特色方案｜黄连中盐酸小檗碱的测定

1. 提取

准确称取黄连0.5 g，加入25 mL水，加热煮沸10 min（注意防止烧干），冷却至室温，过滤并收集过滤液；用25 mL水淋洗提取物并收集淋洗液；合并过滤液与淋洗液并用水定容至50 mL；取5 mL定容液并用水稀释至50 mL；最 后，取5 mL稀释液，待净化。

2. 净化

SHIMSEN Styra HLB

60 mg / 3 mL

（货号：380-00855-03）

（1）活化：依次向小柱中加入3mL甲醇、3mL水，弃去流出液；

（2）上样：向小柱中加入5mL待净化液（流速控制在1mL/min），弃去流出液；

（3）清洗：向小柱中加入3 mL 15 %甲醇水溶液（流速控制在1mL/min），弃去流出液，于负压装置（货号：RT-26077）中将小柱抽干；

（4）洗脱：向小柱中加入3mL甲醇溶液洗脱（流速控制在1mL/min），收集流出液；

（5）重新溶解：流出液于50℃下氮吹至近干，用甲醇定容至1mL，涡旋1min，待检测。

附：参考方法

一、 分析方法

1、色谱条件

色谱柱：

ShimNex CS C18

5 μm，250 × 4.6 mm

（货号：380-01230-01）

流  速：1.0 mL/min   

进样量：对照品溶液5 μL/供试品溶液10 μL  

柱  温：40 ℃

检测波长：265 nm

流动相：乙腈：水=1：1（每1000 mL中加入磷酸二氢钾3.4 g和十二烷基硫酸钠1.7 g）

二、实验结果

1、对照品溶液色谱图（100 μg/mL）

2. 黄连中盐酸小檗碱的添加回收结果（20.0 mg/kg）