在上期分享了革兰阴性菌更新以后，本期将继续分享2026年CLSI M100文件的其他更新，包括β-溶血链球菌和淋病奈瑟菌的折点更新、厌氧菌累积抗菌谱和质控等，以及实验室如何落实相关的更新。
01
β-溶血链球菌增加
甲氧苄啶-磺胺甲噁唑的折点
以往认为甲氧苄啶-磺胺甲噁唑对化脓链球菌无抗菌活性，后来确认原因为绵羊血琼脂中的胸苷造成的假耐药。目前临床常用磺胺类药物治疗β-溶血链球菌造成的皮肤和软组织感染，EUCAST也有相关的折点，因此2026年CLSI增加了β-溶血链球菌-甲氧苄啶-磺胺甲噁唑的MIC法折点：
但是由于目前绵羊血琼脂中的胸苷仍然会造成纸片扩散法的假耐药，所以没有纸片法折点，同时还有一条相关备注：“检测和报告应仅限于从皮肤及皮肤结构相关感染部位分离出的菌株；对于来自其他来源（如咽部）的菌株则不适用此方法。”
02
淋病奈瑟菌第三代头孢菌素折点更新
2024年WHO公布了细菌性病原体优先级清单，其中对于第三代头孢菌素和/或喹诺酮耐药的淋病奈瑟菌属于高优先级“High group”。
目前此类多重耐药的淋病奈瑟菌主要分布在日本和东地中海地区，因此CLSI更新了淋病奈瑟菌的头孢曲松和头孢克肟折点，删除了纸片法折点，增加了MIC法的中介和耐药折点。
CLSI M100 ED 36淋病奈瑟菌第三代头孢菌素折点
头孢曲松和头孢克肟纸片法折点还有待进一步评估。
目前推荐对于淋病奈瑟菌感染患者，在使用三代头孢菌素治疗无效的情况下，考虑进行药敏测试，协助进行目标治疗，同时也有耐药监测领域的需求。
03
附录D 厌氧菌累积抗菌谱
厌氧菌的累积抗菌谱是今年CLSI的更新重点，附录D中的数据全面修订，与2025年CLSI对照，进行了如下更新：
1
厌氧菌累积抗菌谱数据全面更新，覆盖更多的厌氧菌。
共收集了48,894株厌氧菌
来源于全球范围内3个不同的参比实验室
分离时间为2017-1-2024.12月。（M100 ED35使用2013-2016的数据）
使用CLSI推荐的琼脂稀释法进行药敏测试（CLSI M11），并使用CLSI的折点进行解释。
共计7个表格，覆盖了 50种厌氧菌
2
分类更细，从属水平统计分析细化到种水平。
普雷沃菌属：属水平→13个种
梭菌属：属水平→7个种
CLSI M100 ED36普雷沃菌累积抗菌谱
3
部分药物调整，部分没有折点的药物引入 ECV作为判断依据
增加药物：阿莫西林-克拉维酸，头孢曲松
删除药物：氨苄西林-舒巴坦，亚胺培南，头孢西丁
痤疮丙酸杆菌的利福平和万古霉素使用ECV进行判断
4
耐药性方面需要重点关注的细菌和药物
部分种间耐药性差异较大的厌氧菌
如普雷沃菌中的产黑色素普雷沃菌与口腔普雷沃菌对于青霉素的耐药率等，可见下表
与2025年比，耐药性有明显改变的厌氧菌
如：多形拟杆菌、迪氏副拟杆菌、创伤球菌参考下表
对于一般实验室，厌氧菌的药敏应该如何进行，如何用好CLSI的累积抗菌谱？
1
哪些厌氧菌感染需要重点关注，临床有药敏测试的需求？
重点关注来自深部的，具有临床意义的感染部位的标本：
菌血症、脑脓肿、心内膜炎、骨髓炎、关节感染、假肢和血管支架
患者有较长的抗菌药物治疗疗程（数周）
致病性强，且药敏结果难以预测的厌氧菌：
梭菌、拟杆菌、普雷沃菌、梭杆菌
2
厌氧菌的药敏方法有哪些？
琼脂稀释法：目前是CLSI 推荐的参比方法，见CLSI M11文件
需要使用特殊的培养基：布氏琼脂（添加了氯化高铁血红素，维生素K和裂解羊血），需要厌氧环境进行操作和接种（要有手套箱），不适用于一般实验室。
浓度梯度法：使用Etest试剂条进行测试，同样需要特殊培养基（配方同上），但是相对而言测试灵活一些，对于厌氧环境的要求低一些。
微量肉汤稀释法：仅适用于脆弱拟杆菌和多形拟杆菌。
3
如何使用厌氧菌的累积抗菌谱
主要用于协助临床更准确的使用经验治疗厌氧菌感染。
在等待厌氧菌药敏结果期间：
大部分的实验室没有厌氧菌药敏的测试能力，可能需要外送，时间较长。
部分以经验治疗为主的厌氧菌：
来自黏膜等多污染，多微生物定值的部位，如口腔、直肠、囊肿等部位。
厌氧菌药敏的总结 Tips
1
对于厌氧菌，准确的鉴定和药敏同样重要。
2
目前厌氧菌的耐药性在增加，不能使用累积抗菌谱假定其耐药性。
04
血培养阳性直接纸片法测试
肠杆菌新增哌拉西林-他唑巴坦折点；铜绿假单胞菌修改头孢吡肟中介折点；不动杆菌删除妥布霉素折点，具体见下表
05
质控和其他
1
头孢德罗的质控
对于头孢德罗CLSI推荐使用铜绿假单胞菌 ATCC 27853进行质控，且理想的MIC分布为0.12-0.25μg/mL。需注意使用某些培养基质控结果会以0.5μg/mL为主，增加了假耐药风险。
2
CRE质控菌株-亚胺培南质控范围进行了更新
3
淋病奈瑟菌的大观霉素
4
流感嗜血杆菌和肺炎链球菌药敏用培养基 MH-F的适用范围进一步扩大。
06
今后2年CLSI的更新重点和计划安排
1
下列折点已经在重新评估中
肠杆菌目-口服头孢折点、不动杆菌-头孢菌素折点、淋病奈瑟-头孢曲松和头孢克肟的纸片法折点，几种特定的非发酵菌-折点表格2B-5其他非肠杆菌目会进一步细分。
2
方法学相关
哌拉西林-他唑巴坦的纸片法；
头孢德罗的纸片法；
铜绿假单胞菌的碳青霉烯酶检测和相关建议；
使用平板中早期生长的菌落来制备接种菌悬液；
在质控环节需要进行菌落计数——对接种菌悬液浓度进行质控；
标准菌株的质控范围与EUCAST统一；
增加新的抗菌药物（部分药物如Contezolid已经在QC表格和抗生素列表附录中进行了更新）；
部分药物不适用M07标准药敏方法时的替代方案。
3
药敏标准
2027 更新——M45（苛养菌药敏标准）
2026 更新——M52（鉴定药敏设备性能验证）
2026 推出——M68（新增标准，实验室验证新折点）
3月13日对于CLSI M100文件2026年主要更新讲课，已经制作了回放，扫描下方二维码可以观看回放。
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