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VEB-3型与VEB-1型超广谱-内酰胺酶生化特性的比较
发布:上海光谱仪器有限公司浏览次数:2245摘要 目的 研究VEB-3型超广谱-内酰胺酶(ESBL)的生化特性,并与VEB-1型ESBL进行比较方法 将blaVEB-3和blaVEB-1基因连接至pET28a载体上,并用重组质粒转化大肠埃希菌BL21进行克隆表达,分别挑选blaVEB-3或blaVEB-1阳性表达的菌落测定-内酰胺类抗生素对其ZdiYJ浓度(MIC),同时提取酶蛋白进行等电点和酶动力学分析 结果 VEB-3和VEB-1型ESBL具有基本一致MIC和相同的等电点(pI 7.45),但两者的酶动力学性质存在一定的差异:对头孢他啶和头孢噻肟,VEB-3较VEB-1表现出更高的亲和力,两者Km相差一倍左右;对头孢噻吩,VEB-1比VEB-3更具亲和力;而对阿莫西林,VEB-1型ESBL表现出很高的亲和力,而VEB-3仅有低的亲和力,两者Km相差20多倍 结论 VEB-3和VEB-1型ESBL具有相同的等电点,不同的动力学参数,blaVEB-1基因中Leu56 Phe突变可能导致了两者酶动力学性质的差异 关键词 -内酰胺酶 等电点 酶动力学 紫外-可见分光光度计
2005-07-31相关仪器 -
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