热点应用丨天美赛里安液相UV/DAD方案测定食品中维生素B12

前言

维生素 B12 与食物中的蛋白质有关。在摄取之后，胃内的盐酸会分离出其中的维生素 B12，随后，维生素 B12 会与一种名为内因子 (intrinsic factor) 的化合物结合，以便被肠道吸收。由于可以促进新细胞生成、细胞维护以及 DNA 合成，维生素 B12 对人体健康至关重要。

国家市场监督管理总局、国家卫生健康委员会联合发布了GB 5009.285-2022《食品中维生素B12的测定》等新标准，新国标于2022年12月30日实施。新标也扩大了维生素B12检测的适用范围，不仅适用于婴幼儿食品、乳及乳制品的检测，还可适用于肉、肉制品、食谷物、烘焙食品、果冻、饮料等样品基质的检测，检测基质的扩展，样品基质更复杂，目标物含量更低，采用液相色谱法测定维生素B12，婴幼儿食品和乳品、肉与肉制品的检出限为0.2μg/100g，定量限为0.5μg/100g。

实验部分

仪器

采用包含以下模块的赛里安LC6000高效液相色谱仪系统：

· 集成六通道真空脱气的SCION LC6100四元泵

· SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器

· SCION LC6310 柱温箱

· SCION LC6410 紫外检测器/ SCION LC6430二极管阵列检测器

液相色谱条件

表1 方法参数

试剂及标准品

三氟乙酸溶液（CAS: 76-05-1）, 乙腈溶液(HPLC级), 维生素B12 (产品批号：S074085）

结果

示例图谱

图1 维生素B12 200ng/ml示例色谱图

图2 维生素B12 3D紫外吸收全谱图（190nm-400nm）

标准曲线

将维生素B12标准溶液依次稀释为30、60、90、150、200ng/ml，使用外标法进行标准定量 ，以浓度为横坐标峰面积为纵坐标作外标工作曲线 ；维生素B12响应值和浓度呈良好的线性关系，所得到的相关系数在0 .9999以上，详见图3。

图3 维生素B12标准曲线

重现性

维生素B12峰面积RSD%1.18（n=6），保留时间RSD%0.30（n=6）结果见表2

表2 维生素B12定量定性

检出限

维生素B12检出限为10ng/ml，维生素B12最小检出限见图4

图4 维生素B12最小检出限

结论

本应用使用带有紫外检测器/二极管阵列检测器和反相 C18色谱柱的赛里安LC6000快速分析食品中的维生素B12的方法，该方法配置合理、线性良好、灵敏度高可以满足并优于国家标准GB 5009.285-2022食品中维生素B12的测定方法。