层析工艺指南 | Capto S ImpAct填料在BPG层析柱中的装填技巧

Cytiva工业级层析填料一直以稳健、一致的放大性著称。Capto S ImpAct填料是一种广泛用于抗体精纯和其他大分子纯化等领域的强阳离子交换填料，在实际生产当中，填料需要装入大规模的不锈钢层析柱以获得更高的线速度及更高的床高，从而实现更高的生产效率与更强的工艺设计灵活性。为获得稳定且可重复的纯化效果，必须确保填料在柱内实现高效、均匀且可验证的装填。

检查玻璃柱管是否有破损和划痕，在上下两端换好新的10微米筛网；

使用水平仪将柱管调平；

为确保安全，可将泄压阀置于泵出口位置，并将压力表添加到柱头位置；

设置报警压并排除气泡；

将匀浆缓慢导入层析柱中，并将柱壁上的填料冲洗干净，使匀浆上方清澈液高度大概在1 cm左右；

插入柱头并与柱管固定，将柱头下降至匀浆表面，可以允许一些清液穿过密封环到柱头上方，收紧密封环。确保柱顶阀门打开，缓慢将柱头下移直至看不到有气泡从顶部阀门逸出；

设置流速60 cm/h，并迅速将顶部阀门切换到柱内流路，打开柱底阀门，直到柱床被压实。取压缩因子PF=1.14，计算目标柱床高度并标记位置；

停止流速并关闭底部阀门。松开密封圈，并将柱头向下移动至柱床上方1厘米处，收紧密封圈。将顶部阀门调至排放位置，并使用接头对柱床进行手动压缩，使其达到柱子上的标记位置。多余的缓冲液将通过柱顶排出。然后可使用bypass流路清洗整个管路；

调整顶部阀门至柱内，打开底部阀门，将流速设置到110 cm/h，运行5个CV，缓慢降低流速2分钟，然后将上下管路对调，采用反向流速重复一遍此流程。