多聚螯合物酶法--通用免疫酶复合物 (UIP)法
- 上传人: 研域(上海)化学试剂有限公司 |大小:10.5KB|浏览:1344次|时间:2018-09-19
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多聚螯合物酶法--通用免疫酶复合物(UIP)法长期以来,许多的研究者希望IHC方法更敏感、更稳定、更简单,要求多步检测系统简化,但敏感性要进一步提高,使这一技术面临巨大的挑战。在实践中,往往是步骤减少了,敏感性也降低,这是一对矛盾。为了克服这一矛盾,为此尝试了许多办法,如催化信号放大系统(CSA)、免疫PCR、末端产物放大技术等方法,其敏感性增加了,但伴随而来的高非特异性背景染色使应用者难接受。一种新的多聚螯合物酶二步法在1995年被隆重推出,该方法与简单的二步法相比较,具有很高的敏感性、稳定性和特异性。目前,多聚螯合物酶法也称非生物素检测系统,有三种不同物质设计的多聚螯合物,它们是以碳为骨架(CCCCCCC一)的多聚螯合,主要构成EnVision法的EnVision试剂。它的主要缺点是不易折叠,相对分子质量大,形成空间障碍,使穿透细胞或核膜能力下降,影响到方法的敏感性,并常出现组织染色不均一。另一种是以多聚糖为骨架的多聚螯合物,主要用于PowerVision法,它可以折叠,使酶和抗体分子呈串珠样紧密排列,其复合物颗粒小于EnVision试剂,其敏感性好于EnVision法。第三种是以氨基酸类为骨架的多聚螯合物,主要用于UIP(universalimmunoperoxidasepolymer)法,其敏感性基本与PowerVision法相同。其缺点是多聚物中有N末端暴露,形成的电荷能和组织细胞发生静电吸附,可造成非特异性染色,染色时需平衡静电荷。UIP(universalimmunoenzymepolymer)法,即通用免疫酶复合物法,是Nkhirei发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与EnVision法相似,不同的是UIP复合物为HRP氨基酸抗鼠或抗兔IgG复合物(NHistofine复合物)。因NHistofine复合物相对分子质量较EnVision复合物相对分子质量稍小,理论上具有更强的穿透力。多聚螯合物酶法--通用免疫酶复合物(UIP)法
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