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PCR技术的发展及其与离心机的联系
发布:莱普特科学仪器(北京)有限公司浏览次数:16PCR技术与离心机的关系可以说是密不可分的。
自20世纪80年代中期以来,聚合酶链式反应(Polymase Chain Reaction,PCR)一直是体外核酸扩增技术发展起来的技术。
由于其具有特异性、灵敏性、产量高、快速、简单、重复性好、易于自动化等诸多突出优点,被称为当时医学生物学领域的一项革命性创举和里程碑。
查阅相关资料后得知,人类对核酸的研究已有100多年的历史。 从20世纪60年代末到70年代初,人们致力于体外基因分离技术的研究。
Korana于1971年首次提出体外核酸扩增的想法,并由Mullis等人实现。 1985年,他们发明了划时代的聚合酶链式反应。 其原理与DNA的体内复制相似,不同之处在于它为试管中DNA的体外合成提供了合适的条件:模板DNA、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、适当的缓冲系统、DNA变性、复性和延伸。 温度、时间等。
然而,Mullis最初使用的DNA聚合酶是Klenw酶,它不耐高温,在90℃就会变性失活。 每个循环都必须重新添加,其体外扩增保真度较差,使得PCR技术在一段时间内效率低下。 它未能引起生物医学界足够的关注。 直到 1988 年,Saiki 等人才提出。 从嗜热杆菌(hemus Aquaticus)中提取出耐热DNA聚合酶(命名为TaqDNA聚合酶),PCR技术得到广泛应用。
PCR技术模拟DNA的自然复制过程,其特异性依赖于与目标序列两端互补的寡核苷酸引物。 这一原理主要包括三个基本反应过程:变性——退火——延伸。 变性主要指双链DNA的变性。 即当双链DNA加热到93℃左右时,其热稳定性降低,配对碱基之间的氢键断裂,使双链DNA变成单链,以便与引物结合。 退火是指当温度降低时,单链DNA与引物发生复性(称为退火)。 在此过程中,引物和单链DNA模板仍然以碱基互补的方式配对。 延伸是指引物与DNA模板按照碱基互补的原则配对后,在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,在体外进行半保守复制,合成一条互补的新链到模板 DNA 链。
经过变性-退火-延伸的反复循环,可以获得更多的“半保留复制链”,这条新链可以成为下一个循环的模板。 每个循环完成后,需要2至4分钟和2至3小时才能将目标基因扩增数百万倍。
可见PCR技术相当复杂。 除了推进实验技术之外,人们也在努力让实验技术更加成熟。 那么如何才能实现呢? 答案是利用仪器。 每个实验所需的实验仪器都需要更加准确并适合于此。 只有这样才能进一步提高实验效率。
例如,核酸检测需要使用核酸检测离心机。
通过专业离心机生产厂家上海陆相仪离心仪器有限公司,我们可以了解到:
核酸检测在 PCR 实验室进行。 核酸是生物体内的高分子化合物,包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA,广泛存在于所有动物、植物、微生物和生物体中。 核酸是基本遗传物质,在生长、遗传、突变等一系列重大生命现象中起着决定性作用。 核酸检测离心机的检测对于肿瘤的发生、病毒感染以及辐射对人体的影响等具有重要的临床意义。
2024-03-11相关仪器 -
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