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BCA蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白浓度的原理及特点
碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,TritonX-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可SY考马斯亮蓝(Bradford)蛋白浓度测定试剂盒。
BCA法蛋白浓度检测比考马斯亮蓝试剂要灵敏的多。操作简便,使用方便。
BAC蛋白浓度测定试剂盒的特点
1.步骤简单,45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,Z小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。
3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的TritonX-100,5%的Tween20,60,80。
4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
注意事项
1.长期不用时,Cu试剂与PBS稀释液可置于2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可37℃温育使其完全溶解,不影响使用。
2.样品中若含有较多干扰物质时,请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-08-30 09:23:16
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