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困难样本难扩增?Platinum SuperFi II高保真PCR酶全搞定
发布:赛默飞世尔科技生命科学产品浏览次数:410GC含量太高扩不出?
长片段靶标难扩增?
DNA浓度太低P不出来?
DNA模板纯度太低?
各种困难样本困扰PCR实验?
Invitrogen? Platinum? SuperFi II DNA聚合酶来解忧。
产品特点:
超高保真度
保真度高出 Taq 酶 300 倍以上
扩增效率高
高效扩增困难样本,如高GC含量、长片段、纯度不佳的样本
简化实验流程
60°C通用退火温度,不同PCR反应可以同时进行扩增
特异性强
抗体热启动技术,确保高特异性扩增,更适用于高通量自动化和多重PCR
操作方便
即用型预混液,室温加样,操作简便,还有绿色预混液直接上样电泳
高GC/AT含量模板的扩增
使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可扩增高达77% GC含量的模板,无需添加Enhancer。
图1. 使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶,从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出 15 个具有不同 GC 含量的靶标,不添加任何有助于 DNA 变性的添加剂。
使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶扩增AT含量75%-90%的模板。
图2. 在ProFlex PCR系统上,使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶从金黄色葡萄球菌gDNA中扩增出AT含量为75 ~ 90%的靶标。
含有PCR抑制剂的模板扩增
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶经基因工程设计包含一个 DNA 结合域,扩增能力增强,从而可耐受常见 PCR 抑制剂,如腐殖酸 (土壤)、氯化血红素 (红细胞成分)、胆汁盐 (血液和粪便) 等。
图3. 使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶和其他高保真 DNA 聚合酶从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出 2 kb 人类基因组 DNA 片段。1—无抑制剂,2—腐植酸 (4 μg/mL),3—血红素 (20 μM),4—胆汁盐 (1 mg/mL)。
低丰度DNA模板的扩增
Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的高灵敏度可以实现低丰度 DNA 模板的检测,并获得准确的扩增结果。在起始材料有限或样品中目标 DNA 浓度较低的实验中,DNA聚合酶的高灵敏度是非常有利的。
图4. 使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶和其他高保真 DNA 聚合酶分别从 0.4 ng、2 ng、10 ng、50 ng 和 250 ng 人基因组 DNA 中扩增一个 2 kb 的片段。
长片段 PCR 扩增
由于其高持续合成能力和极低的错配率,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶是准确扩增长片段 (长达 20 kb) 的理想选择,经过体系优化还可扩增长达40 kb的靶标。
图5. 使用Platinum SuperFi II DNA 聚合酶从 200 ng 人类基因组 DNA 中成功扩增出 20 kb 的靶标,从 50 ng 的大肠杆菌基因组 DNA 中成功扩增出 30 kb 的靶标和 40 kb 的靶标。
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