荧光显微成像技术能够精准标记特定分子或细胞结构,剖析细胞信号通路和疾病机制,其在生命科学与医学研究中具有不可替代的价值。然而,宽场荧光显微镜受限于成像深度和分辨率,尤其在厚样本观察时,光散射产生的背景信号会干扰成像清晰度,影响观察效果;点扫描共聚焦显微镜虽能提供高分辨率图像,但成像速度慢,且长时间观测时光毒性高,易破坏活细胞生理状态。
辰英的S3000超快三维荧光成像系统兼具高成像速度和低光毒性优势,能实时捕捉细胞内快速动态变化,同时极大延长了活细胞观测时间窗口。在厚组织切片、3D细胞培养模型及活体胚胎发育等复杂生物样本研究中应用广泛,是肿瘤微环境监测、蛋白细胞器定位以及药物靶向性等领域研究的理想工具。
1
蛋白共定位
1. M133S隐匿性肝炎突变蛋白细胞器定位
S3000超快三维荧光成像系统凭借其超快成像和低光毒性,实现了细胞中内质网、自噬体、溶酶体及线粒体与突变蛋白共定位的稳定、高清成像,为蛋白-细胞器互作可视化成像提供了高清晰、低背噪的成像工具。
绿色为GFP标记的M133S突变蛋白,红色为细胞器标志蛋白的免疫荧光,蓝色为DAPI荧光[1]
2. 婴儿血管瘤潜在生物标志物蛋白共定位
S3000的快速三维扫描、低光毒性和高分辨率优势,高效实现婴儿血管瘤病理切片中Apelin及APJ蛋白的特异性荧光标记观察,为临床标志物验证提供关键的成像支持。
绿色为CD31的免疫荧光,红色为潜在生物标志物免疫荧光,蓝色为DAPI荧光[2]
2
药物靶向性评估
1. 卵巢癌药物靶向性
低背噪宽场成像配合低光毒超快速共聚焦成像,大小视野丝滑切换,S3000为评估药物靶向性与疗效提供多维度可视化工具。
活死染,绿色为活性肿瘤细胞,红色为死亡肿瘤细胞[3]
2. 类风湿性关节炎药物靶向性
荧光显微成像为药物研发提供更加直观多维的药物靶向效果评估依据,S3000的低光毒性、快速三维成像性能,能够清晰呈现摄取药物荧光强度差异,促进药物靶向性开发。
绿色为靶向药物,蓝色为DAPI荧光[4]
3
活体三维成像
活体斑马鱼神经
通过3D层扫和大视野拼接,2 min实现完整斑马鱼神经成像,低光毒光源和超快成像速度保障了观察过程中斑马鱼的活性。
4
微生物研究
1. MRSA生物被膜
低光毒、大面积快速生物被膜层扫,助力MRSA耐药菌药物开发。
绿色为SYTO9荧光,红色为PI荧光[5]
2. 肠道微生物
S3000的出色的弱荧光捕获性能实现了肠道微生物双荧光标记高清成像,为揭示细菌单细胞生长分裂模式提供了关键技术支持。
绿色为D型氨基酸FADA探针荧光,红色为D型氨基酸Cy5ADA荧光探针[6]
参考文献:
[1] Zou, Y., Chen, S., Cui, Y., & Zou, Y. (2024). M133S mutation possibly involve in the ER stress and mitophagy pathway in maintenance hemodialysis patients with occult hepatitis B infection. Scientific reports, 14(1), 13981. https://doi.org/10.1038/s41598-024-64943-3
[2]Chen, Q., Zhang, Y., Ni, S., Yang, L., Li, J., Yuan, X., Chen, M., Liu, J., Luo, X., Xie, Y., & Wang, H. (2024). Serum apelin as a potential biomarker for infantile hemangiomas. Pediatric blood & cancer, 71(7), e30989. https://doi.org/10.1002/pbc.30989
[3]Liu, M., Li, S. T., Wang, J. H., Chen, M. H., Zhang, Z. X., Liu, Y., ... & Tang, L. (2024). Methotrexate-modified docetaxel liposome targeting with ginsenoside Rh2 as a membrane stabilizer for the treatment of ovarian cancer. Journal of Drug Delivery Science and Technology, 98, 105917.
[4]Wang, Y., Guo, R., Zou, M., Jiang, L., Kong, L., Zhao, S., Zhang, X., Wang, W., & Xu, B. (2024). Combined ROS Sensitive Folate Receptor Targeted Micellar Formulations of Curcumin Effective Against Rheumatoid Arthritis in Rat Model. International journal of nanomedicine, 19, 4217–4234. https://doi.org/10.2147/IJN.S458957
[5]Zhang, Z., Chen, M., Wang, J., Liu, M., Guo, R., Zhang, L., Kong, L., Liu, Y., Yu, Y., & Li, X. (2024). Hyaluronic Acid-Modified Micelles of Azithromycin and Quercetin Against Infections Caused by Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus. International journal of nanomedicine, 19, 9637–9658. https://doi.org/10.2147/IJN.S476471
[6]Gao, J., Sun, D., Li, B., Yang, C., & Wang, W. (2022). Integrated identification of growth pattern and taxon of bacterium in gut microbiota via confocal fluorescence imaging-oriented single-cell sequencing. mLife, 1(3), 350–358. https://doi.org/10.1002/mlf2.12041
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