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- 【导读】保存条件:G250染色液4℃保存,蛋白标准-20℃保存,本试剂盒自订购之日起九个月内有效。Bradford蛋白浓度测定试剂盒特点:1.Bradford蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世...
保存条件:G250染色液4℃保存,蛋白标准-20℃保存,本试剂盒自订购之日起九个月内有效。
Bradford蛋白浓度测定试剂盒特点:
1.Bradford蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上Z常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。
2.检测速度极快,10-20个样品只需不足10分钟即可完成。
3.灵敏度高,检测浓度下限达到25微克/毫升,Z小检测蛋白量达到0.5微克,待测样品体积为1-20微升。在50-1000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
4.不象一些其它蛋白浓度测定方法(包括Lowry法),Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.1%,TritonX-100低于0.1%,Tween20,60,80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用碧云天的BCA蛋白浓度测定试剂盒。
5.Bradford蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表,参见Bradford蛋白浓度测定兼容性表。
每个试剂盒可以检测1000个样品。Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明:
1.完全溶解蛋白标准品,取10ml稀释至100ml,使终浓度为0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。
但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
2.将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加标准品稀释液补足到20微升。
3.加适当体积样品到96孔板的样品孔中,加标准品稀释液到20微升。
4.各孔加入200微升G250染色液,室温放置3-5分钟。
5.用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。
6.根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。Bradford蛋白浓度测定试剂盒注意事项:
1.G250染色液使用前请颠倒3-5次,混匀。
2.蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3.由于Bradford方法本身的局限性,得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线,要得到更为精确的蛋白浓度结果,可以参照实际测得的标准曲线大致计算出较为精确的蛋白浓度。
4.将G250染色液回复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。
5.需可检测560-610nm之间波长的酶标仪一台,Z佳检测波长为595nm。并需96孔板。如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但是测定蛋白浓度时,需根据测定吸光度的杯子的体积,按比例调整G250染色液和样品的体积。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-08-30 09:23:16
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