）GST标签蛋白可在温和、非变性条件下洗脱，因此保留了蛋白的抗原性和生物活性； 3）GST在变性条件下会失去对谷胱甘肽树脂的结合能力，因此不能在纯化缓冲液中加入强变性剂（如：盐酸胍或尿素等）； 4）GST融合蛋白已经成为分子生物学领域的基本工具，其广泛用于研究蛋白质-DNA及蛋白质-蛋白质间的相互作用，也可作为抗原用于免疫学或疫苗的研究。 5）GST标签的切除：①凝血酶：一种应用很广泛的蛋白酶，主要特点是经凝血酶切割后的重组蛋白在切割位点的C端会保留两个氨基酸残基。凝血酶可以识别两种类型的氨基酸序列，分别为X4-X3-P-P[K]-X1΄-X2΄和X2-R[K]-X1΄，凝血酶对前一种序列的识别效果更为理想。②Xa因子：Xa因子是一种较高效的去除融合标签的工具酶，可特异性识别I-E[D]-G-R-X1序列，并将融合标签从其C末端切除。 GST标签纯化蛋白的优劣势：优势：1. 适用范围广，可在不同宿主中表达；2. 增强外源蛋白可溶性；3. 可用不同的蛋白酶进行去除；4. 有助于保持蛋白的抗原性与生物活性，提高外源蛋白的稳定性；5. 特异性好，纯化方便且温和。劣势：1. 分子量较大，可能会影响蛋白质的功能和下游实验；2. 仅能纯化可溶性蛋白，若蛋白不可溶，则很难用变性的方法纯化。 GST标签纯化蛋白常见问题解析：问题一：GST 融合蛋白的产量低或无法检测到1、原因：融合蛋白形成包涵体解决方案：①采用低温（16∽25℃）培养细胞，或者诱导过程中降低诱导剂的终浓度至1mM，或者缩短诱导时间。②纯化前需要完全融解和复性。将裂解液与GST标签蛋白纯化琼脂糖凝胶在摇床上轻摇2个小时或者更长时间（过夜），充分结合后上柱纯化。 2、原因：融合蛋白可能失活解决方案：采用温和的超声破碎条件或者其他的裂解条件，比如采用溶菌酶。 3、原因：融合蛋白被蛋白酶降解解决方案：在裂解步骤或洗涤步骤加入适量的蛋白酶抑-制剂，如PMSF。 4、原因：融合蛋白不能有效地从树脂上洗脱下来解决方案：①延长洗脱时间，或者增加洗脱液中还原性谷胱甘肽的浓度至15mM或者更高调节洗脱液的pH值至8.0∽9.0。②在洗脱液中加入Triton X-100（终浓度0.1%）、辛基-葡萄糖苷（终浓度2%）或者NaCl（终浓度0.1∽0.2 M）。问题二：洗脱液中有较多杂带1、原因：融合蛋白被蛋白酶降解解决方案：在裂解步骤或洗涤步骤加入适量的蛋白酶抑-制剂如PMSF。 2、原因：一些宿主蛋白，比如伴侣蛋白，可能会和融合蛋白互相作用解决方案：在洗涤液中加入DTT（终浓度5 mM）。在纯化前将重组蛋白溶液和伴侣蛋白溶液(2 mM ATP, 10mM MgSO4, 50 mM Tris-HCl)，37℃振荡10 min 3、原因：过度的超声处理会导致一些蛋白与融合蛋白相结合解决方案：采用温和的超声破碎条件或者其他的裂解条件。 4、原因：有些蛋白会与融合蛋白或树脂发生非特异性结合解决方案：优化洗涤条件：加入一些洗涤剂如1% Triton X-100、1%Tween-20、0.03% SDS 或者0.1% NP-40 可以降低非特异性吸附。优化洗涤液中的盐浓度也可以降低非特异性吸附。更多GST标签蛋白纯化详情可以关注义翘神州：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/gst-tag-protein-expression

2022-12-28 09:16:34德国QATM金相切割机，后悔没早买: 月初的时候，朋友跟我安利了一个德国QATM的牌子，说是他们实验室用了很久的一款金相切割机，非常不错。之前也有其他小伙伴向我推荐过很多次，当时我是各种犹豫，一来对这个牌子不熟，二来没有使用过，着实有点不放心。这次再次被朋友安利，正好实验室近期也在选购金相切割机，索性就选择了德国QATM手动/自动一体砂轮金相切割机Qcut 250A试试看。不用不知道，用了之后还真是后悔没早买，确实如朋友所说，好用性价比又高，真正是金相实验室必备，样品切割时的得力小帮手。原装进口德国QATM手动/自动一体砂轮切割机Qcut 250A，是一款湿式砂轮金相切割机，具有精密动态范围和手动垂直切割（直切）功能，切割直径可达95mm，配备机电操作杆制动器。自动X轴可实现准确的脉冲切割和摆动式切割，宽敞的切割室空间提供了多种样品夹持选择。大尺寸窗式滑动前门提供观察切割过程良好视野，结合带有安全互锁的侧门，可对切割室实现更方便操作和安全控制。切割片直径10in，优异的LED照明，T型槽工作台，大型不锈钢台面耐磨板是可更换的，切割室左、右开孔可用于长样品切割。外置45L双格室带过滤系统的冷却循环系统，坚固的铝制设计，粉末涂层，耐用美观。适用大多数材料金相切割，是金相实验室常备的切割设备。 