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epicentre MV41025 MiniV™ In Vitro Transcription Kit

发布：北京中北林格科技发展有限公司

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产品简介：北京中北林格供应epicentre MV41025 MiniV™ In Vitro Transcription Kit，中北林格是epicentre总代理，提供epicentre产品货号报价查询。其他包括lucigen总代理，cellscript总代理，Biosearch technologies总代理，epicentre总代理，illumina总代理，ICLLAB总代理，ImmunoReagents总代理。

产品名称:MiniV™ In Vitro Transcription Kit

货号:MV41025

规格:25 Rxns

存储温度:-20℃

品牌：lucigen / epicentre

供应商：中北林格

产地：us

发货地：北京</p

产品描述

epicentre MV41025 MiniV™ In Vitro Transcription Kit 应用领域

由与噬菌体N4启动子连接的ssDNA合成RNA。

MiniV™ 体外转录试剂盒提供MiniV™RNA聚合酶*（MiniV RNAP）和所有其他组件，可使用与单链噬菌体N4启动子功能连接的ssDNA模板进行RNA 体外转录。MiniV RNAP是N4病毒粒子RNA聚合酶的转录活性1,106个氨基酸结构域。1 与衍生N4病毒粒子的酶一样，MiniV RNAP保留了转录具有单链N4启动子的ssDNA模板的独特能力。

由于MiniV RNAP在RNA：DNA杂种上缺乏RNA链置换或解链活性，因此它需要 大肠杆菌 单链结合（EcoSSB）蛋白来从DNA模板链置换RNA转录本，以进行有效 的体外 转录。EcoSSB激活的置换量似乎随模板链的总长度和转录本的长度而变化。2 MiniV RNAP的RNA合成也需要NTP和Mg 2+。

可以转录包含合适的N4启动子的任何长度的线性模板。尽管MiniV 体外转录反应产生的RNA产量取决于模板的序列，但通常每摩尔线性ssDNA模板产生1-5摩尔RNA。像其他RNA聚合酶一样，MiniV RNAP也可以通过旋转环状ssDNA模板（例如，使用CircLigase™ssDNA连接酶生产的环状模板）的圆环转录来合成同形的RNA。

MiniV RNAP使用的噬菌体N4转录启动子的特征是保守序列和5 bp茎，3碱基环发夹结构。3,4

epicentre MV41025 MiniV™ In Vitro Transcription Kit 图例说明

图1.单链DNA寡核苷酸模板的MiniV™转录。 将含有噬菌体N4 P2启动子序列的71 nt单链寡聚脱氧核苷酸模板在标准100微升含100 pmol MiniV RNA聚合酶，0.75 mM NTP和20 ng /μl的20微升反应中于37°C转录1小时。的SSB蛋白。反应产物可视化与SYBR®金染色的20％丙烯酰胺-8M尿素变性凝胶。泳道1，基于71个碱基的单链寡核苷酸模板（MiniV Kit中提供的对照模板）；泳道2，预期的43个碱基的RNA转录物产生。

P1 3´;-CAACGAAGCGTTGAATACC -5´;
P2 3´;-TTCTTCGAGGCGAAGAAAACC -5´;
P3 3´;-CGACGAGGCGTCGAAAACC-5´;

图2A。被N4 MiniV™RNA聚合酶识别的启动子。 启动子P2是这三个中Z具特色的，建议用于构建自己的MiniV转录单链DNA模板的启动子。

3´-.... TTCTTCGAG GCGAAGAAAA	抄送	..... --5´ DNA模板
+1
5´-	G	..... -3´ RNA转录本

图2B。从含有噬菌体N4的P2启动子的单链DNA模板转录RNA。

References

Kazmierczak, K.M., et al. (2002) EMBO J., 21, 5815.
Davydova, E.K. and Rothman-Denes, L.B. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 100, 9250.
Haynes, L.L. and Rothman-Denes, L.B. (1985) Cell 41, 597.
Glucksmann, M.A. et al. (1992) Cell 70, 491.

*Covered by issued and/or pending patents.

货号	尺寸

MiniV™ 体外转录试剂盒
MV41025	25反应
内容物： MiniV™RNA聚合酶（包含RNaseYZ剂），MiniV™5X转录缓冲液，大肠杆菌单链DNA结合蛋白，10 mM ATP，CTP，GTP和UTP溶液，DTT，无RNase的水，MiniV™Control ssDNA模板，无RNase的DNaseI。

Catalog No.	Size

MiniV™ In Vitro Transcription Kit
MV41025	25 Reactions
Contents: MiniV™ RNA Polymerase (contains an RNase inhibitor), MiniV™ 5X Transcription Buffer, E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein, 10 mM ATP, CTP, GTP and UTP Solutions, DTT, RNase-Free Water, MiniV™ Control ssDNA Template, RNase-Free DNase I.