高通量液相色谱中进样的注意事项

        近年来，为减少分析时间和提高分析通量而诞生的超高效液相色谱技术取得了令人瞩目的发展。超高效液相色谱仪器能够承受更高系统压力和流速，并且分析速度和效率大大提升；检测器模块的改进和新的数据处理算法也有效提升信号采集的速率；现代色谱柱技术的发展，即使是很短的柱长也能提供足够高效色谱分离效率，比如恒谱生液相色谱柱有30、50、75、100、150、200、250和300mm等多种长度。高效的分离技术归功于液相硅胶色谱填料，通过恒谱生的先进的技术处理，金属含量极低的99.9%超高纯度球型多孔硅胶在孔径、孔体积、比表面积、碳含量、金属离子含量、峰型对称度等都有统一管理和质量保障。

        对液相色谱技术的研究有许多方向，其中提高通量是能够提升液相色谱分析速率的重要研究方向。在标准仪器操作模式下，自动进样器序列发生在每次进样之前。该顺序通常包括将针头移至指定的样品瓶位置、取样、移回进样器阀以及一系列针头清洗以减少样品残留。这种方法有很多限制和操作步骤，可能会增加仪器循环时间，从而降低整体分析通量。

        这里介绍一下多次进样技术，同步进样循环样品制备的一个变化是单次实验运行中的多次进样 (MISER) 技术。在 MISER 中，多次进样以与上述相同的方式运行，但数据不是作为单独的色谱图收集的，而是收集在单个数据文件中。这是定性工作的理想策略，其中进样序列中的一系列运行的快速比较可以快速识别样品组中的一般趋势和异常值（即高丰度和低丰度峰）。

        MISER 的主要缺点是和每个独特的运行收集单独的色谱图相比，峰量化的难度增加。许多用于定量的软件算法使用特定保留时间（和/或 m/z 值，取决于检测模式）下分析物峰和内标峰之间的面积比较，当多个单独的分离全部完成时，这可能更难合并绘制在单个色谱图上。虽然它仍然可以通过液相色谱图拆分程序或手动处理来完成，但这些策略需要更多的用户交互以确保所有峰都正确匹配。

        随着高通量筛选实验中运行次数的增加，整体工作量显着增加。因此，重要的是要考虑正在进行的高通量实验的总体目的，更具体地说，它们是定性的还是定量的，以确定哪种方法最适合减少循环时间。