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试剂盒的步骤
发布:上海酶联生物科技有限公司浏览次数:272很多人在做检测的时候,都不太在意ELISA试剂盒中的说明书上的检测步骤,觉得自己都知道,都懂的。但就是因为这种心态,所以造成有时候的检测结果出现失误。生物检测本来就是个很严肃并且严谨的事情,你的一个小的疏忽可能就会造成意想不到的错误。
正确的使用ELISA试剂盒的步骤:
1.在使用之前要将试剂充分的混合均匀,但是要注意在摇晃的时候不要产生过多的泡沫,从而造成有太多的空气进入试剂中,产生测试误差。
2.根据要检测样品的数量来确定的板条数。每个比对的样品和空白孔**是做复孔,而样品的数量就可以自己视情况而定,不过能用复孔的**还是用复孔。将标本液体1:1稀释后倒入50微升的反应孔中。
3.在反应孔中在加入50微升的待测样品,然后马上加入50微升的生物素标记抗体,盖上模板,轻轻摇晃使其混合均匀后,在37摄氏度的恒温下等待1小时。
4.将孔内液体甩去,加满洗涤液,震荡约30秒后,在甩去洗涤的液体,用纸将水吸干。这样子重复三次。再在没空加入80微升的亲和链酶素-HRP,同上混合均匀后,在37摄氏度的恒温环境下等待半小时。
5.同步骤四的洗涤方法。洗涤干净后,在没空中加入底物A,B各50微升,小心混合均匀,避免光照在37摄氏度下等待10分钟。
6.取出酶标板,迅速加入终止液50微升,测定结果。在450纳米的波长处检测各个孔的OD值。
2016-04-28 -
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