BCA蛋白浓度测定试剂盒

 蛋白浓度测定试剂盒 

货号：PC0020 

规格 ：500微孔(500T) 

保质期 ：有效期1年。 

产品内容：

产品简介：

碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA 试剂形成紫蓝色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可SYBradford蛋白浓度测定试剂盒。

碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA 试剂形成紫蓝色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可SYBradford蛋白浓度测定试剂盒。 

操作说明：

一.   微孔酶标仪法 ：

1. 配制工作液：根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA 工作液室温24小时内稳定。

2. 稀释标准品：取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中，加PBS补足至20微升。

3.  将样品作适当稀释（Z好多做几个梯度，如作 2 倍、4 倍、8 倍稀释），加 20 微升到 96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

 4. 各孔加入 200 微升 BCA 工作液，37℃放置 15-30 分钟。用酶标仪测定 A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。 

二.   分光光度计法 

如没有酶标仪，可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。

步骤如下： 

1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量，按 50 体积 BCA 试剂加 1 体积 Cu 试剂（50:1）配制成 BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA 工作液室温24小时内稳定。 

2. 稀释标准品：取 100 微升 BSA 标准品用 PBS 稀释至 1ml（样品一般可用 PBS 稀释），使终浓度为0.5mg/ml。 

  3. 取八支（或者更多）5ml离心管，标上号，按下表加入试剂。

4. 37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值，根据标准曲线计算出蛋白浓度。

注意事项 ：      

1. 长期不用时，Cu 试剂与 PBS 稀释液可置于 2-8℃保存，如发现细菌污染则应丢弃。BCA 试剂在低温条件下出现结晶沉淀时，可37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。 

2. 样品中若含有较多干扰物质时，请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。 

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品  ：      

PC0001    BSA标准品（5mg/ml） 

PC0021    BCA试剂 

PC0030  Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 

PC0010  Bradford法蛋白浓度测定试剂盒 

R0010  GXRIPA组织/细胞快速裂解液 

R0050  核蛋白抽提试剂盒 

P1300  SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 

T1070  5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 

PR1600  预染低分子量蛋白Marker 

P1015  4×蛋白上样缓冲液（含DTT） 

D1060  10×电泳转移缓冲液 

PE0010  ECL Plus荧光检测试剂(ECL超敏发光液

仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

相关热词：

等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。