在血清样品中通过化学发光免疫实验检测新冠 IgG 抗体

本文由 美谷分子仪器（上海）有限公司 整理汇编

2024-09-14 05:21 401阅读次数

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• 在血清样品中通过化学发光免疫实验检测 新冠 IgG 抗体

  作为新冠病毒免疫反应的一部分，感染者体内会产生病毒特 异性抗体，在出现症状后的一至三周内，这些抗体可以在血液 中被检测到。IgG 和 IgM 几乎同时出现，而 IgG 在更长时间内维持一个高水平。在血清中，由于感染病毒或接种疫苗而产生的可检测到的抗体可以防范将来被新冠病毒感染。但这些抗体持续的时间长短和提供保护的程度是有关新冠病毒仍需密切调查的众多问题之一。 在人体血清中，通过免疫实验来检测新冠抗体是增进我们了解 这 种 疾 病 以 及 疫 苗 研 究 的 重 要 工 具。Promega LumitTMDx SARS-CoV-2 免 疫 实 验 使 用了 带 有 SmBiT 和 LgBiT ( 这 是 NanoLuc 荧光素酶的两个亚基，只有当它们通过结合相互靠近时，才具有功能 ) 标记的新冠病毒刺突蛋白受体结合区域(RBD) 的一个片段。当这些标记过的病毒蛋白片段与含有新冠病毒抗体的样品一起孵育时，他们将与抗体结合，将 SmBiT和 LgBiT 两个亚基结合到一起，并产生功能性的荧光素酶。 添加 Lumit 检测试剂，在微孔板光度计上测量产生的荧光信号。[详细]

  2022-03-23 16:38

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• 在血清样品中通过化学发光免疫实验检测新冠 IgG 抗体

  在血清样品中通过化学发光免疫实验检测新冠 IgG 抗体[详细]

  2024-09-14 05:21

  应用文章

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• 血清白蛋白抗体 IgG（BSA IgG ）ELISA试剂盒说明

  血清白蛋白抗体 IgG（BSA IgG ）ELISA试剂盒说明[详细]

  2016-08-10 00:00

  实验操作

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• 为何牛血清在细胞培养实验中如此受宠？

  作为各类种属的高质量血清供应商，一般客户咨询血清购买时，我们都会推荐牛血清。而我公司Z为的血清产品中莫过于胎牛血清了，那么为何牛血清在细胞培养实验中如此受宠呢？据上海恒远技术员分析，主要原因有这五个方面：1.提供结合蛋白：作用是携带重要地低分子量物质，在细胞代谢过程中起重要作用。2.提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。3.提供基本营养物质：氨基酸、维生等是细胞生长必须的物质。4.提供激素和各种生长因子。5.对培养中的细胞起到某些保护作用。针对第五个原因，我们来ZD谈谈。有一些细胞，如内皮细胞、样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。上海恒远公司技术员分析，这是因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了的粘度可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。还含有一些微量元素和离子，他们在代谢中起重要作用。在昨日上午的时候，我公司业务员接到了实验技术人员的电话，其中特别说明到了有多位老师提出问题：人血清一定要加热灭活吗？不然会怎样？其实对于它的加热灭活是应该根据情况而定的。很多朋友在使用实验者认为一定需要加热灭活，其实这个认知是不正确的，是否需要灭活是要根据情况而定。人们通常通过在56℃加热30分钟的办法，来灭活其中的补体，以及其中可能的微生物（比如支原体）的污染。加热灭活带来的问题是，其中的氨基酸、维生素和生长因子等也会不同程度的被破坏。但是它的补体含量很低，即使在未稀释的胎牛血清中，也观察不到溶血现象。另外37℃的加热能够有效灭活补体。所以对它而言，并不需要通过专门的热灭活来灭活其中的补体。早期的人血清制备中的滤膜的孔径大于0.22um，不能有效的去除支原体的污染。热灭活可以去除支原体的污染。但是现在制备中的终端滤膜的孔径为0.1um甚至小到0.04um，所以一般没有支原体的污染。通过以上，上海恒远公司总结：除非有特别的情况，标准厂家生产的一般不需要加热灭活。不过因考虑到其质量问题，为安全起见，还是以加热灭活为好。[详细]

  2018-11-16 10:02

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• 人旋毛虫IgG抗体ELISA试剂盒实验说明书

  人旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)ELISA试剂盒实验说明书本试剂盒仅供研究使用。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)表达。用纯化的人甲肝病毒抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)的存在与否。人旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)ELISA试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。人旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)ELISA试剂盒操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。人旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)ELISA试剂盒计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值(CUTOFF)计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品OD值<临界值(CUTOFF)者为旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)阴性阳性判定：样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)阳性。注意事项1．操作严格按照人旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)ELISA试剂盒说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物请避光保存。6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。人旋毛虫IgG抗体(trichinosisIgG)ELISA试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-23 10:00

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• 人布鲁氏菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)检测试剂盒

  人布鲁氏菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)检测试剂盒[详细]