Qcut 250A手动/自动一体砂轮金相切割机后悔没早买的五大性能如下： • 带有机电操作杆制动器的手动Y轴；7英寸触屏操作界面，直观的ATM用户软件控制 • 自动X轴及手柄实现的手动行程；切割力相关的进给控制（X轴）；可选激光辅助定位 • 带有安全锁的滑动门和侧门操作方便更安全；切割室左、右侧的开口适用于长工件的切割 • 大型不锈钢台面配有可更换的耐磨板；铝制机架，粉末涂层，美观且更耐用 • 切割室优异的LED照明；快速拆卸，应用更灵活总之，我是真的后悔没有早点用上德国QATM金相切割机，现在我也变成了德国QATM金相切割机的忠实粉丝，逢人就安利。相信您只要使用过，一定会像我一样喜欢上且离不开。

2024-01-16 16:37:22MBP标签：深度解析其蛋白大小、序列及其在生物技术中的应用: MBP（麦芽糖结合蛋白）标签蛋白大小为40kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。 MBP标签序列：396 AA 纯化：融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化。结合的融合蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。结合亲和力在微摩尔范围。一些融合蛋白在0.2% Triton X-100或0.25% Tween 20存在下不能有效结合，而其他融合蛋白则不受影响。缓冲条件为pH7.0到8.5，盐浓度可高达1M，但不能使用变性剂。如果要去除MBP融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。 mbp标签优缺点：简单亲和纯化即可实现；增加蛋白表达量和蛋白稳定性；促进蛋白的可溶性和正确折叠；标签较大，对蛋白的结构/功能会有一定影响。常见的蛋白标签：常见的融合标签包括谷胱甘肽S-转移酶（GST）、麦芽糖结合蛋白（MBP）、几丁质结合蛋白（CBD）、硫氧还蛋白（Trx）、链霉亲和素、多聚组氨酸（Poly-His）、小分子泛素样修饰蛋白（SUMO）和血凝素标签（HA）。 GST: GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解-毒过程中起到重要作用的转移酶，它的天然大小为26KD。将它应用在原核表达的原因大致有两个，一个是因为它是一个高度可溶的蛋白，希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性；另一个是它可以在大肠杆菌中大量表达，起到提高表达量的作用。GST融合表达系统广泛应用于各种融合蛋白的表达，可以在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达。结合的融合蛋白在非变性条件下用10mM 还原型谷胱甘肽洗脱。在大多数情况下，融合蛋白在水溶液中是可溶的，并形成二体。GST标签可用酶学分析或免疫分析很方便的检测。标签有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性。在大多数情况下GST融合蛋白是完全或部分可溶的。纯化：该表达系统表达的GST标签蛋白可直接从细菌裂解液中利用含有还原型谷胱甘肽琼脂糖凝胶(Glutathionesepharose)亲和树脂进行纯化。GST标签蛋白可在温和、非变性条件下洗脱，因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在变性条件下会失去对谷胱甘肽树脂的结合能力，因此不能在纯化缓冲液中加入强变性剂如：盐酸胍或尿素等。如果要去除GST融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。检测：可用GST抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。 HA：HA标签蛋白，标签序列YPYDVPDYA，源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇，9个氨基酸，对外源靶蛋白的空间结构影响小, 容易构建成标签蛋白融合到N端或者C端。易于用Anti－HA抗体检测和ELISA检测。用HA peptide可实现带HA tag的蛋白洗脱，0.15M Arginine-HCl缓冲液, pH3.0可实现蛋白纯化beads 的重生。 …… 更多关于蛋白标签详情可以关注：https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag