混匀实验反复翻车？别再怪手法，缺的是这台仪器！

实验时，样品混匀不充分，结果永远只差一点？

1、确定溶液均质化过程中的混匀性能

步骤 1：通过移液混合含胭脂红的酶模拟液与反应缓冲液，然后测定完全混合溶液的吸光度以确定参考值。

步骤 2：在 ThermoMixer^? C 上混合相同反应组分，直至吸光度读数达到参考值。

2、确定细菌沉淀重悬过程中的混匀性能

步骤 1：测定 E. coli 悬液的吸光度以确定参考值。

步骤 2：通过离心收集 E. coli 大肠杆菌，混合样品直至吸光度达到参考值。

酶反应体系（含甘油 / 表面活性剂，粘度高）

▲ 容器：1.5 mL 离心管 + SmartBlock 1.5 mL离心管加热模块

▲ 参数：1800 rpm，混匀 10 秒

▲ 效果：200 μL 体系完全均质，无溅出，模块不同位置结果一致

酶反应：在加热模块上不同位置的酶反应溶液+胭脂红溶液的 OD505 吸光度值

高盐浓度缓冲液（密度差大）

▲ 容器：96 孔 / 1000 μL 深孔板 + SmartBlock DWP 1000 深孔板模块

▲ 参数：1500 rpm，混匀 20 秒

▲ 效果：800 μL 体系完美混匀，全程无液体溅出

高盐浓度缓冲液：在加热模块上不同位置的高盐溶液+Patent Blue VF的OD640吸光度值

基因组 DNA 溶液（酶促反应模板，混匀要求高）

▲ 容器：1.5 mL 离心管 + SmartBlock 1.5 mL 离心管加热模块

▲ 参数：1800 rpm，体积不同时间不同

100 μL→10 秒；500 μL→20 秒；1500 μL→30 秒

▲ 结论：体积越大，所需混匀时间越长，按比例调整就对了

所示时间为基因组 DNA 溶液完全均质所需的秒数（即样品的 OD640 与参考值相匹配时的时间）

细菌沉淀重悬（菌体高密度 / 易粘附，最难搞）

这一环节容器影响最显著，相同 1000 rpm 下，不同锥底管结果天差地别：

▲ 50 mL 锥底管：20 秒完全重悬（液体圆周流动，混匀效率最高）

▲ 25 mL 锥底管：60 秒完全重悬（模块不同位置无差异）

▲ 15 mL 锥底管：225 秒才完成（管径小，影响液体流动，最耗时）

在锥底管中重悬 E. coli 大肠杆菌。

图 A：锥底管在 SmartBlock加热模块上的位置对混匀性能没有影响。

图 B: 容器形状对混合性能的影响。

根据样品类型选对容器 + 配套加热模块

按装液体积调整混匀时间，参考实测最优转速