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血液里流淌着美式还是奶茶?离心一下就知道了

发布:艾本德中国 Eppendorf China
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电影《侏罗纪公园》的诞生来自于一滴远古的血液;家财万贯的富翁试图通过换血来永葆青春;科学家试图通过血液中的各种 DNA、代谢产物来探索人体的免疫反应……(*小 E 温馨提醒:参加文末有奖互动,即有机会获得超高人气移液器笔,千万不要错过哦~)


而从大荧幕回归到现实的临床科研,科研人员面临的血液难题则要基础并琐碎很多。首先,研究的对象不同,所需的样本就更加不同……


在免疫实验中会用到的三大血液样品有:全血、血浆、血清,它们之间有着很大的不同。

全血,包含血液中的所有细胞、蛋白质和其他元素。可用于血浆蛋白质分析、凝血因子研究等,例如免疫沉淀、蛋白质测定、凝血时间测定。

血浆是全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,获得的不含细胞成分的液体。含有纤维蛋白原、凝血因子等。在基础科研中,小鼠的血浆常用来检测特定蛋白分子,如凝血因子。

血清是全血未经过抗凝处理,血凝块聚缩释出的液体。其中没有纤维蛋白原和凝血因子。小鼠的血清样本,常在实验中被用来检测炎性因子如 TNF-α、IL-6 和 IFN-γ。

(??左右??滑动可查看更多)


为了进一步获取不同组分,我们通常用离心来分离血浆和血清。


离心分离

通常离心条件为 4 ℃,RCF 800 xg,离心时间为 10~15min。

在分离过程中需要注意:

▲ 血样不可剧烈摇晃以免溶血

▲ 尽量选择降温速度快的离心机,可以减少样品操作等待时间

▲ 选择缓慢制动或无制动的离心机,可以防止重悬、防止红细胞破裂等

▲ 推荐使用水平转子,使沉淀尽可能堆积在管底,可以获得更纯净的上清


如果实验室有分离血液的需求,那么小 E 为大家推荐 5702 系列低速离心机,可以充分满足以上注意事项。


5702 系列低速离心机




5702 拥有 FastTemp 快速预冷功能、可以最大程度上保持实验样品的活性。此外,实验对象的采血量可能会有所不同,对应就会使用到 2 mL、10 mL、15 mL  等多规格离心管。5702 系列离心机的水平转子有多种适配器可以选择,还可配置多达 6 种不同转子满足不同规格容器的离心需求,让不同体积血液样本,都有自己的「归属感」,顺利完成分离。

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在血液研究中,还有一种要求很高的离心,那就是 PBMC 外周血分离获得特定免疫细胞。


这个方法对离心机的性能要求格外的高,需要缓慢升速和缓慢降速,才能获取清晰的特定免疫细胞层。如果没有达到特定的离心效果,那么分离出来的产物很有可能如下方的左图一样,糊作一团。

图左:使用5702离心机,开启制动功能

图右:使用 5702 离心机,开启 Soft 软刹车功能


当我们在分离 PBMC 外周血时,可以开启 5702  离心机的 Soft 软刹车功能,既快速又柔和地获得清晰的分层离心效果。


分离后的样品该如何

准确移取?

完成离心之后,处理血液样本的另一个难题就是:血清和血浆都较为粘稠,常规的移液操作方式可能会移取困难,在进行手动移液器操作时可以注意以下几点:

▲ 吸取前可先吸放几次液体以润湿吸头,再缓慢吸液

▲ 吸上粘性大的血液样本溶液后可稍作停留后再离开液面

▲ 也可尝试使用反向移液操作


人工的移液操作固然简单,但电动器械在处理问题液体时显得更香了。


Xplorer 电动移液器




小 E 家 的 Xplorer 电动移液器自带反向移液功能,且吸放液速度可调,可以实现匀速缓慢吸放液,可避免人为操作造成的误差。同时,电机马达驱动吸放液操作又可以很好地减轻手部操作用力,是血液分离实验的更优选择

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Multipette E3/E3x 电动分液器




为了进一步解决粘稠液体移取不精准、放液起泡的问题,小 E 家的Multipette E3/E3x 电动分液器,通过外置活塞原理,可以轻松且高精准地移取粘度大的液体。配合密封良好的分液管耗材,再加上电动操作的加持,可以大大缓解样品操作带来的疲劳感,也可以有效避免实验污染,是高精准度多样品处理的好搭档。

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移液的小技巧和离心时要注意的事项,小E 都已经分享给大家了。

想通过优化离心条件来进行 PBMC 外周血分离的小伙伴,可以点击下方下载血清分离「宝典」,获得更细致的实验指导。

点击此处下载


文末互动


欢迎各位伙伴留言说说自己在做免疫实验时处理血液样品的经验。我们将在评论区随机抽取 5 位小伙伴,并送上精美定制移液器笔盲盒(内含一支颜色随机的移液器笔和一支实验室用油性笔)。


评论留言截至时间:3 月 14 日 18:00


2024-03-07
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