《自然》合作子刊：科学家改良多维度精准α-syn检测平台，助力帕金森病等突触核蛋白病的机制研究和药物筛选

像赵大爷这样的患者，我国还有500多万例，这是今年发布的《中国帕金森病报告2025》（简称《报告》）提供的统计和测算数据，目前，我国的帕金森病患者数量已经占到了全球患者数量的43.14%^[1]，发病率也高于全球平均水平。

帕金森病的病理特征为黑质多巴胺能神经元内异常的α-突触核蛋白（α-syn）聚集，形成路易小体和路易神经突。针对α-syn的检测和以此为靶点的治疗药物开发十分紧迫。

病理状态下，α-syn会在Ser129位点发生磷酸化（pS129），有超过90%的α-syn是磷酸化形式，它们在正常状态下仅占少数^[2]。因此，无论是诊断性检测，还是药物研发过程中的疗效验证，针对总α-syn和pS129形式的检测都至关重要。

虽然目前我们已经有了一些可用的检测抗体，但是许多商业化检测抗体是针对人类α-syn设计的，而小鼠的α-syn在氨基酸序列上与人类略有不同，这导致它们在小鼠中的识别效率低，灵敏度差。传统检测方法如Western blot和ELISA也面临着灵敏度不理想的问题，尤其是在蛋白表达量低的情况下。

研究团队将结果发表在了《自然》旗下的《npj 帕金森病》杂志上^[3]。他们发现，改良后的试剂盒能够在体外实验、复杂的细胞裂解液以及脑组织提取物中，对人类和小鼠的野生型和pS129形式的α-syn进行稳定且高灵敏度的定量检测。

此外，他们还引入了一种聚集型α-syn的ELISA检测方法与两种试剂盒检测相结合，首次展示了野生型小鼠接种α-syn预制原纤维（PFFs）后，其脑内α-syn在总量、磷酸化状态、聚集程度以及亚细胞分布方面发生的变化，为突触核蛋白病的研究打开了“一扇视野更广阔的窗”。

在改良的过程中，研究团队筛选了5种新抗体组合，其中最佳组合在识别人类和小鼠的pS129 α-syn时的检测限（LoD）可以低至0.02-0.04 pg/mL，最低定量限（LLoQ）也达到0.04-0.08 pg/mL；总α-syn的数据分别为0.04-0.09 pg/mL和0.1-0.5 pg/mL。总体来说，灵敏度提升5-20倍。

在后续的实验中，研究人员分别在脑组织和细胞裂解液这两种不同类型的样本中进行了验证，发现新的检测盒均能保持高灵敏度，且识别α-syn的特异性强，具有可重复性。另外，由于不同脑区的组织成分也可能会干扰检测结果，因此，研究人员评估了脑组织样本中的“基质效应”，发现高倍稀释可有效消除干扰，保证了检测的准确性。

在验证了新的检测盒的高灵敏度和可用性后，研究人员将它们与聚集型α-syn ELISA相结合，系统性地展示了在帕金森病小鼠模型大脑内α-syn的多维度变化。

这一发现挑战了以往“磷酸化促进聚集”的假设，以及通过抑制pS129来阻止聚集的治疗策略可能需要重新评估。

综上所述，这项研究展示了改良的AlphaLISA SureFire Ultra和BioLegend ELISA技术在检测α-syn总量、磷酸化状态及聚集形式方面的强大能力，填补了小鼠α-syn检测工具的不足，为此后研究中使用非转基因小鼠模型进行病理研究奠定了基础，并且也初步揭示了脑区病理易感性与蛋白分布机制，为理解病理蛋白的细胞内动态提供了新视角。