维生素D是一种脂溶性维生素，它对于骨骼的健康发育和免疫系统的正常功能起着重要作用。添加在化妆品中的两种维生素D形式是维生素D2和维生素D3，两者都能起到强化营养的目的，如维生素D2可单独或与维生素A并用于软膏及乳液状化妆品中，对湿疹、溃疡及皮肤创伤愈合等有疗效；维生素D3可防止受害的黑色素细胞癌变，特别适用于老年人化妆品。但长期使用含有维生素D2、维生素D3的化妆品也会引起维生素过剩症，产生皮肤钙化的不良后果。因此，检测化妆品中的维生素D2、D3的含量至关重要。
本应用是参考DB 37/T 3309-2018《化妆品中维生素D3和维生素D2测定 高效液相色谱法》，采用C18色谱柱TSKgel ODS-120T (4.6 mmI.D.×25 cm) 分析维生素D3、D2的分离效果，标准曲线符合上述标准要求。
混合标准储备液溶液的配制：称取维生素D2 0.10 g及维生素D3 0.2 g，移入100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为标准储备溶液。避光保持，保存期不超过2周。
色谱柱：TSKgel ODS-120T（4.6 mmI.D×25 cm, 5 μm）
流动相：甲醇+乙腈=90+10（HPLC分析前，经0.45 μm滤膜过滤及真空脱气）
流速：1.0 mL/min
柱温：室温
检测器：UV@265 nm
进样量：10.0 μL
图1 维生素D2、D3标准物质液相色谱图
图2 维生素D2校正曲线
图3 维生素D3校正曲线
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