在炎症性肠病(IBD)及相关的结直肠癌研究中,葡聚糖硫酸钠(DSS)与氧化偶氮甲烷(AOM)是两款不可或缺的化学诱导剂。二者造模方法简便、效果稳定,可成功模拟急性/慢性溃疡性结肠炎及结肠炎相关结肠癌模型。但在实际实验中,动物实验影响因素繁多、造模效果不稳定、个体差异大等常见问题。本文结合实际实验经验,梳理了这份DSS & AOM造模实战小贴士,重点全在细节里!
DSS造模效果受动物品系、周龄、饲养环境等多种因素影响。同时,DSS作为一种聚合物,存在一定批间差。不同实验室或不同批次下,最佳造模浓度可能存在一定差异。
√建议:首次造模、更换批次或进行长周期结直肠癌实验前,务必进行预实验。
※方法:选择2-3个DSS浓度梯度,每组2-3只小鼠,造模1周,通过预实验的DAI评分+病理切片确定最佳造模浓度后,建议根据实验需求一次性备足同一批次DSS用于后续正式实验。
溃疡性结肠炎模型以小鼠为主,推荐使用C57或Balb/c品系,8-12周龄,22-24 g的小鼠进行造模。其他模式动物如大鼠、兔子、斑马鱼、果蝇、猪等文献中均有报道。
体重下降、腹泻、便血等仅为表型指标。
DAI评分反映疾病严重程度,而非是否造模成功
最终判断标准:病理切片
常见误区:“没有便血”=“造模失败” ×
√切记:病理切片为溃疡性结肠炎模型造模是否成功评判“金标准”
DSS模型中,小鼠对DSS耐受性差异较大:
·第1-2天即开始出现体重下降
·第5天体重才开始变化
均属于正常现象
√提示:若造模7天后体重仍无明显变化,建议可重新开始实验并适当提高DSS浓度(增加0.5-1%)
DSS极易吸潮,对于长期不用的DSS,可将其转移至自封袋中,并加入干燥剂,再放回原包装。拧紧后封上封口膜,室温避光保存。
AOM产品为微量液体状态封装于安瓿瓶中,液体在运输过程中可能会挂壁。因此开封前请轻轻晃动瓶身,使液体充分流至瓶底,避免损失。
·使用安瓿瓶开瓶器或砂轮在瓶颈处划一圈
·戴上手套,用纱布包裹瓶身
·轻轻掰开,防止玻璃碎片飞溅
!注意:AOM为致癌试剂,使用时请做好个人防护
AOM打开后,可将其配置成10 mg/mL的储液。可将无菌水或生理盐水直接加入安瓿瓶中。
混匀后分装,-20℃避光保存,可稳定保存12个月。
配成储液后分装保存。每次使用时可取出单只储液稀释成工作液浓度后使用。
DSS与AOM是肠道疾病研究中的得力工具,用好他们需要“三分经验”与“七分细心”,希望这份实验攻略能帮大家少走弯路,顺利拿到理想数据!
全部评论(0条)
MP Fastprep-96 高通量样品制备仪
报价:面议 已咨询 3167次
MP FastPrep-24样品快速处理系统
报价:面议 已咨询 3174次
MPure-12自动化核酸提取仪
报价:面议 已咨询 3162次
MP Biomedicals 手持式样品制备仪
报价:面议 已咨询 3159次
MP Fastprep-24 5G 快速样品制备仪
报价:面议 已咨询 3487次
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi
参与评论
登录后参与评论