GB 5009.263-2016 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定 解决方案

当前，食品中阿斯巴甜致癌性问题受到广泛关注，成为国际热点新闻之一。近日其评估结果已经正式发布，国家食品安全评估中心联合国家癌症中心对评估结果做了解释说明。小编今天再为大家梳理下有关阿斯巴甜的知识点。

问

一、阿斯巴甜是什么？

答

      阿斯巴甜化学名称为天门冬酰苯 丙胺酸甲酯，作为一种最常见的人工代糖甜味剂，自20世纪80年代以来广泛用于各种食品和饮料产品中，是国际食品法典委员会（CAC）及多个国家批准合法使用的食品添加剂。根据我国标准《GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》，阿斯巴甜作为甜味剂可以用于面包、糕点、饼干、饮料、调味品等食品中。同时，阿斯巴甜作为相对低端的人工甜味剂，食品行业内的众多企业已经逐步使用安全风险更小的天然甜味剂取代人工甜味剂。

问

二、阿斯巴甜是否致癌？

答

      2023年5月，世界卫生组织（WHO）发布的非糖甜味剂指南中便建议避免食用安赛蜜、阿斯巴甜、糖精、三氯蔗糖、甜菊糖等非糖甜味剂。7月14日，WHO下属跨政府机构国际癌症研究中心（IARC）在世卫官网正式公布了一项关于阿斯巴甜的最 新健康评估结果，报告中称基于阿斯巴甜具有人类致癌性的“有限证据”，将阿斯巴甜归类为IARC 2B类致癌物。具体来说，虽然有研究表明摄入阿斯巴甜可能和罹患肝细胞癌有关，但是在对人类和实验动物癌症及致癌机制方面均没有令人信服的证据，以佐证阿斯巴甜与人类癌症之间存在确切的相关性。

      致癌物质的致癌风险通常由两个因素决定。其一是致癌能力，IARC主要依据人类流行病学调查和病例报告、动物试验和生物学机制研究等，将致癌证据强度分为1类，2A、2B类和3类（其中1类具有人类致癌性，2A类对人类很可能致癌、2B类对人类可能致癌但缺乏充分科学证据，3类为尚无法分类）；另一因素是暴露水平，指人体实际摄入或接触该有害物质量的多少。IARC将阿斯巴甜列为2B类可能致癌物，说明其对人类致癌性的科学证据尚不充分，需进一步研究考证。通过对其用量进行控制管理，能够保障其使用的安全性。

问

三、阿斯巴甜的可接受每日摄入量是多少？

答 

       食品添加剂联合专家委员会（JECFA）称“维持阿斯巴甜原风险评估结论，按照目前剂量和范围使用，不会对消费者产生健康危害”。评估报告中重申了阿斯巴甜每日每公斤体重40毫克的可接受每日摄入量，一个人每天的阿斯巴甜消费量在这个限度内是安全的。

       我国国家食品安全风险评估中心结合此项最 新评估结果和我国居民消费情况进行安全性评估表明，阿斯巴甜按照我国现行标准规范使用可以保障安全。国标《GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中规定可乐型碳酸饮料中阿斯巴甜的限值是0.6g/kg，我们按照限值标准的最 高含量计算，一个体重50公斤的成年人，粗略估算每天饮用7瓶500mL的无糖可乐会超过安全摄入量，需要注意下这个推算只是粗略估算，我们日常生活中除了无糖可乐还有很多食品含有阿斯巴甜。但总体而言，大家只要做到合理膳食，健康饮食，便可不必过分担心。

问

四、食品中阿斯巴甜如何检测？

答

       安谱实验积极关注食品安全问题，参照《GB 5009.263-2016 食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》检测方法，使用Athena C18 液相色谱柱，对无糖可乐（可乐型碳酸饮料）、乳酸饮品（含乳饮料）、果冻（果冻类）、话梅（蜜饯类）、薯片（膨化食品）和口香糖（胶基糖果）的六种不同类型食品基质中阿斯巴甜和阿力甜含量进行检测，外标法进行定量，结果表明此方法操作简便，回收率高，符合检测要求。

食品中阿斯巴甜和阿力甜

检测的完整解决方案如下

1、标准溶液配置

1.1 标准品

1.2 标准曲线：

      阿斯巴甜和阿力甜混合标准工作液系列的制备：将阿斯巴甜和阿力甜标准储备液用水逐级稀释成混合标准系列，阿斯巴甜和阿力甜的浓度均分别为100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10.0 μg/mL、5.0 μg/mL的标准使用溶液系列。置于4℃左右的冰箱保存，有效期为30 d。

注意事项

① 标准中标准曲线的线性范围为5-100 μg/mL，实际样品检测时可能某些样品含量偏低，不在线性范围内，建议可以根据样品含量改变标准曲线的浓度，以保证样品含量结果在标准曲线的范围内。

2、前处理操作

2.1 样品前处理

       无糖可乐（可乐型碳酸饮料）：称取约5 g(精确到0.001 g)碳酸饮料试样于50 mL烧杯中，在50℃水浴上除去二氧化碳，然后将试样全部转入25 mL容量瓶中，用水定容，混匀，4000 r/min离心5 min，上清液经0.45 μm PTFE针式滤器过滤后用于色谱分析。

        乳酸饮品（含乳饮料）：分别称取约5 g试样(精确到0.001g)于50 mL离心管，加入10 mL乙醇，盖上盖子，首先轻轻上下颠倒离心管5次（不能振摇），然后静置1 min，4000 r/min离心5 min，上清液滤入25 mL容量瓶，沉淀用8 mL乙醇-水(2:1)洗涤，离心后上清液转移入同一25 mL容量瓶，用乙醇-水(2:1)定容，经0.45 μm PTFE针式滤器过滤后用于色谱分析。

