革新 HIV 检测！这把 “黄金标尺” 安全又普惠

“假病毒”是怎样设计的？

中疾控研究团队利用慢病毒 LV 四质粒系统：

共转染 HEK-293T 细胞，48h 后，收集细胞上清裂解释放的 HIV-1 PsV（浓度可达1.88 × 10⁹ copy/mL）。

▲ 改良的 LV 四质粒系统示意图

由于删掉了U6启动子（等于掐断了复制回路），这些假病毒颗粒只能感染一次。因此，生物安全等级降到 BSL-2，普通实验室也能操作。

 超速离心：桥接病毒生产与表征的关键一步

在本研究中，作者采用 Eppendorf CP-NX  超速离心机对假病毒颗粒 HIV-1 PsV 进行高效分离，有效去除了杂质，成功获得结构完整性高、浓度均一的纯化样本。该纯化步骤为后续透射电镜清晰成像及质控品的稳定性评估提供了可靠样本基础。

▲ CP-NX 系列超速离心机

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提纯后 HIV-1 PsV 经电镜验证，呈现与真实 HIV 一致的 100nm 球状结构及表面棘突。

冻了五次、放了七天，质量依旧“在线”

稳定性是检验质控品性能的“试金石”。研究人员对制备出的假病毒样品开展了一系列严苛测试：

在 4℃ 环境下放置 7 天，活性仍保持 100%，显著优于灭活病毒（仅 3 天就出现活性下降）；

在 -80℃ 深冻与 25℃ 解冻之间循环 5 次，其活性依然稳定不变；相比之下，传统的 MS2 材料在第 2 次冻融后便开始失效；

▲ 三种质控品的冻融稳定性分析

值得一提的是，在全国 60 家实验室的盲测（EQA）中，该假病毒质控品表现优异，CV 值＜5%，并且完美兼容 Roche、华大等 12 种主流检测试剂，真正实现了“一把尺子量天下”的目标。半年后重新检测，数据仍然保持高度一致，再现性良好。

由于采用细胞大规模培养技术，假病毒的生产成本仅为灭活病毒的 1/10，这使得县级医院也能轻松开展高质量 HIV 检测，彻底解决了“买得起试剂、用不起标尺”的困境。此外，由于慢病毒载体可容纳长达 8 kb 的外源片段，该技术还可灵活嵌入其他耐药基因片段，未来有望用于抗病毒药物的疗效监测，为艾滋病、乙肝、新冠等其他病毒的耐药性监测提供了全新的“安全尺”解决方案。

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1、Han D. et al., 2025, Microbiology Spectrum “Development of a novel pseudovirus-based quality control material for HIV-1 nucleic acid testing”