纤连蛋白(Fibronectin)作为细胞外基质中的重要组分,在细胞粘附、迁移、增殖和分化过程中扮演着关键角色。随着生物制药行业的快速发展,对纤连蛋白的需求日益增长,尤其在组织工程、伤口愈合和细胞培养等领域。
纤连蛋白是一种高分子量的糖蛋白,由两个相似的亚基通过二硫键连接而成的二聚体。每个亚基的分子量约为220-250 kDa,由多个功能域组成,这些功能域能够与不同的分子结合,如胶原、肝素、纤维蛋白和细胞表面的整合素受体。
图1 纤连蛋白二聚体结构[1]
纤连蛋白的分子结构包含三种类型的重复单元:
01
I型重复单元
约45个氨基酸残基,参与与纤维蛋白和肝素的结合。
02
II型重复单元
约60个氨基酸残基,参与与胶原的结合。
03
III型重复单元
约90个氨基酸残基,参与与细胞表面整合素的结合。
01
重组纤连蛋白介绍
Introduction
重组纤连蛋白是通过基因工程技术在体外表达和纯化的纤连蛋白。与天然纤连蛋白相比,重组纤连蛋白分子量更小,在保留其核心活性域的同时稳定性也有所提升,并且重组纤连蛋白具有更高的纯度和可控性,广泛应用于生物医药领域、医美领域和科学研究领域。
图2 重组纤连蛋白的应用领域
02
重组纤连蛋白
的纯化案例
Example
在重组纤连蛋白纯化工艺中,VDX MMA ultra 复合模式层析介质展现出显著的技术优势。作为最新研发的创新层析填料,其通过整合阴离子交换与疏水作用的双重分离机制,相比单一离子交换介质具有更优的选择性,相比传统复合模式介质具有更强的结合力,显著提升目标蛋白的纯度和回收率。
本案例对比了某品牌MMA、 VDX MMA ultra两种填料纯化纤连蛋白的效果,从实验结果上看,高结合力的VDX MMA ultra纯化重组纤连蛋白的回收率显著高于某品牌MMA。
这一性能优势源于VDX MMA ultra独特的配基设计,在pH 8.0时具有更稳定的结合特性,为重组纤连蛋白的规模化生产提供了更高效的纯化解决方案。
01
纯化工艺
Binding Buffer:20mM NH4Ac,pH8.0
Elution Buffer:1.0M NH4Ac,pH8.0
Sanitization : 0.5M NaOH
02
层析图谱
a)某品牌MMA填料
b) VDX MMA ultra
03
检测结果
04
结果与讨论
在本次对比实验中,VDX MMA ultra填料展现出优秀的纯化性能。与某品牌MMA填料相比,两者获得的纤连蛋白纯度相当,但VDX MMA ultra以高达95%的回收率显著优于某品牌的85%,不仅大幅提高了目标蛋白的得率,使每批产出增加近12%,更有效降低了单位产量的纯化成本,为大规模生产带来切实的效益提升。
03
订购信息
Information
参考文献
[1] Hymes J P, Klaenhammer T R. Stuck in the Middle: Fibronectin-Binding Proteins in Gram-Positive Bacteria[J]. Frontiers in Microbiology, 2016, 7(e40353). DOI:10.3389/fmicb.2016.01504.
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