如何正确操作SPE设备,SPE操作步骤分为以下几个步骤:
1. 吸附剂的活化
在萃取样品之前,用适当的溶剂冲洗SPE柱以保持吸附剂湿润,这样它就可以吸附目标化合物或干扰化合物。不同的SPE柱调节模式使用不同的溶剂。
(1)反相固相萃取所用的弱极性或非极性吸附剂,通常先用甲醇等水溶性有机溶剂洗涤,再用水或缓冲溶液洗涤。在用甲醇洗涤之前,也可先用强溶剂(如己烷)浸取,以消除吸附在吸附剂上的杂质及其对目标化合物的干扰。
(2)正相固相萃取所用的极性吸附剂,通常用目标化合物所在的有机溶剂(样品基质)来洗涤。
(3)离子交换固相萃取所用的吸附剂,用于非极性有机溶剂中的样品时,可用样品溶剂洗涤;用于极性溶剂中的样品时,可先用水溶性有机溶剂洗涤,然后再用适当pH值、含有一定量有机溶剂和盐的水溶液洗涤。
为了使 SPE 柱中的吸附剂在调节后一直保持湿润直至添加样品,调节后应在吸附剂顶部保留约 1 ml 的调节溶剂。
2. 加载
将液体或溶解的固体样品倒入活化的SPE小柱中,然后对样品进行抽真空和加压,使样品进入吸附剂。
3. 洗涤和洗脱
样品进入吸附剂,目标化合物被吸附后,可用较弱的溶剂将较弱的干扰化合物洗掉,然后用较强的溶剂将目标化合物洗脱并收集。如前所述,洗脱和洗涤可以通过抽真空、添加或离心使洗脱液或洗脱液通过吸附剂来完成。
如果所选用的吸附剂对目标化合物吸附作用弱或不吸附,而对干扰化合物吸附作用强,则可以先将目标化合物淋洗出来并收集起来,使干扰化合物保留(吸附)在吸附剂上,使二者分离。多数情况下,目标化合物保留在吸附剂上,zui后用强溶剂洗脱,更利于样品净化。
为了方便使用固相萃取。在萃取过程中,固体相对于分析物的吸附力大于样品基质的吸附力,当样品通过SPE柱时,分析物被吸附在固体表面,其他组分随样品母液一起通过柱子,分析物用适当的溶剂洗脱。SPE的应用范围很广,如血液、尿液、血清、血浆和细胞质等生物流体的分析;牛奶加工、酒类、饮料和果汁的分析;水资源的分析与监测;水果、蔬菜、谷物及各种动植物组织;固体药物,如药丸、果蔬食品中农药和除草剂残留的分析,抗生素和临床药物的分析等。
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