液相色谱 - 质谱联用仪（LC-MS/MS）维护指南

一、日常维护（每日 / 每次实验前后）

日常维护是预防故障的基础，需在实验开始前、结束后严格执行，重点关注 “清洁、检查、保护”。

（一）液相色谱（LC）部分

1. 流动相与溶剂管理
2. 流动相需使用 色谱纯试剂，水需为超纯水（电阻率≥18.2 MΩ・cm），避免杂质污染色谱柱与离子源。
3. 流动相配制后需 超声脱气 10-15 min（或使用在线脱气机），防止气泡进入泵体导致压力波动、峰形异常。
4. 含缓冲盐（如 ammonium acetate、formic acid-ammonium formate 等）的流动相需 现配现用，避免微生物滋生（缓冲盐溶液放置不超过 48 h）；实验结束后需用无盐流动相（如甲醇 - 水、乙腈 - 水）冲洗管路与色谱柱，防止盐结晶堵塞。
5. 溶剂瓶需定期清洗（每周 1 次），避免残留溶剂与杂质累积；瓶口密封垫若出现老化、渗漏，需及时更换。
7. 泵系统检查开机前检查
8. 溶剂瓶液位，确保溶剂充足（不低于瓶身 1/3），避免泵空转损坏密封圈。
9. 观察泵压力曲线：基线压力应稳定（波动≤±2%），若压力骤升（可能是管路堵塞、色谱柱污染）或骤降（可能是漏液、溶剂耗尽），需立即停机排查。
10. 实验结束后，用 100% 甲醇或乙腈冲洗泵管路 15-30 min（流速 0.2-0.5 mL/min），保护泵密封垫与单向阀。
12. 进样器维护
13. 每次实验前，用流动相或样品溶剂冲洗进样针 3-5 次，避免样品交叉污染。
14. 定期检查进样针是否有堵塞、弯曲，若出现样品残留严重（峰形拖尾、重现性差），需用甲醇 - 水（1:1）或专用清洗液超声清洗进样针（10 min）。
15. 检查进样口密封垫（ septum ）：若出现渗漏、磨损（进样时阻力增大），需及时更换（一般每 500-1000 次进样更换 1 次）。
17. 色谱柱保护
18. 色谱柱使用前需确认流动相兼容性（避免使用与固定相反应的溶剂），并按柱说明书设定柱温（±1℃ 稳定）。
19. 样品需经 0.22 μm 滤膜过滤（或离心 12000 rpm/10 min），去除颗粒物，防止堵塞色谱柱筛板。
20. 实验结束后，用梯度洗脱方式冲洗色谱柱：先以 10% 有机相冲洗 10 柱体积（去除缓冲盐），再用 90% 有机相冲洗 15 柱体积（去除强保留杂质），最后以 50% 有机相平衡色谱柱，密封保存（反相柱用甲醇 / 乙腈，正相柱用正己烷）。
21. （二）质谱（MS/MS）部分

