1 前言
蛋白质溶解比率,即大豆水溶性蛋白质含量占大豆粗蛋白质含量的百分率。水溶性蛋白质,指的是可溶于水的蛋白质。《GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则》中指出蛋白质溶解比率是大豆储存品质关键指标之一。本实验根据国标给出的方法对大豆的蛋白质溶解比率进行测定。
2 仪器与试剂
2.1仪器
K1160全自动凯氏定氮仪,SH420F石墨消解仪,离心机,分析天平 。
2.2试剂
硫酸(分析纯),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠,混合催化剂(3gK2SO4、0.2gCuSO4),0.1mol/L硫酸标准滴定液。
3 实验方法
3.1粗蛋白测定
3.1.1试样制备
将大豆粉碎使90%以上通过60目筛。
3.1.2取样
称取混合均匀的样品0.2g(精确至0.1mg)左右,加入消化管。加入混合催化剂:3g硫酸钾,0.2g硫酸铜,沿消化管壁加入浓硫酸10mL。
3.1.3消解
表1 消解参数设置
3.1.4测试
表2 定氮仪参数设置
3.2可溶性蛋白测定
3.2.1试样制备
将大豆粉碎使90%以上通过60目筛。
3.2.2提取可溶性蛋白质
称取粉碎试样5g(精确至0.01g,本次取5.00g)于磨口带塞锥形瓶中,加水200mL,摇匀使均匀分散,然后在25℃~30℃温度下震荡2h,取出后将混合液转移至250mL容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀后静置1min~2min,将上层清液倒入离心管中,在转速为1500r/min的离心机中离心10min,再将离心液用快速滤纸或玻璃纤维过滤,收集清晰滤液于锥形瓶中,即为样品水溶性蛋白质测定液。
3.2.3消解
吸取测定液10mL于消化管中,加入混合催化剂:3g硫酸钾,0.2g硫酸铜,沿消化管壁加入浓硫酸10mL。
表3 消解参数设置
3.2.4测试
表4 定氮仪参数设置
4 结果与讨论
4.1实验结果
表5 大豆中蛋白质溶解比率测试结果
式中50 为样品定容稀释倍数
4.2结论
测试结果显示本次测试的大豆的蛋白质溶解比率为81.74%,大于《GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则》中规定的75%,属宜存大豆。
参考文献
[1] GB/T 31785-2015 大豆储存品质判定规则
[2] GB 5009.5-2016食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[ S ] .
摘 要:采用FOSS 2200型全自动凯氏定氮仪-Metrohm 809型自动电位滴定仪联合快速检测果脯
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