原代人骨髓间充质干细胞(hMSC)因传代极限(通常≤10代)难以支撑大规模实验,武汉尚恩生物开发的HBMSC-SV40(SNL-760) 是经SV40大T抗原(LTAg)永生化的人骨髓MSC系,兼具原代MSC表型特征与稳定增殖能力,广泛应用于干细胞基础研究与应用开发。
SNL-760源自健康供体原代hMSC,通过慢病毒载体转染SV40 LTAg实现永生化:
| 指标 | 参数值 |
|---|---|
| 生长模式 | 贴壁生长,成纤维样梭形 |
| 汇合度80%排列 | 漩涡状/平行排列 |
| 群体倍增时间(PDT) | 24-30h(传代10-20代) |
| 最大传代代数 | ≥50代(PDL≥50) |
| 标志物 | 阳性/阴性 | 阳性率 |
|---|---|---|
| CD29(整合素β1) | 阳性 | ≥95% |
| CD44(透明质酸受体) | 阳性 | ≥98% |
| CD105(内皮糖蛋白) | 阳性 | ≥90% |
| CD34(造血干细胞) | 阴性 | ≤2% |
| CD45(白细胞抗原) | 阴性 | ≤2% |
| HLA-DR(MHCⅡ) | 阴性 | ≤1% |
| 分化方向 | 诱导时间 | 检测方法 | 阳性率 |
|---|---|---|---|
| 成骨分化 | 21d | 茜素红染色 | ≥85% |
| 成脂分化 | 14d | 油红O染色 | ≥75% |
| 成软骨分化 | 28d | 阿尔新蓝染色 | 阳性(定性) |
| 操作步骤 | 参数要求 |
|---|---|
| 传代时机 | 汇合度80-90% |
| 传代比例 | 1:3-1:4(每3-4d传代) |
| 消化酶 | 0.25% 胰蛋白酶-EDTA(37℃,1-2min) |
| 冻存液配方 | 90% FBS + 10% DMSO |
| 冻存程序 | 梯度降温(-80℃过夜→液氮长期保存) |
| 复苏存活率 | ≥90%(复苏后72h活率) |
该细胞系参数稳定、表型一致,是干细胞研究领域的常用工具,可满足实验室规模化实验需求。
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