1. 离子源清洁与检查
2. 每次实验前，目视检查离子源喷针、锥孔（或毛细管）是否有结晶、残留（表现为质谱响应降低、基线噪音增大），若有污染需及时清洁。
3. 清洁方法：喷针：用甲醇或异丙醇擦拭外壁，若堵塞可将针尖浸入甲醇 - 水（1:1）超声 5 min（避免超声时间过长损坏喷针）。
4. 锥孔 / 毛细管：用蘸有甲醇的无尘纸轻轻擦拭，或用 5% 硝酸溶液浸泡 10 min（去除金属残留），再用超纯水冲洗、烘干（60℃ 烘箱 30 min）。
5. 检查离子源气体（氮气 / 氩气）压力：雾化气、干燥气压力需符合仪器要求（一般雾化气 0.3-0.5 MPa，干燥气 0.2-0.4 MPa），气体需经分子筛过滤（去除水分、油雾）。
7. 质量轴校准
8. 每日首次开机后，需进行质量轴校准（使用仪器专用校准液，如 Pierce LTQ Velos 校准液、Agilent ESI Tuning Mix），确保质荷比（m/z）准确性（误差≤±0.1 Da）。
9. 若实验过程中出现峰漂移、定性错误，需重新校准质量轴。
11. 真空系统
12. 检查开机后观察真空度：质谱真空系统（机械泵 + 分子泵）需达到设定真空值（一般一级真空＜10⁻³ mbar，二级真空＜10⁻⁶ mbar），若真空度无法达标（可能是密封圈老化、真空阀故障、分子泵损坏），需停机排查。
13. 机械泵维护：检查机械泵油位（需在油标上下限之间），若油色变深、浑浊（一般每 6-12 个月），需更换机械泵油（使用仪器专用油，如 Edwards Ultragrade 19）；更换后需运行机械泵 30 min 排气。
15. 检测器
16. 保护避免高浓度样品直接进样（样品浓度需匹配仪器检测范围，一般 ng/mL-μg/mL 级别），防止检测器饱和损坏。
17. 实验结束后，继续通干燥气 15-30 min，吹干离子源内部残留溶剂，避免水分凝结影响真空系统。
18. 二、定期保养（每周 / 每月 / 每季度 / 每年）
19. 定期保养需按周期执行，重点维护易损耗部件与核心系统，建议建立保养记录台账。
20. （一）每周保养

1. 清洗溶剂瓶与进样器样品环：用甲醇 - 水（1:1）超声清洗溶剂瓶（10 min），进样器样品环用 100% 甲醇冲洗 20 min（流速 0.5 mL/min）。
2. 检查色谱柱性能：通过进样标准品（如利血平），观察保留时间 RSD（≤1%）、峰面积 RSD（≤3%）、理论塔板数（需符合柱说明书要求），若性能下降需进行柱再生（反相柱：用甲醇 - 乙腈 - 水 = 50:40:10 冲洗 20 柱体积）。
3. 清洁离子源腔体：拆除离子源组件，用甲醇擦拭腔体内部，去除残留污染物，晾干后重新安装。
4. （二）每月保养

1. 更换泵密封垫与单向阀：若泵压力波动大、漏液，需更换泵头密封垫（一般每 3-6 个月）；单向阀若出现堵塞（表现为流速不稳），用甲醇超声清洗 10 min，或直接更换。
2. 检查质谱传输线：传输线若有残留，用蘸有甲醇的无尘纸擦拭，避免污染物进入质量分析器。
3. 校准流速准确性：用容量瓶校准泵流速（设定流速 1.0 mL/min，收集 10 min 流出液，称重计算实际流速，误差≤±2%）。
4. 更换氮气 / 氩气钢瓶：若钢瓶压力低于 0.5 MPa，及时更换，更换后 purge 管路 5 min，去除空气。
6. （三）每季度保养

1. 更换色谱柱筛板：若色谱柱压力持续升高，且冲洗后无改善，可能是筛板堵塞，需更换色谱柱入口筛板（按柱型号匹配）。
2. 清洁质量分析器：对于三重四极杆质谱，需清洁四极杆电极（用甲醇擦拭，避免划伤电极表面）；若仪器配备碰撞池（如 Q2），需检查碰撞气（氩气）流量，确保碰撞效率稳定。
3. 检查机械泵密封圈：若机械泵出现漏油、真空度下降，需更换密封圈（使用仪器专用配件）。
4. 验证仪器检出限与精密度：进样低浓度标准品（接近检出限），计算检出限（S/N≥3）与精密度（峰面积 RSD≤5%），确保仪器性能达标。
5. （四）每年保养（建议由厂家工程师执行）

1. 更换分子泵：分子泵使用寿命一般为 5000-8000 小时，若出现真空度下降、噪音增大，需更换分子泵。
2. 全面清洁质谱腔体：拆除质量分析器、检测器等核心部件，专业清洁内部残留污染物（如离子源逸散的盐类、有机物）。
3. 校准检测器响应：使用标准品校准检测器灵敏度，确保线性范围（一般 R²≥0.995）。
4. 检查电路系统：排查仪器主板、电源、连接线是否有老化、松动，确保电路安全稳定。
6. 三、关键部件维护要点
7. （一）色谱柱

