大鼠Ⅱ型胶原(COL2)elisa试剂盒实验原理

　　大鼠Ⅱ型胶原(COL2)elisa试剂盒实验原理

　　大鼠Ⅱ型胶原(COL2)elisa测定试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)。往预先包被大鼠Ⅱ型胶原(COL2)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠Ⅱ型胶原(COL2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值)，计算样品浓度。

　　大鼠Ⅱ型胶原(COL2)elisa测定试剂盒产品优势

　　1、优点明显 众所周知产品具有灵敏度高、特异性强的特点决定的产品好坏，我司产品具有稳定的重复性，吸附性能好,空白值低，并适用于血清血浆 组织匀浆等多种样本类型的检测，方法简单，操作方便，限度的节省了实验经费。

　　2、品质保障 产品保证质量，出库质检把控严格，保障提供给客户的100%是优质产品，运输全程跟踪，公司承诺有任何质量问题包退换，诚信经营，合作共赢。我们提供实验室试剂、耗材一站式供应服务，高品质，进口品牌全线代理，优势的渠道，我们只做行货，不用担心质量问题。售后技术支持到底!

　　3、专业定制 应市场需求公司特推出专业定制酶联免疫分析试剂盒服务，全程有专业的技术老师跟踪并和客户保持沟通，直到定制成功为止。

　　4、免费代测 公司承诺订购酶联免疫分析试剂盒，享全程技术指导并可免费代测，为您分忧。全程有专业技术老师负责代测，收到样本一般7个工作日出结果。

　　5、服务周到 设立售后服务中心，24小时及时响应，真正做到后顾无忧，不断完善服务体系。

　　三、大鼠Ⅱ型胶原(COL2)elisa试剂盒标本要求

　　1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

　　2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

　　3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

　　4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

　　6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能人上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

　　7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

　　大鼠Ⅱ型胶原(COL2)elisa试剂盒操作流程

　　1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

　　3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

　　4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

　　6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　大鼠Ⅱ型胶原(COL2)elisa试剂盒注意事项

　　1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

　　2.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

　　3.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔di一孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。

　　4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　5.底物请避光保存。

　　6.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

　　7.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

　　8.本试剂不同批号组分不得混用。

　　10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

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