微生物实验室消毒处理方法

（1）紫外线消毒

①在室温20℃~25℃时，220V 30W紫外灯下方垂直位置1m处的253.7mm紫外线辐射强度应≥70uW/c㎡，低于此值时应更换。适当数量的紫外灯，确保平均每立方米应不少于1.5W。

②紫外线消毒时，无菌室内应保持清洁干燥。

③在无人条件下，可采取紫外线消毒，作用时间应≥30min。室内温度<20℃或>40℃、相对湿度大于60%时，适当延长照射时间。

④用紫外线消毒物品表面时，应使照射表面受到紫外线的直接照射，且应达到足够的照射剂量。

⑤人员在关闭紫外灯至少30min后方可入内作业。

⑥按照《GB/T 15981-2021：消毒器械灭菌效果评价方法》评估紫外线的消毒与杀菌效果。

（2）臭氧消毒

①封闭无菌室内，无人条件下，采用20mg/m3浓度的臭氧，作用时间应≥30min。消毒后室内臭氧浓度≤0.2mg/m3时方可入内作业。

②按照《GB/T 18202-2000：室内空气中臭氧卫生标准》检测室内臭氧的浓度。

（3）无菌室空气灭菌效果验证方法（沉降法）

①在消毒处理后与开展检验活动之前期间采样。

②取样位点的选择应基于人员流量情况和做试验的频率。一般情况下，无菌室面积≤30㎡时，从所设定的一条对角线上选取3点，即中心1点、两端各距墙1m处各取1点；无菌室面积≥30㎡时，选取东、南、西、北、中5点，其中东点、南点、西点、北点均距端1m。

③在所选位点，将平板计数琼脂平板（90mm）或水化3M Petrifilm菌落总数测试片置于距地面80cm处，开盖暴露15min，然后，置于36℃±1℃恒温箱培养48h±1h。如果侦查某目标细菌，则可用选择性琼脂平板（如PDA平板）或微生物测试片（如3 M Petrifilm环境李斯特氏菌测试片）。

（1）培养基通常应采用高压湿热灭菌法，121℃灭15min，特殊培养基按使用者的特殊要求进行灭菌（如含糖培养基，115℃灭菌20min）。

（2）部分培养基（如嗜盐琼脂培养基、胆硫乳培养基等），只能煮沸灭菌。

（3）对热敏感的培养基或添加物质，应采用膜过滤方法进行过滤除菌。

（1）湿热灭菌：采用高压灭器，121℃灭菌20min，适用于玻璃器皿、移液器吸头、塑料瓶等，按照《GB/T 15981-2021：消毒器械灭菌效果评价方法》，评价高压灭菌器的杀菌效果。

（2）干热灭菌：采用干燥箱灭菌，160℃灭菌2h，180℃灭菌1h，适用于玻璃器皿，不锈锅器具等。

（3）液体消毒剂消毒：使用适当浓度的自配或商业液体消毒剂对工作台面、器具或设备表面进行消毒。

（1）对于培养物及其污染的物品（如斜面、api20E测试条、api20NE测试条、生物鉴定管、血清学鉴定用载玻片、mini- VIDAS测试条、用过的移液器吸头、细菌培养平皿、注射器等），应使用适当浓度的自配或商业液体消毒剂对处理后一定时间，或121℃高压灭菌至少30min，或者其他有效处理措施。将处理物倒入特殊标识的垃圾袋内，直接送到指定地点。

（2）对于实验动物尸体及相关废弃物，按照《GB 14925-2010实验动物 环境及设施》的规定进行处理。

（3）记录并保留废弃物和实验动物尸体处理的记录。