• 禁止使用极端 pH 流动相（反相柱一般 pH 2-8，正相柱 pH 3-7），避免固定相水解。
• 避免骤冷骤热：柱温变化速率≤5℃/min，防止色谱柱填料塌陷。
• 长期不用时，需密封保存于阴凉干燥处，避免阳光直射。
• （二）离子源

• 不同离子源（ESI、APCI、MALDI）维护差异：
• 离子源温度控制：干燥气温度需高于流动相沸点 10-20℃，防止溶剂冷凝（如甲醇流动相，干燥气温度≥50℃）。
• （三）真空系统

• 机械泵：避免频繁启停（每次停机后需间隔 30 min 再开机），防止泵油乳化。
• 分子泵：运行时禁止触碰，避免震动影响真空稳定性；若遇突然停电，需关闭仪器电源，待来电后按程序重启（先开机械泵，待真空达标后再开分子泵）。
• （四）检测器

• 避免长时间暴露在高浓度离子流中（如连续进样高浓度标准品），防止检测器疲劳。
• 若检测器响应降低，可清洁检测器窗口（用甲醇擦拭），或联系厂家进行检测器校准。
• 四、故障预防与注意事项

1. 一：实验室环境控制
2. 温度：20-25℃（波动≤±2℃），避免靠近热源（如烘箱、空调出风口）。
3. 湿度：40%-60%，湿度过高易导致仪器内部结露、电路短路；湿度过低易产生静电，影响质谱信号。
4. 电源：使用稳压电源（电压 220V±10%，频率 50Hz±1Hz），避免电压波动损坏仪器。
5. 二：操作规范
6. 严格按仪器操作规程开机 / 关机：开机顺序（LC→MS 机械泵→MS 分子泵→真空达标→校准→实验）；关机顺序（停止进样→冲洗 LC 管路与色谱柱→关闭 MS 离子源→关闭分子泵→待真空释放后关闭机械泵→关闭 LC）。
7. 禁止在真空未达标时进样，禁止用强腐蚀性溶剂（如浓盐酸、氢氧化钠溶液）作为流动相。
8. 样品前处理需规范：避免样品中含有高浓度盐、强氧化性物质（如过氧化氢），防止损坏离子源与色谱柱。
9. 常见故障预警与处理故障现象可能原因预防措施泵压力骤升管路堵塞、色谱柱筛板堵塞样品过滤、定期冲洗管路、更换色谱柱筛板质谱响应降低离子源污染、质量轴漂移每日清洁离子源、定期校准质量轴峰形拖尾 / 分裂色谱柱污染、进样量过大柱再生、减少进样量、优化流动相 pH真空度不达标密封圈老化、机械泵油污染定期更换密封圈与机械泵油、检查真空阀定性错误质量轴偏移、标准品失效每日校准质量轴、使用新鲜标准品五、维护记录与台账
11. 建议建立《LC-MS/MS 维护记录表》，记录以下信息：

1. 日常维护：日期、操作人员、流动相配制情况、离子源清洁情况、质量轴校准结果。
2. 定期保养：周期、保养项目（如更换密封垫、清洁质量分析器）、更换部件型号与数量。
3. 故障记录：故障现象、排查过程、解决方案、维修人员（厂家 / 内部）。
4. 仪器状态：压力、真空度、标准品保留时间 / 峰面积、检出限等关键参数。
5. 通过规范记录，可追溯仪器运行状态，提前预判故障风险，延长仪器使用寿命。总结
7. LC-MS/MS 维护的核心是 “预防为主、定期检查、及时处理”，重点关注流动相纯度、样品前处理、离子源清洁与真空系统稳定性。日常维护需细致，定期保养需按时执行，同时严格遵守操作规范，才能确保仪器长期稳定运行，获得可靠的分析数据。若遇到复杂故障（如分子泵损坏、质量分析器故障），需及时联系仪器厂家工程师进行维修，切勿自行拆卸核心部件。