富衡生物｜细胞冻存的温度奥秘：为何要先经 -80℃再过液氮？

缓慢降温减少冰晶损伤： -80℃冰箱能提供相对缓慢的降温速度，每分钟约 1 - 3℃。这一速度使细胞内水分有足够时间渗出，在细胞外形成冰晶，而非在细胞内无序生长。若直接快速降温，细胞内水分来不及渗出，就会形成大而尖锐的冰晶，像利刃般破坏细胞结构。例如，在培养皮肤成纤维细胞冻存时，先在 -80℃过夜，细胞内水分有序渗出，形成的小冰晶对细胞损伤小，复苏后细胞存活率高。

让冷冻保护剂充分发挥作用：冻存液中的冷冻保护剂，如二甲基亚砜（DMSO），需时间与细胞充分接触并渗透到细胞内部。 -80℃过夜过程，给了冷冻保护剂充足时间发挥作用，降低细胞内溶液冰点，减少冰晶形成，还能在细胞膜表面形成保护膜，进一步保护细胞。