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冷冻电镜样品怎么冻?投入冷冻技术全解析

来源:徕卡显微系统(上海)贸易有限公司 更新时间:2025-10-16 10:15:19 阅读量:113
导读:冷冻电镜样品怎么冻?投入冷冻技术全解析


一招教会你高效制备玻璃化样品

在冷冻电镜技术中,样品冷冻质量直接决定最终成像分辨率。投入冷冻法(Plunge Freezing)作为最常用的冷冻固定技术,以其操作简便、成本低廉的优势,成为单颗粒分析的首选方法。


投入冷冻技术原理

投入冷冻技术通过将样品载网直接投入-196℃的液态乙烷/丙烷中,实现超高速冷却,使样品中的水形成非晶态冰(玻璃态冰)而非破坏性的六方晶冰。

关键步骤:

样品应用:将3-5μL样品滴在电镜载网上

滤纸吸样:用滤纸从边缘吸除多余液体,形成薄液膜

快速投入:机械臂快速将载网投入液态乙烷中

液氮保存:将冷冻后的样品转移至液氮中存储


技术优缺点分析


优势:

操作简单快速,单个样品仅需几分钟

成本低廉,无需复杂设备

能够完美保存表面纳米结构

适合大批量样品的快速制备


局限性:

仅能处理<200nm超薄层样品

厚样品内部易形成冰晶

需要优化样品浓度和缓冲条件

对样品均匀性要求较高


适用样品类型

投入冷冻技术特别适合以下样品:

病毒颗粒(流感病毒、新冠病毒等)

蛋白质溶液(膜蛋白、复合体等)

脂质体及纳米颗粒

核糖体及其他大分子复合物

单层细胞及细胞器悬液


手动 vs. 自动投入冷冻对比表


技术参数

手动投入冷冻

Leica EM GP2 自动投入

操作难度

高(需熟练技巧)

低(一键启动)

重现性

低(依赖操作者)

高(程序化控制)

环境控制

温湿度可控(4-60℃, 99%)

样品通过率

30-50%

>90%

液层一致性

差异较大

高度均一

适用用户

有经验研究者

所有级别用户


Leica EM GP2自动投入冷冻仪:

精准控制的冷冻专家

全自动机械控制环境参数可编程设计,有效解决手动操作的不确定性问题。其内置的温湿度控制舱(4-60℃, 湿度最高99%)能有效防止样品溶液挥发,确保实验条件的高度重复性。

Leica EM GP2   温度/湿度/二次冷冻剂温度调节界面

Leica EM GP2 可调整二次冷冻剂温度,在实现快速液化的同时,可定义不同的冷冻温度,获得更佳的冷冻结果。

EM GP2配备智能吸滤系统,通过精确定时控制滤纸接触样品的力度和时间,确保每个样品都能形成厚度均匀的薄液层。机械投掷装置以高度一致的速度和角度将样品投入冷冻剂,实现超高冷却速率,确保水分子完全玻璃化。

冰层厚度均匀

冰层厚度不均匀


应用案例展示

病毒颗粒

细菌

微管

细胞

核心功能:

环境参数可调:温度(4-60℃)和湿度(最高99%)精确控制

过程全自动:从吸滤到投入全程程序化操作

冷冻剂温度可调:快速液化,且可实现特定温度冷冻

高重现性:确保每个样品获得一致的冷冻条件

防污染设计:封闭式工作舱避免环境污染

用户友好:触摸屏控制,操作简单易学


该仪器特别适合病毒学研究蛋白质结构分析,能够大幅提高样品制备成功率和数据质量,是单颗粒分析研究的理想选择。

选择正确的冷冻方法,

让您的电镜研究事半功倍!


相关产品

EM GP2自动投入冷冻仪


点击此处申请样机试用


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上海, 200335 China

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徕卡仪器有限公司北京办事处, CN-100044 China

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广州国际生物岛星岛环北路1号B2栋501、502单元

徕卡仪器有限公司广州办事处, CN-510075 China

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成都市锦江区东御街18号 百扬大厦1709室,CN-610063 China

西安分公司

陕西省西安市雁塔区南二环西段64号凯德广场写字楼8楼09室,710065 China

关于


的历史最早可追溯到19世纪,作为德国著名的光学制造企业,徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史,逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用,并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。


始终与科学界保持密切联系,不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门:生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有9大产品研发中心与4大生产基地,在二十多个国家设有销售及服务分支机构,总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。

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关于作者

徕卡显微系统(Leica Microsystems)是德国著名的光学制造企业。具有175年显微镜制造历史,现主要生产显微镜, 用户遍布世界各地。早期的“Leitz”显微镜和照相机深受用户爱戴, 到1990年徕卡全部产品统一改为“Leica”商标。徕卡公司是集显微镜、图像采集产品、图像分析软件三位一体的显微镜生产企业。

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