动物组织、内脏中青霉素类药物的测定

净化：ProElut PLS 500 mg/6 mL (Cat.#68005)

1、提取 5 g 样品与20 mL 90% 乙腈水溶液混合，10000 rpm 下均质2 min，4000 rpm 下离心5 min，收集上清液，向沉淀加入10 mL 90% 乙腈水溶液重复提取一次，合并提取液。35 oC 下减压蒸馏除去提取液中的乙腈，然后向剩余的水相中加入20 mL 磷酸盐缓冲液*，并用0.1 mol/L NaOH 溶液调节pH 8.5， 混匀，待净化。

注：0.05 mol/L 磷酸氢二钾溶液，pH 8.5

2、净化

a 活化： 将6 mL 甲醇、6 mL 水依次加入ProElut PLS 500 mg/6 mL (Cat.#68005)，流出液弃去；

b 上样： 将待净化的样品液加入柱中*，流出液弃去；

c 淋洗： 依次用3 mL 磷酸盐缓冲液*、3 mL 水淋洗，淋洗液弃去，并将PLS 柱抽干；

d 洗脱： 用6 mL 乙腈洗脱，收集洗脱液；

e 重新溶解：35 oC 下将洗脱液用氮气吹干，然后用磷酸盐缓冲溶液* 定容至1 mL，微孔滤膜过滤后，LC-MS/MS 分析

注： 由于样品量较大，需分次加样或在小柱上连接60 mL 储液管 (Cat.#4811)，适配器 (Cat.#4803) c 中使用的磷酸缓冲溶液为0.05 mol/L 磷酸氢二钾溶液，pH 8.5， e 中使用的磷酸缓冲盐为0.05 mol/L 磷酸氢二钾溶液，pH 7.0

流动相：缓冲溶液+ 乙腈，梯度 流速：1.0 mL/min 进样量：20 μL 柱温：30 oC 检测器：串联质谱，ESI+，MRM 模式监测

适用于禽类、畜类组织和内脏中青霉素类药检测

1. 羟氨苄青霉素； 2. 氨苄青霉素； 3. 甲氧苯青霉素； 4. 苄青霉素； 5. 苯氧甲基青霉素； 6. 苯唑青霉素； 7. 苯氧乙基青霉素； 8. 邻氯青霉素； 9. 乙氧萘青霉素