  2024-09-18 11:04

  产品样册

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• 人结核菌杆抗体IgG(TB-Ab IgG)检测试剂盒

  人结核菌杆抗体IgG(TB-Ab IgG)检测试剂盒[详细]

  2024-09-20 22:51

  操作手册

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• 人抗副流感病毒IgG抗体(anti-PIV IgG )检测试剂盒

  人抗副流感病毒IgG抗体(anti-PIV IgG )检测试剂盒[详细]

  2024-09-16 05:13

  实验操作

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• 人流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)检测试剂盒

  人流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)检测试剂盒[详细]

  2024-09-19 03:55

  实验操作

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• 人流感病毒抗体IgG(FLU)检测试剂盒

  人流感病毒抗体IgG(FLU)检测试剂盒[详细]

  2015-03-13 00:00

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• 猪口蹄疫抗体(IgG)ELISA检测试剂盒

  猪口蹄疫抗体(IgG)ELISA检测试剂盒[详细]

  2015-07-06 00:00

  其它

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• 人包虫抗体IgG 检测试剂盒

  人包虫抗体IgG 检测试剂盒[详细]

  2024-09-16 01:59

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• 禽肉中氯霉素残留化学发光酶免疫分析方法的建立

  禽肉中氯霉素残留化学发光酶免疫分析方法的建立[详细]

  2024-09-14 01:04

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• 定量检测血清样本中 SARS-CoV-2 Spike ( 刺突蛋白 ) 和 Nucleocapsid ( 核衣壳蛋 白 ) 的 IgG 抗体

  定量检测血清样本中 SARS-CoV-2 Spike ( 刺突蛋白 ) 和 Nucleocapsid ( 核衣壳蛋 白 ) 的 IgG 抗体[详细]

  2022-04-26 17:13

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• 定量检测血清样本中 SARS-CoV-2 Spike ( 刺突蛋白 ) 和 Nucleocapsid ( 核衣壳蛋 白 ) 的 IgG 抗体

  快速、准确和常用的分子水平检测技术对于应对 SARS-CoV-2(COVID-19) 的大流行发挥着重要作用。为了加深我们对感染和免疫之间关系的理解，检测感染和检测抗体都尤为重要。重要的挑战是要探索出能够满足这些检测需求的灵敏、一致的和易用的检测方法，并且这些检测方法的成本是在合理范围 内。目前 市 面上针对感 染 Z 准确 的 检 测 方法 是 针对 病 毒mRNA 的定量 RT-PCR，然而，它并不能够反映出免疫反应的过程。鉴于目前ZD仍然是放在开发更有效的方法以识别病症，而在抗体检测的分析方法的开发层面的进展仍然不足。目前市场上的抗体测试有很多假阳性结果，因此他们都不是了解SARS-CoV-21 免疫反应细微差别的可靠方法 1。因此，对于研究 COVID-19 免疫和抗体应答来说，一种可靠的、高通量的方法亟需开发。[详细]

  2024-09-29 08:52

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• 人沙眼衣原体抗体IgG(CT-IgG)检测试剂盒

  人沙眼衣原体抗体IgG(CT-IgG)检测试剂盒[详细]

  2015-03-16 00:00

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• 人腮腺炎抗体IgG（Mumps-IgG）ELISA检测试剂盒

  人（Human）腮腺炎抗体IgG（Mumps-IgG）ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：Mumps-IgG试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Mumps-IgG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Mumps-IgG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Mumps-IgG的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：40IU/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗Mumps-IgG抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型人（Human）腮腺炎抗体IgG（Mumps-IgG）ELISA检测试剂盒自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：40IU/L（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。20IU/L（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液10IU/L（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0IU/L（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5IU/L（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液1.25IU/L（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0IU/L（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。人（Human）腮腺炎抗体IgG（Mumps-IgG）ELISA检测试剂盒操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（IU/L）A4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F1.251.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。人（Human）腮腺炎抗体IgG（Mumps-IgG）ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的Mumps-IgG标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的Mumps-IgG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-40IU/L4、敏感度：0.1IU/L[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 人军团菌抗体IgG(LP Ab-IgG)检测试剂盒

  人军团菌抗体IgG(LP Ab-IgG)检测试剂盒[详细]

  2024-09-23 13:54

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• Expec 7000测定血清样品中8种元素

  Expec 7000测定血清样品中8种元素[详细]

  2024-09-23 23:23

  专利

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• 猴子风疹病毒抗体IgG（RV IgG）酶联免疫分析

  www.biokanu.com猴子风疹病毒抗体IgG（RVIgG）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定猴子血清，血浆及相关液体样本中风疹病毒抗体IgG（RVIgG）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猴子风疹病毒抗体IgG（RVIgG）水平。用纯化的猴子风疹病毒抗原IgG包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入RV-IgG抗体，再与HRP标记的风疹病毒抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的RV-IgG呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猴子风疹病毒抗体IgG（RVIgG）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：13.5U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为9U/L，6U/L，3U/L，1.5U/L，0.75U/L）。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：0.5U/L-10U/L保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-22 10:00

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