       果冻（果冻类）：用玻棒搅匀后称取约5 g(精确到0.001g)制备均匀的果冻试样于50 mL的比色管中，加入25 mL 80%的甲醇水溶液，在70 ℃的水浴上加热10 min，取出比色管，趁热将提取液转入50 mL容量瓶，再用15 mL 80%的甲醇水溶液分两次清洗比色管，并每次振摇约10 s，并转入同一个50 mL的容量瓶，冷却至室温，用80%的甲醇水溶液定容到刻度，混匀，4000 r/min离心5 min，将上清液经0.45 μm PTFE针式滤器过滤后用于色谱分析。

       话梅（蜜饯类）：用食品加工机按试样与水的质量比为1:2进行匀浆，称取约3 g(精确到0.001g)匀浆试样于25 mL的离心管中，然后向离心管加入10 mL 60%的甲醇水溶液，摇匀，超声10 min，4000 r/min离心5 min，上清液转入25 mL容量瓶，再加10 mL 50%的甲醇水溶液重复操作一次，上清液转入同一个25 mL容量瓶，最 后用50%的甲醇水溶液定容，经0.45 μm PTFE针式滤器过滤后用于色谱分析。

       薯片（膨化食品）：试样需要用食品加工机进行均匀粉碎，称取5 g(精确到0.001g)粉碎试样于50 mL离心管中，加入12 mL 50%甲醇水溶液，涡旋混匀，超声振荡提取10 min，4000 r/min离心5 min，上清液转移入25 mL容量瓶中，再加10 mL 50%甲醇水溶液，涡旋混匀，超声振荡提取5 min，4000 r/min离心5 min，上清液转入同一25 mL容量瓶中，用蒸馏水定容，经0.45 μm PTFE针式滤器过滤后用于色谱分析。

       口香糖（胶基糖果）：用剪刀将胶基糖果剪成细条状，称取约3 g(精确到0.001g)剪细的胶基糖果试样，转入100 mL的分液漏斗中，加入25 mL水剧烈振摇约1 min，再加入30 mL 正己烷，继续振摇直至口香糖全部溶解(约5 min)，静置分层约5 min，取下层水相4,000 r/min离心3min后，取水相放入50 mL容量瓶，然后加入10 mL水到分液漏斗，轻轻振摇约10 s，静置分层约1 min，再将下层水相放入同一容量瓶中，再加入10 mL水重复1次操作，最 后用水定容至刻度，摇匀后稀释十倍，过0.45 μm PTFE针式滤器过滤后用于色谱分析。

注意事项

① 实际样品检测过程中，如样品含量偏低，可进行称样量的增加或定容体积的减小；如样品含量偏高，可进行称样量的减小或定容体积的增加。

② 本实验中，薯片样品进行了称样量的增加，口香糖样品进行定容液的稀释，以满足方法适用性。

③ 检测前需确认液相色谱柱的柱效情况，以避免由柱效原因导致的鬼峰、峰漂移和峰形差等问题，从而干扰目标物识别，影响实验结果。

④ 建议每批样品检测均需进行方法空白检测，验证是否有本底影响。

⑤ 当待测基质样品中杂质较多（如蜜饯类）时，在满足要求下，建议可将待检样品进行适当稀释后再进行色谱分析。

⑥ 胶基糖果基质中可能存在特别添加的“薄荷因子”等无法完全溶解部分，故在实际实验开展中需对提取溶液进行离心去除不溶物后，取上层水相定容进行分析检测。

3、仪器条件

3.1 液相色谱：

a) Athena C18 液相色谱柱（4.6 mm*250 mm，5.0 μm，货号：LAEQ-462571）；

b)柱温：30℃

c)流速：0.80 mL/min

d)进样量：20 µL；

f)流动相：乙腈-水（20:80）/甲醇-水（40:60）；

g)紫外检测波长：200 nm。

4、实验谱图

图4-1 不同流动相下混合标准溶液（10.0 μg/mL）谱图

注：左边谱图流动相为乙腈-水（20:80），右边谱图流动相为甲醇-水（40:60）

图4-2 六种基质样品本底检测实验谱图

图4-3 六种基质样品加标实验谱图

5、实验数据

5.1 标准曲线：

5.2 基质空白数据：

表5-1  六种基质样品本底检测结果

注：“N.D”表示未检出，蜜饯类样品的方法定量限为0.015 g/kg；“/”表示无对应限值。

5.3 加标回收率数据：

表5-2  六种基质样品加标实验回收率

注：样品加标回收率实验中因样品本底含量等原因采用了降低称样量或改变定容体积等操作。

6、实验结论

安谱实验采用《GB 5009.263-2016食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》，通过液相色谱系统检测食品中阿斯巴甜和阿力甜添加量情况。外标法测试阿斯巴甜和阿力甜在0.1 μg/mL-100 μg/mL浓度范围内标准曲线线性方程R2 > 0.999，线性良好。在六种不同类型基质中均未检测到阿力甜，除蜜饯类样品外五种基质中均检测到不同含量的阿斯巴甜，但均满足《GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》在品种使用范围内的使用量要求。针对不同基质在样品适当加标水平下，阿斯巴甜和阿力甜的加标回收率均在80%-110%范围之间，满足标准要求。

7、产品信息