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采用亲和色谱柱TSKgel Boronate-5PW测定单抗糖化比例
发布:东曹(上海)生物科技有限公司浏览次数:31单抗的糖化修饰会影响电荷异质性、安全性、稳定性和聚集体的产生,某些关键点位上的还可能会影响其生物学活性,因此有必要对单抗的糖化位点的表征和比列进行测定。
抗体糖化分析一般采用硼酸亲和色谱(BAC)。本篇应用是采用TSKgel Boronate-5PW亲和色谱柱分别对贝伐珠、利妥昔、曲妥珠这3种单抗样品的糖化比例进行了测定。
1、贝伐珠单抗糖化比列的测定 图1 贝伐珠单抗硼酸亲和色谱谱图
表1 贝伐珠单抗糖化比例测试数据
2、利妥昔单抗糖化比列的测定 图2 利妥昔单抗硼酸亲和色谱谱图
表2 利妥昔单抗糖化比例测试数据
3、曲妥珠单抗糖化比列的测定 图3 曲妥珠单抗硼酸亲和色谱谱图
表3 曲妥珠单抗糖化比例测试数据
结果与讨论 采用TSKgel Boronate-5PW色谱柱建立了3种单抗糖化组分测定方法,测试结果表明:贝伐珠单抗样品中有5.1%的糖化组分;利妥昔单抗样品中有9.4%的糖化组分;曲妥珠单抗样品中有1.4%的糖化组分。该方法可用于单抗糖化比例的检测和组分的收集。
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