抗小鼠整合素α5β1抗体的生成方法
- 上传人: 上海科兴商贸有限公司 |大小:49KB|浏览:214次|时间:2018-10-03
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抗小鼠整合素α5β1抗体的生成详情简介:整合是很重要的粘附分子的调节肿瘤和内皮细胞存活,增殖和迁移。整合素α5β1已被证明是血管生成过程中发挥着关键作用。此整合,volociximab(M200)的YZ剂,YZ内皮细胞的生长和运动在体外,独立的生长因子的周围环境,并在兔VX2肝癌模型在体内YZ肿瘤的生长。虽然已经过测试,在打开的标签volociximab,飞行员在黑色素瘤,癌和肾细胞癌Ⅱ期临床试验,评估行动的volociximab的机制已经受到了限制,因为这种抗体没有交叉反应,小鼠α5β1,排除其使用在标准的小鼠异种移植模型。生成方法:我们产生了面板的大鼠抗小鼠α5β1抗体,扼要重述的属性volociximab的抗体,该抗体识别的意图。杂交瘤克隆中筛选出类似的功能的volociximab,包括α5β1异源二聚体和纤维连接蛋白阻断整合素结合的特异性。抗体,符合这些标准的一个子集,其特征还在于他们的能力绑定到小鼠血管内皮细胞,YZ细胞迁移和体外血管生成块。从这个面板中选择一种抗体,涵盖所有的这些属性,339.1,和异种移植模型进行测试。雌性Sprague-Dawley大鼠(Simonsen的)从小鼠胎盘或用鼠标α5β1-Fc融合蛋白的纯化与α5β1腹腔内免疫。标准技术定影NSO-衍生的融合伴侣(美国典型培养物保藏ZX)从免疫的小鼠的脾细胞产生的单克隆抗体。甲面板α5β1-特异性抗体鉴定通过ELISA使用的Fc融合蛋白,并通过流式细胞仪分析小鼠内皮细胞和细胞系的结合。
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